一株鹅源多杀性巴氏杆菌TSP-1的分离鉴定与药敏试验

为了确定引起雏鹅急性死亡的病原菌,从送检的病死雏鹅的肝脏、心血、肺脏病料组织中分离到1株病原菌,并命名为TSP-1。通过培养特性、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因序列分析等鉴定方法,分离菌株TSP-1鉴定为多杀性巴氏杆菌。动物试验表明,分离菌株TSP-1具有很强的致病性。药敏试验结果表明:分离菌株TSP-1对头孢克肟、氟苯尼考、阿奇霉素、阿米卡星等4种药物高度敏感;对头孢曲松、庆大霉素、恩诺沙星、强力霉素等4种药物中度敏感;对氨苄西林、阿莫西林、四环素等6种药物耐药。     

鼠奇异变形杆菌的鉴别诊断

目的对一株小鼠奇异变形杆菌进行了鉴定,为实验动物细菌检测、鉴别诊断提供参考依据。方法通过培养特性、菌落形态、染色和系列生化试验等检查,对疑似沙门氏菌的小鼠分离菌株进行初步鉴定,并采用血清凝集试验对小鼠分离菌株作进一步鉴定。结果通过表型生物学特性鉴定,并结合血清学诊断鉴别方法,确证该小鼠分离菌株为奇异变形杆菌。结论尽管检出的奇异变形杆菌不是SPF动物所必须排除的病原菌,但仍需指出:该菌为条件致病菌,对实验动物和研究人员均有潜在的危害,对科学实验也可能造成不利影响,故应引起高度重视。     

河北省规模化猪场猪李氏杆菌的分离与鉴定

河北省某规模化猪场猪群发生李氏杆菌病,在试验过程中,采集病死猪的肝、脾等病理变化比较典型的病料,进行病原菌的分离培养与纯化,并对其进行鉴定。分离出了1株产单核细胞李氏杆菌。药敏试验表明,病原菌对庆大霉素和恩诺沙星极为敏感;动物接种试验表明,分离株具有较强的致病性,对雏鸡皮下接种、口腔接种和腹腔接种,小白鼠腹腔接种可引起发病,导致死亡。     

貉源致病性沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验分析

为了确定引起幼貉急性死亡的病原菌,从送检的病死幼貉的肝脏中分离到1株病原菌。通过常规的鉴定方法和16S rRNA基因序列分析鉴定方法,分离菌株被鉴定为沙门氏菌。动物致病性试验表明,分离菌株具有很强的致病性。药敏试验结果表明:分离菌株对头孢曲松、头孢拉定、大观霉素、新霉素、替米考星等5种药物高度敏感;对其他药物存在不同程度的耐药。     

副猪嗜血杆菌hhdB-A基因的鉴定和分析

为了明确副猪嗜血杆菌致病菌株的毒力相关因子,从广东省不同地区发病猪场送检病猪中分离到9株细菌(H1～H9),并对其hhdB-A基因进行了鉴定和分析。结果显示,所分离的9株细菌经形态观察、生化特性鉴定和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌阳性,并具有卫星现象和不溶血特征。用hhdB-A基因引物从分离菌株中扩增到了特异性片段,序列分析表明,所获得的hhdA基因序列与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165,HPS59的hhdA基因同源性为98%～100%,分离菌株hhdA基因之间序列同源性为99.0%～99.9%;hhdB基因序列与SH0165的hhdB基因同源性为99%,分离菌株hhdB基因之间序列同源性为97.5%～99.8%;推导的氨基酸序列与少数放线杆菌、杜克雷嗜血杆菌的溶血素蛋白具有一定的相似性。RT-PCR扩增到了hhdB-A基因的目的条带,表明该基因在分离菌株中得到了相应的表达。     

内蒙古双峰驼乳及乳制品中乳杆菌的分离及其

本实验主要对11份双峰骆驼乳样品进行了乳酸杆菌的分离和生物学特性的研究。将分离到的16株革兰氏阳性、过氧化氢酶试验阴性杆菌,分别鉴定为Lactobacilluscasei subsp. casei(5株)、Lactobacillus plantarum(4株)和Lactobacillus delbruekii subsp.lactis等同型发酵乳杆菌和2株异型发酵乳杆菌(AZ41-1和AZ44-1)。多数菌株为15℃生长良好,以中温性菌株占优势。脱脂乳中产酸量较低。     

奶牛乳房炎致病菌的分离鉴定

对山东聊城地区多家奶牛养殖场和养殖户采集的63份乳房炎奶样进行细菌分离鉴定。采用鉴别培养基及生化鉴定方法对奶样中的病原菌进行分离鉴定并做了药敏实验。分离菌鉴定为链球菌,葡萄球菌,大肠杆菌,棒状杆菌,绿脓杆菌等。药敏试验表明:氧氟沙星、强力霉素、氯霉素、庆大霉素为较为敏感的治疗药物。     

犊牛源粪肠球菌分离鉴定及药敏试验

从河北省围场县某养殖场患病死亡的犊牛脏器样品中分离到1株优势菌株,对其进行常规形态学观察、生化鉴定、16S r DNA基因序列测定、动物致病性试验及药敏试验。结果显示,分离菌株的生化鉴定特性与粪肠球菌的生化鉴定特性相符;分离菌株16Sr DNA基因序列与粪肠球菌的同源性为96. 2%;在系统发育进化树上分离菌株与粪肠球菌聚为一簇;分离菌株对小白鼠具有一定的致病性,并将其命名为EFC QHD-1;分离菌株EFC QHD-1对替米考星、复方新诺明、卡那霉素等耐药;对环丙沙星、氟苯尼考、阿莫西林等敏感。     

腾冲热海嗜热芽孢杆菌的分离鉴定

从云南腾冲热海温泉中分离得到26株嗜热芽孢杆菌菌株,对其中一株嗜热芽孢杆菌菌株NHH4进行电镜形态、生长特征、碳源、氮源等分析。该菌株细胞形态为杆状,产芽胞,革兰氏染色阳性,严格好氧,其最适生长温度为55℃,最适为pH7.5。能利用葡萄糖、蔗糖、D-果糖、D-甘露糖,不能利用麦芽糖、乳糖、D-木糖、L-鼠季糖。通过对其16S rRNA基因序列的系统发育分析表明,NHH4与Bacillus licheniformis strain N8的序列相似性为99%,将此菌株鉴定为嗜热地衣芽胞杆菌菌株。     

奶牛场中乳房炎相关致病菌的分离与鉴定

旨在调查成都市某奶牛场引起乳房炎相关致病菌的流行及分布.通过对患乳房炎病牛乳汁、奶牛乳头、皮毛、牛圈、挤奶车间等部位和生活环境进行样品采集,初步分离奶牛群潜在病原菌,并对筛选得到的菌株进行16S rDNA测序鉴定和分析.结果:在奶牛场共采集样品1 000份,分离得到菌株494株,细菌总分离率为49.40%.分离菌株包括13类.其中,葡萄球菌占64.37%,粪肠球菌占29.15%,为奶牛场主要流行优势菌;另外,变形杆菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌、海氏肠球菌、乳棒状杆菌、克雷伯氏菌、浅绿气球菌、猪粪细菌、尿链球菌、格氏乳杆菌等也有检出.进一步对分离得到318株葡萄球菌共鉴定出18个种,其中,阿尔莱特葡萄球菌(33.65%)、腐生葡萄球菌(12.89%)和溶血葡萄球菌(11.95%)为优势葡萄球菌;在乳房炎奶样中检出了14株金黄色葡萄球菌,以及挤奶器样本中检出了2株金黄色葡萄球菌,其他样本中未检出金黄色葡萄球菌.应加强对奶牛场生产环节致病菌的监测与防控及日常消毒措施.     

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况

目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。     

犬埃立克体动物感染实验

为探讨比格犬和C3H小鼠对犬埃立克体的敏感性 ,建立犬埃立克体病实验模型 ,用我国埃立克体病病犬血白细胞分别接种比格犬和C3H小鼠。接毒后比格犬和C3H小鼠均为PCR阳性 ,比格犬与最易感的德国牧羊犬自然感染埃立克体病的临床表现和病理学变化基本一致。结果表明比格犬和C3H小鼠对犬埃立克体均有较高敏感性     

北京地区2008～2011年实验动物绿脓杆菌检测结果与分析

目的了解SPF级实验动物中绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）感染现状和规律,为防止绿脓杆菌感染提供依据。方法参照国家标准,对SPF级小鼠、大鼠、豚鼠和兔进行检测。结果在2008～2011年中检测的SPF级动物中,PA感染的阳性率为8.9%（267/2988）;不同动物感染率无显著差异;不同时间（不同年份和不同季度）PA阳性检出率无显著差异;其中,免疫缺陷动物的PA阳性检出率为32.5%明显高于免疫功能正常动物的7.6%;PA检出率随着送检单位和动物数量的增加逐年升高;不同动物群体间感染率相当,且保持稳定。结论北京地区SPF级实验动物中PA检出率较高,应加强管理。     

树对人乙型肝炎病毒易感性的验证

为验证树对人乙型肝炎病毒 (HBV)的易感性 ,用含 HBV的人血清接种给 10只成年树 (雌雄各半 )。然后每周抽血 1次 ,每只动物共抽血 11次。用不同公司生产的 EL ISA试剂检测接种后的动物血清感染指标。实验观察至 13周 ,结果分别有 9只和 7只动物出现 HBs Ag阳性 ,持续最短 1周 ,最长 7周。用 PCR检测 ,结果有 1只动物连续 4周在血清中检测出 HBV DNA。表明树能感染人 HBV,但实验有待改进以延长感染持续时间     

树鼩对人乙型肝炎病毒易感性的验证

为验证树Ｑｕ对人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的易感性,用含ＨＢＶ的人血清接种给１０只成年树Ｑｕ（雌雄各半）。然后每周抽血１次,每只动物共抽血１１次。用不同公司生产的ＥＬＩＳＡ试剂检测接种后的动物血清感染指标。实验观察至１３周,结果分别有９只和８只动物出现ＨＢｓＡｇ阳性,持续最短１周,最长７周。用ＰＣＲ检测,结果有１只动物连续４周在血清中检测出ＨＢＶ ＤＮＡ。表明树Ｑｕ能感染人ＨＢＶ,但实验有待改进以延长感染持续时间。     

基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计

目的以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计。方法用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20) 28 d,进行脏垫料接触感染。之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析。结果对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20%),第28天阳性检出率达到最高,为80%,第42天阳性检出率为50%,至第56天无阳性检出。血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50%)。对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20%小鼠粪便中检出MHV。而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体。结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠。由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法。     

医学实验动物学专业毒理学教学实践

摘要: 目的 为医学实验动物学专业毒理学课程的教学提供借鉴。方法 从教学内容、教学方法和考核方式等方 面总结近 10 年的实验动物毒理学教学实践。结果 设置了较合理的医学实验动物毒理课程的教学内容,实践了 多种教学方法,并提出 PBL( Problem Based Learning,PBL) 教学模式和实验教学改革措施,取得了良好效果。结论 这些教学经验对实验动物毒理学教学有参考价值。     

中国实验动物人才培训考核信息系统的建立研究

目的建立全国统一标准的实验动物人才网上培训、考核及管理体系。方法利用信息技术,设计建立健全考试平台,依据建立的实验动物从业人员分类、分级培训考试考核标准,完成实验动物从业人员培训、考核信息管理体系。结果实验动物人才培训考核信息系统实现在线报名、学习、考试、阅卷、打印成绩等功能。结论实验动物人才培训考核信息系统能够显著方便从业人员的学习和考试,能够改进政府主管部门的管理工作。     

慢性尿路感染大鼠模型的动态变化研究

目的 建立慢性尿路感染大鼠模型并研究相关指标的动态变化。方法 雌性SD大鼠经膀胱处注入大肠杆菌液,以诱导慢性尿路感染大鼠模型,并灌胃盐酸左氧氟沙星治疗。第0、7、14、21、28天动态检测动物体温、尿细菌数、血常规及BUN、Cr值的变化。第31天进行肾脏及膀胱感染菌计数及组织病理学检测。结果 模型对照组在第7、14天体温显著升高(P<0.05);第7～28天尿细菌数、第30天肾脏及膀胱感染菌数明显增多(P<0.05);第30天膀胱及肾脏病理检查可见炎性细胞浸润及黏膜下层血管扩张充血。盐酸左氧氟沙星组尿细菌数、肾脏及膀胱染菌数明显下降(P<0.05),膀胱及肾脏炎症明显减轻。结论 此法适用于建立慢性尿路感染大鼠模型及进行药效学观察。     

动物实验活动中病原微生物危害风险评估体系的建立

摘要: 动物实验活动中存在着诸多潜在的危险因素,且涉及多种病原微生物。因此,从生物安全角度出发,对动物 实验活动要进行危害风险评估。本文就病原微生物危害风险评估要素、风险评估过程以及评估体系分析等相关问 题进行探讨。建立了以风险评估为基础的安全监测与预警系统,确保动物实验人员和环境的安全。