甲硒氨酸耐热邻苯二酚2,3双加氧酶的高表达和分离纯化

甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上９０年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法,该法得以实施的首要一步是获得硒取代（硫）的高纯蛋白质。通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚２,３双加氧酶（简称ＴＣＴＤ）的基因ＰＨＥＢ克隆至表达载体ｐＲＳＥＴ,得到了高表达质粒ｐＲＳＥＴ－ＰＨＥＢ,转入Ｍｅｔ缺陷的菌株Ｂ８３４ＤＥ３。通过诱导表达和分离纯化得到了甲硒氨酸参入的ＴＣＴＤ。经质谱测定发现ＴＣＴＤ的所有７个甲硫氨酸都被甲硒     

测定饲料蛋白质含量的一种新方法

本文介绍一种测定各种饲料蛋白质含量的新方法—蛋白质水解茚三酮法。将标准蛋白和几种饲料样品加3％H_2SO_4,直接加热6小时,通过蛋白质水解产生的氨基酸与茚三酮反应的光吸收值,计算总蛋白量;与未水解的标样及饲料样品的甲醇提取液的茚三酮反应吸收值之差计算去游离氨基酸的纯蛋白质量。本法与凯氏氮素定量法无显著差异,与DAVID L·MARKKS报导的密封水解24小时的效果相同。     

粉末X线衍射测定间氨基苯甲酸/富马酸(2/1)有机盐晶体结构

以间氨基苯甲酸和富马酸为原料,采用乙醇溶液结晶法制备间氨基苯甲酸/富马酸(2/1)有机盐粉晶体。利用粉末X线衍射数据,通过指标化确定其晶胞参数并采用直接空间法解析其晶体结构。结合傅里叶红外光谱仪测定羧酸根中H的结合情况,利用Rietveld精修技术对其晶体结构进行精修,最终测定了间氨基苯甲酸/富马酸(2/1)有机盐的晶体结构。该晶体结构中不对称单元中包含1个质子化的间氨基苯甲酸和半个去质子化的富马酸。羧基上和氨基上的H全部参与氢键作用。系统分析了该晶体结构中氢键的形成方式,揭示了氢键在晶体结构中的堆砌作用,并展示了粉末X线衍射技术在有机分子晶体结构测定中应用前景。     

分子探针N~6-羟基乙基腺苷同步荧光测定人血清中蛋白质

在模拟人体生理条件下,基于N6-羟基乙基腺苷(HEA)与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成的复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,研究HEA-HSA体系的同步荧光光谱特征;同步荧光光谱特征及强度与Δλ值、反应温度等因素有关.在此基础上,建立了以HEA为探针测定蛋白质的新方法.在最佳实验条件下,HEA-HSA体系的同步荧光强度分别在0~331.2μg.mL-1和331.2~579.6μg.mL-1的浓度范围内与蛋白质浓度呈良好的线性关系,方法的检测限为4.43 ng.mL-1.实验结果表明:该法具有简单、快速、灵敏度高等优点,可直接用于人血清样品中蛋白质总量的测定,结果令人满意.     

测定食品中蛋白质方法的改进

测定蛋白质的方法多为常量凯氏定氮法,绝大部分食品在测定蛋白质是需要经过硫酸消化,将有机态氮转化成无机态氮,然后再进行测定。存在样品消化费时,试剂耗量大,不安全,处理样品量少等不足,本文采用多功能快速消解仪消化样品可大大缩短分析时间,节约用电量,消化样品可靠;凯氏氮/蛋白质测定仪使测定过程操作简便,不需定容,消化完全直接上机蒸馏。     

达旦黄-曲通X-100体系共振光散射法测定蛋白质

本文基于在Triton X-100存在下,蛋白质与达旦黄作用使得体系的共振光散射增强,增强作用的强弱与蛋白质的含量成正比,据此建立了共振光散射测定蛋白质的新方法.     

白酒中痕量锰的催化动力学分光光度法测定

本文提出了用N,N—二甲基苯胺—KIO_4体系催化动力学分光光度法直接测定白酒中痕量锰的新方法,该法操作简单、快速、灵敏度高.     

偶氮胭脂红G分光光度法测定蛋白质的研究

 偶氮胭脂红G在酸性介质中与蛋白质迅速结合,生成一紫红色复合物,该复合物在570nm处有最大吸收,且其吸光强度与牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)、免疫球蛋白(IgG)的质量浓度至少在15.0μg/mL范围内有线性关系.依此建立的测定蛋白质的光度分析新方法不受蛋白酶和大部分其它共存物质的影响,具有较好的选择性和较宽的线性范围,同时方法快速、稳定,用于人血清样品中总蛋白含量的测定,所得结果与测定蛋白质的经典方法考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

氮川丙酰胺的晶体结构(Ⅰ)

氮川丙酰胺的结构式为,简称NTP。它属于R3c空间群,取六方格子时,a=6=11.306,c=15.723,每个晶胞有六个分子。我们用直接法确定了它的晶体结构,讨论了分子之间的联系。 本文涉及到直接法测定相角的几个实际问题。我们推导出一系列R3c的∑_1公式:等等。我们也把简称为PSTAN—1算法引进多重解程序。上述这些已应用于NTP晶体结构的测定工作,看来是成功的。     

磁化合成铁氧体催化机理的探讨

本文用磁化合成法制取了一种新型高效铁氧体催化剂,用高分辨分析电镜,测定了其晶体结构、化学组成和原子级的显微形貌;提出了一种催化机制的新见解和一个研制催化剂的新方法.     

依文思蓝-蛋白质体系的共振瑞利散射光谱及其分析应用

基于蛋白质对依文思蓝共振瑞利散射的增强作用,建立了一种测定水溶性蛋白质的新方法.在酸性BR缓冲溶液中,依文思蓝在365 nm处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系.对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的检出限均低于15 ng/mL.该方法快速、简便、灵敏、稳定、选择性好,用于人血清中总蛋白质含量的测定,结果满意.     

血清蛋白与SDS作用的RRS研究及应用

在酸性clark-lubs缓冲溶液中，十二烷基磺酸钠（SDS）与牛血清蛋白结合，使体系的共振Rayleigh散射信号显著增强，研究了相应的光谱特征，影响因素和适宜的反应条件，在此条件下，几种血清蛋白质在一定浓度范围内与共振Rayleigh散射信号增强呈线性关系，建立了定量测定蛋白质的新方法，该法操作简便、灵敏度高、线性范围宽以及重现性较好，可用于多种蛋白质的测定，本法应用于人血清样品以及合成样品中蛋白质的定量分析，结果满意。     

水扬酸盐光度法测定蛋白质

提出一种测定蛋白质的新方法,样品与浓硫酸共热,蛋白质中的氨基氮转为氨,氨由水扬酸盐光度法测定,本法中有色化合物的最大吸收波长700nm,以氮计,表观摩尔吸光系数ε700＝1.4×104mol-1Lcm-1,线性范围0-5ug蛋白质/ml,检出限6.9×10-6g蛋白质/L.     

紫外导数分光光度法直接测定炼厂污水中的挥发酚

本文介绍了一种用紫外四阶导数分光光度法直接测定炼厂污水中挥发酚的新方法。本法省去了萃取、蒸馏和比色等繁琐的预处理和测定步骤,采回水样可以直接测定,20分钟内可测出结果。本法灵敏、准确,测定结果与标准法十分吻合。本法的线性范围为0～32ppm;回收率在93％～108％之间;检出限为0.2ppm.     

晶体结构相变的Morse理论分析

运用Morse理论讨论晶体结构的相变问题,给出了寻找晶体结构相变对称性破缺的一种更简洁的新方法．     

一种蛋白-药物结合常数的测定方法

目的建立一种蛋白-药物结合常数的测定新方法。方法以固定化牛血清白蛋白为固定相,磷酸盐缓冲溶液为流动相,获得不同进样量下药物的液相色谱保留参数,以溶质进样量与保留值的关系方程进行拟合,计算蛋白-药物结合常数(直接进样法)。结果测定了咖啡酸(CA),汉黄芩素(WO)和木犀草素(LU)3种药物与固定化牛血清白蛋白(BSA)在人体生理条件(37℃,pH7.40)下的结合常数,其数值高于竞争置换法,但与相关文献数据接近。结论直接进样法可作为一种新方法用于研究蛋白-药物的相互作用。     

黄芩苷稳定常数的测定研究

研究了测定黄芩苷稳定常数的新方法.提出了借助电位滴定法,以pH玻璃电极为指示电极,采用自动滴定装置,用氢氧化钾溶液作滴定剂进行直接滴定,通过绘制黄芩苷的滴定曲线,实现了用分段拟合生成函数法对测定数据进行统计处理,计算出了黄芩苷的两级稳定常数.结果表明,该测定方法与文献方法相比,精度更高,为黄酮类物质稳定常数的测定提供了一种新方法.     

奶粉品质鉴定——FTIR光谱法和杜马斯燃烧法联用

我国现行国家标准GB 5009.5—2016《食品中蛋白质的测定》中的杜马斯(Dumas)燃烧法是先将样品燃烧测出含氮量,然后根据氮元素与蛋白质换算系数计算蛋白质的含量,如果添加含氮量高的物质,如三聚氰胺,就可以测出较高的"蛋白质含量".采用普通FTIR光谱定性鉴别出奶粉的主要组成成分,然后用杜马斯燃烧法准确测出奶粉中的氮元素和碳元素含量,通过蛋白质换算系数计算出蛋白质含量,可以避免上述由于添加违规化学物质造成测定蛋白质含量虚高的结果;同时通过C/N元素含量比,进一步印证奶粉中的营养成分组成.     

分光光度法测定人血清中微量蛋白质的研究

研究了试剂3,6-二氯荧光素与蛋白质的显色反应,建立了一种测定蛋白质的新方法。在pH=7.00的缓冲溶液中,3,6-二氯荧光素与蛋白质发生灵敏的显色反应,生成1:1的复合物,最大吸收波长为500nm且在4h内稳定,蛋白质在3×10-8～3×10-7g/L范围内符合比尔定律,且回收率在90%～101%之间。探讨了氨基酸及金属离子K 等对测定的影响。测定了人血清中蛋白质的含量,结果满意。     

基于双功能荧光标签8-氨基1,3,6-萘三磺酸的N-连接糖基化富集方法

发展了基于双功能荧光标签8-氨基1,3,6-萘三磺酸(ANTS)选择性糖基化蛋白质标记和二氧化钛(TiO2)亲和富集的N-连接糖基化富集新方法.模式蛋白质细胞色素c、肌红蛋白、核糖核酸酶b、抗生素和α-1-抗胰蛋白酶经ANTS标记后,所有糖基化蛋白质均发出亮绿色荧光,而非糖基化蛋白质则不能观测到荧光;进一步采用TiO2对酶切产生的N-连接糖基化肽段进行富集,同时实现了中性糖肽和唾液酸糖肽的选择性富集.通过进一步分析人血清N-连接糖基化蛋白质,共鉴定到39个唯一的N-连接糖蛋白,包括了53个唯一的N-连接糖基化位点;此外,该方法与采用TiO2法直接富集以及肼化学法富集鉴定到的交叠糖基化位点数均小于40%,说明这一新方法与传统方法在糖基化肽段富集方面具有一定的互补性,有望用于复杂蛋白质样品的N-连接糖基化高效富集.