基于mtDNA COI序列的福建B型烟粉虱田间种群分析

本研究对福建B型烟粉虱10个田间种群的线粒体DNA COI基因(mtDNA COI)进行测序,并通过与NCBI数据库上埃及、湖北、武汉3个B型烟粉虱地理种群的mtDNA COI的序列进行比对分析,结果表明在核苷酸多样性、单倍型数、单倍型多样度上,不同地理种群都不一样,但是福建种群这些遗传特征数据显著高于其它地理种群.结合近年来我省田间烟粉虱种群抗药性水平迅速提高这一结果分析,可以推测,在不同杀虫剂压力选择下,不同抗性基因得以在我省不同地理群体中流动,种群内呈现比较明显的抗性遗传分化趋势,群体遗传多样性也更为丰富,表现出烟粉虱对不利环境较强的适应能力.     

微卫星位点BEM06与BEM23鉴别烟粉虱B型与Q型的有效性

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)B型与Q型是烟粉虱复合种中入侵性较强、分布较广的2种生物型,当前在许多地区混合发生。这2种生物型的快速鉴别对其种群动态调查及入侵生态学研究具有重要价值。为了验证微卫星位点BEM06与BEM23鉴别B型与Q型烟粉虱的有效性,本研究分析了这2个微卫星位点的等位基因在国内外17个B型、4个Q型、3个非B/Q型烟粉虱种群的分布特点。结果表明:这2个微卫星位点的联合使用可鉴别B型与Q型烟粉虱,但是无法有效地将B型、Q型与一些非B/Q型烟粉虱某些个体区分开来。结果提示:利用微卫星位点BEM06与BEM23鉴别B型与Q型烟粉虱具有一定的局限性,尤其是田间烟粉虱存在其他生物型时需要慎重使用这种鉴别方法。     

北京地区家蝇(Musca domestica L.)乙酰胆碱酯酶(AChE)动力学性质研究

实验结果表明,在北京地区家蝇种群以及实验室敏感系和用残杀威选育的抗性种群中,其乙酰胆碱酯酶(AChE)对乙酰硫代胆碱的米氏常数(K_m)值最大相差4倍,最大反应速度(V_(max))相差近8倍。敌百虫与家蝇AChE的双分子速率常数(Ki)值,农大敏感品系(SA)为7.41×10~4(L/mol,分~(-1)),而北京宜武种群AChE的Ki值仅为5.13×10~2,相差达144倍,崇文、密云和回龙观种群AChE的Ki值和SA品系相比,差异也在10倍以上,说明北京地区家蝇AChE对敌百虫的敏感度明显降低了。这些家蝇种群的AChE对敌百虫的亲合力(解离常数Kd)和SA品系相比,宜武种群相差近2890倍,其它种群也相差50倍以上,而磷酸化速率常数(k_2)则相差不大,说明北京地区家蝇对敌百虫的敏感度降低是由于解离常数—Kd值的改变造成的。     

小菜蛾Plutella xylostella羧酸酯酶、酰胺酶及乙酰胆碱酯酶的研究

研究结果表明,小菜蛾(Plutella xylostella)乙酰胆碱酶、酰胺酶的最适pH值分别为8.0和8.5。pH值对闳酸酯酶活力影响较小,酰胺酶和羧酸酯酶反应速度在反应开始60钟内,仍在线性范围,乙酰胆碱酯酶反应速度在反应开始的8分钟内呈线性关系。羧酸酯酶、酰胺酶和乙酰胆碱酯酶的Vmax分别为551.81(nmol/mg,mln)、5.25×10~(-4)(μmol/mg.min)和20.36(nmol/mg.min);km分别为5.52×10~(-5)(mol)、1.18×10~(-3)(mol)和8.33×10~(-3)(mol)。     

中华稻蝗山西晋源种群乙酰胆碱酯酶生化特性研究

对中华稻蝗山西晋源种群五龄若虫和成虫进行了马拉硫磷敏感性的生物测定，同时对若虫和成虫的乙酰胆碱酯酶（ACHE）特性进行了比较研究，生物测定结果表明，晋源种群若虫的LD50值（4．94μg／g虫重）是成虫（2．44μg/g虫重）的2．02倍；有机磷抑制剂对该种群若虫和成虫的AChE的体外抑制研究表明，晋源成虫AChE对氧化毒死蜱、对氧磷、甲基内吸磷的敏感性比晋源若虫分别高1．39、1．34和1．24倍．乙酰胆碱酯酶动力学研究结果表明，若虫动力学参数Km值和Vmax值均较成虫为高；用乙酰硫代胆碱（ATC）做底物测定AChE活性，若虫AChE活性是成虫的1．22倍．中华稻蝗晋源种群若虫对有机磷抑制剂敏感性下降可能与其AChE活性的增高有关，而成虫与若虫之间AChE活性的差异可能与不同阶段虫体对马拉硫磷选择压力的差异有关。     

15种植物不同溶剂萃取物乙酰胆碱酯酶抑制活性的初步研究

采用乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选模型,对采自井冈山及周边地区的15种植物(22个部位)乙醇提取物的不同溶剂萃取物进行乙酰胆碱酯酶抑制活性研究.结果表明:在乙酸乙酯萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,大部分植物均表现出一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中铁扫帚、龙爪槐茎、金银花和女贞叶表现出较强的抑制活性,抑制率均大于70%,其余大部分植物的抑制率均小于40%.在供试质量浓度在0.025 mg/mL时,只有接骨木和南方荚蒾的抑制率大于60%,其余大部分植物的抑制活性均小于30%;在正丁醇萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,15种植物均具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中铁扫帚、龙爪槐叶、龙爪槐茎和金银花茎的抑制率均大于85%,其余大部分植物的抑制率均大于40%.供试质量浓度在0.025 mg/mL时,夹竹桃的抑制率大于80%.其余大部分植物的抑制率均小于40%;在石油醚萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,15种植物均具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中菜豆、爬山虎叶、南方荚蒾和女贞叶的抑制率均大于90%.供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中抑制率大于80%的分别有爬山虎叶、鸡眼草、金银花茎、迎春花茎和叶.另外,有些植物萃取物不仅对乙酰胆碱酯酶没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用     

蕨类植物丙酮提取物对乙酰胆碱酯酶活性抑制作用的研究

目的 对采自浙江天目山的40 种蕨类植物丙酮提取物进行乙酰胆碱酯酶活性抑制作用的研究.方法 采用乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选模型.结果 在供试质量浓度在1 mg/mL时,40 种植物的丙酮提取物均具有明显的的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中假长尾复叶耳蕨、假蹄盖蕨和延羽卵果蕨等11种蕨类植物表现出较强的抑制活性,抑制率均大于90%,其余大部分植物的抑制率均大于60%.而在供试质量浓度在0.025 mg/mL时,只有少数植物表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中虎尾铁角蕨的抑制率为(65.36 ± 1.65%),蜈松草的抑制率为(53.30 ± 3.32%),其余大部分植物的抑制活性均小于50%,甚至有些植物提取物不仅对乙酰胆碱酯酶没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用.结论 假长尾复叶耳蕨等蕨类植物丙酮提取物的乙酰胆碱酯酶抑制作用值得进一步研究.     

高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇代谢酶的影响

为了解高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)代谢酶的影响,采用药膜法测定了高效氯氟氰菊酯对番石榴实蝇不同种群的毒力及代谢酶活性.结果表明:经药剂选育15代后,种群抗性倍数为11.50,达到中等抗性.在LC10,LC25和LC50处理下,敏感种群的羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)显著提升(p0.05),而抗性种群的CarE和GST无统计学意义.不同种群的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性无统计学意义.表明CarE和GST活性的提升与敏感种群的抗性发展有关.     

重庆市秀山县田间褐飞虱生物型研究

褐飞虱生物型的研究对于抗虫品种的布局、选育和褐飞虱的综合治理具有重要的指导意义.该研究用标准苗期鉴定法对重庆市秀山县田间褐飞虱种群进行生物型测定,种植具有不同抗性基因的5个水稻鉴别品种TN1,Mudgo,ASD7,Rathu-heerati和Babawee,在苗期接入采自秀山县清溪镇和平凯镇杂交稻田的褐飞虱2～3龄若虫,按国际水稻研究所的鉴别标准测定褐飞虱的生物型.结果表明除了敏感品种TN1稻株100%死亡外,具有Bph1抗性基因的Mudgo品种及具有bph2抗性基因的ASD7品种稻株也全部死亡,而分别具有抗性基因Bph3和bph4的Rathu-heerati和Babawee品种稻株未出现死亡现象,由此初步推断重庆市秀山县褐飞虱属于生物型1、生物型2和生物型3的混合种群.     

中国叶螨抗药性研究进展

由于螨类自身特点 ,以及大量、不合理使用杀虫、杀螨剂 ,螨类抗药性问题日趋严重 ,部分螨类已达到高抗水平。建立螨类敏感品系和敏感基线对于抗药性检测极其重要 ,并有利于抗药性机理的深入研究。已知螨类抗药性机理主要有 :乙酰胆碱酯酶敏感性降低、解毒代谢酶活性发生变化、表皮增厚使药剂穿透力减弱等。从遗传学角度看 ,螨类抗性基因多是由单个不完全显性基因控制 ,因此容易发生抗性且增长速度快     

高铁酸钾降解农药敌敌畏及其残留检测方法

利用农药残留快速检测法——乙酰胆碱酯酶抑制法进行测定,研究了高铁酸钾对敌敌畏农药的消毒效果。研究发现CO₂是乙酰胆碱酯酶法测定高铁酸钾对敌敌畏农药消毒效果的理想中和剂。在3min吸光度变化值(ΔA)与敌敌畏质量浓度(ρ)之间存在关系式：ΔA＝-0.1096lgρ+ 0.2227。在20～80mg/L敌敌畏水溶液中加入800mg/L K₂FeO₄处理15min可使敌敌畏质量浓度降低到0.05mg/L以下。     

福建省各地小菜蛾对不同类型杀虫剂抗性水平的比较

本文采用点滴法,比较了福建省福州、南平、厦门、龙岩等地田间小菜蛾对不同类型杀虫剂代表品种的抗性差异,并运用Shannon—Weaver的多样性指数(H’)来作为不同地方种群小菜蛾杂合度的判定指标,对其种群组成进行讨论。结果表明,厦门的种群在对菊酯与有机磷上种群杂合度较高,处于较敏感水平。对阿维茵素,福州种群与厦门种群组成相似,抗性水平相当。而龙岩种群抗性杂合度与频率相对较低,正处于发展中。     

病圃定向筛选提高棉花品种抗枯萎病的研究

采用田间病圃筛选鉴定、过氧化物酶活性测定、过氧化物酶同工酶电泳三者相结合的方法,研究了棉花通过病圃筛选由高感品种过渡到抗病品系的过程中,其抗性变化的生化机理.结果表明：高度感病材料的抗性可以通过定向选择使其抗枯萎病性能不断增强,随着抗枯萎病性能的提高,接菌后,各材料中过氧化物酶活性也随着增强,在48～72h时可达到峰值,并且抗性不同的材料对病原物侵入的敏感程度有很大的差别.     

中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用

【目的】探究中华眼镜蛇(Naja atra)血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用。【方法】不同稀释倍数的中华眼镜蛇血清与蛇毒于37℃孵育30min后,检测蛇毒中磷脂酶A2、透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶、L-氨基酸氧化酶和5′-核苷酸酶活性的变化情况。【结果】中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中磷脂酶A2和5′-核苷酸酶具有明显的抑制作用:当血清稀释2倍时,可以使蛇毒磷脂酶A2活性降低28.44%(p<0.001);当血清稀释8倍时,可以使蛇毒中5′-核苷酸酶活性活性降低23.44%(p<0.001)。中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中的透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶和L-氨基酸氧化酶均无抑制作用。【结论】中华眼镜蛇血清中存在蛇毒磷脂酶A2和5′-核苷酸酶的抑制剂,该结果为后期蛇毒抑制剂的筛选提供了理论依据。     

胆碱酯酶生物传感器测定有机磷农药敌敌畏

以固定化乙酰胆碱酯酶作敏感物质、银基汞膜电极作基础电极,制备了安培型生物传感器。采用单扫描伏安法考察了传感器对有机磷农药敌敌畏的响应特性。以乙酰硫代胆碱作底物,在0.05mol/LpH=7.0的硼砂缓冲溶液中,底物水解产物硫代胆碱在-0.33V处有灵敏的还原峰。在1.0×10-8～1.0×10-6mol/L浓度范围内对敌敌畏进行了测定,校准曲线呈现良好的线性关系,r=0.9988。抑制率为5%时,对敌敌畏的检出限为2.8×10-10mol/L。     

真菌来源的乙酰胆碱酯酶抑制剂F01-2076A的研究

利用自建的乙酰胆碱酯酶抑制剂的高通量筛选模型,从大量真菌中筛选到1株阳性菌株F01-2076.该菌株的发酵液经有机溶剂提取、硅胶柱层析及HPLC ODS反相柱层析分离,得到1个活性化合物F01-2076A,该化合物对乙酰胆碱酯酶的IC50为23.4μmol/L.通过对该化合物的紫外、质谱、核磁等理化分析,得知该化合物与已知化合物Altenusin结构相同.     

分子模拟研究1,3,4-噻二唑类衍生物对AChE/BChE的生物活性和选择性机理

乙酰胆碱酯酶(ACh E)和丁酰胆碱酯酶(BCh E)均属于胆碱酯酶类(Ch Es),具有不同的催化特性及抑制模式,是具有高度同源性的两种蛋白质,在神经系统中发挥着重要的作用.揭示胆碱酯酶抑制剂的选择性机理是开发新型的阿尔茨海默症药物的重要课题.我们研究了3种1,3,4-噻二唑抑制剂对ACh E/BCh E的生物活性和选择性机理.采用MM-PBSA方法对3种抑制剂与ACh E/BCh E之间的相互作用能进行了计算.研究结果表明,3种抑制剂对ACh E均表现出较高的活性,说明这3种抑制剂能够选择性抑制ACh E,所得计算结合自由能排序与抑制剂的实验抑制常数吻合较好.     

白背飞虱不同虫态的空间分布型及变动规律

经过对白背飞虱不同虫态在同一生境内空间格局进行连续测定,表明其仅在田间初始低密度情况下呈现随机或均匀分布,一般均为聚集分布．分布参数显示白背飞虱种群为负二项分布,基本成分是个体群;低龄若虫有较高的聚集度;高龄若虫及成虫活动能力强,空间分布图式趋于个体;不同虫态平均密度（Ｘ）与方差（Ｓ２）用负二项分布曲线公式Ｓ２＝Ｘ＋Ｘ２／Ｋｃ配合良好;采用种群聚集均数（λ）测定,平均密度２．５５头／丛是判定聚集原因的临界值．采用Ｉｗａｏ理论抽样模式,得出不同密度下的理论抽样数,并建立序贯抽样模式,可应用于田间抽样．     

稀土离子对体外培养的成骨细胞增殖、分化和功能表达的影响

采用噻唑蓝(MTT)法、碱性磷酸酯酶比活性的定量测定、细胞周期测定、矿化结节计数、扫描和透射电子显微镜观察等方法研究了不同浓度稀土离子(Ln3 ,包括La3 ,Sm3 ,Dy3 ,Nd3 ,Er3 和Gd3 )对成骨细胞UMR 106增殖、分化和功能表达的影响.结果表明,浓度在1.00×10-4 mol/L时,各稀土离子均表现出抑制成骨细胞增殖的作用. 当浓度降低到1.00×10-9～1.00×10-5 mol/L范围时,则表现出促进作用. 稀土离子(Ln3 )浓度为1.00×10-7及1.00×10-5 mol/L时,显著增强碱性磷酸酯酶比活性(P<0.01). 对其中一个稀土离子La3 作了进一步机理研究,发现极低浓度下(1.00×10-8及1.00×10-9 mol/L)的La3 促进成骨细胞从G0/G1期向S期过渡,并且增强成骨细胞的矿化能力(P<0.001). 扫描电子显微镜和透射电子显微镜结果表明,高浓度(1.00×10-4 mol/L)La3 可使成骨细胞损伤,可见表面变为光滑,微绒毛消失, 细胞膜不完整, 内质网扩张,核膜外凸,核周隙扩张. 低浓度(1.00×10-9 mol/L) La3 对成骨细胞无明显影响. 所得结果提示稀土离子(Ln3 )能够促进体外培养的成骨细胞的增殖、分化和功能表达,呈现出浓度依赖的两面性,并与稀土物种有关.     

郑州黑腹果蝇自然群体P—M细胞型多态性研究

应用性腺败育频率的遗传分析方法，对郑州黑腹果蝇自然群体的Ｐ因子活性和细胞型进行了较详尽的剖析。结果发现，该群体的Ｐ因子活性是单态的；而细胞型在群体、单雌系内和个体间皆表现出多态现象；该群体为缺乏完整Ｐ因子的Ｍ′品系。提出了Ｑ因子调控模型，以解释在缺乏完整Ｐ因子的Ｍ′品系中细胞型决定和多态现象产生的机理，并对细胞型的频率分布规律与平均ＧＤ（性腺）不育频率之间的内在联系进行了讨论。