柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定研究

目的建立柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定方法。方法采用Alltima C18（5μm，150mm×4．6mm）色谱柱；流动相为甲醇-0．3％磷酸溶液（50：50）；检测波长为280nm。结果黄芩苷峰与其他杂质峰分离良好，在0．3302-0．7706雌范围内，黄芩苷线性关系良好（r=0．9998），平均回收率为101．05％（n=2）RSD=1．39％。结论该方法简便易行，准确度高，重现性好，可用于柴黄颗粒的质量控制。     

草石蚕水苏糖检测技术的研究

建立了我国传统植物草石蚕块茎中水苏糖的定性分析和定量检测方法。采用薄层层析（TLC）法定性分析，选择乙酸乙酯／甲醇／水／冰醋酸（3／2／1／2）为展开剂，采用二苯胺-苯胺一磷酸为显色剂。该条件下水苏糖Rf值为0．47，显色点为棕黄色，斑点清晰，与其他糖分分离良好。用高效液相色谱-示差折光检测（HPLC—RID）法定量检测，采用Kromasil NH2柱，流动相为乙腈／水（55／45，v／v），柱温为30℃，流速为1．0mL／min，进样体积10μL，该色谱条件下，水苏糖峰出峰对称性好，时间较短（9．5min），水苏糖浓度在1．0～8．0mg／mL范围内线性关系良好（R2=0．9996），回收率在96．O％～102．5％之间。在生产应用中，可以根据实际采用其中一种或者两种方法结合，以满足检测需要。     

反相高效液相色谱测定庆大霉素效价方法的研究

建立了反相高效液相色谱（Reverse Phaseliquid Chromatography，RP—HPLC）测定庆大霉素效价的方法，结合管碟法所做的生物效价进行比较，其相关度R。：0．9823，RSD：1．29，证明RP—HPLC可直接测定庆大霉素的效价，从而解决了生测效价程序复杂，人为误差大的问题。RP—HPLC测定方法：采用岛津高效液相色谱SPD．IOAVP、UV．VIS、LC．IOATVP，PepMapC18Trs4．6×150mmSilicaC18（5μm300A）PhenomenexODS色谱柱，流动相MILLI-Q水：冰醋酸：甲醇（比例为25：5：70）配置0．02mol／L庚烷磺酸钠溶液，流速1．0mL／min，检测波长330nm，检测灵敏度0．020AUFS，柱温为室温，进样量20μL，在10min内可对样品液中C1、C1a、C2a、C24种物质同时进行定性定量测定。     

无溶剂微波辅助-液相微萃取测定土壤中的滴滴涕

建立了一种快速、有效、环境友好的样品前处理方法，即无溶剂微波辅助-液相微萃取技术，并结合高效液相色谱法对土壤中的滴滴涕残留进行了测定分析，同时对影响萃取效率的相关因素，如萃取溶剂的种类、微波辐射功率、萃取时间和pH等因素进行了优化。最终确定最佳优化条件为：萃取溶剂为正庚烷，微波辐射功率为120w，萃取时间为1rain，pH为5。在最优条件下，滴滴涕的检出限（S／N=3）为0．18μg／kg，定量限（S／N=10）为0．59μg／kg，实际土壤加标回收率87．34％～96．41％之间，相对标准偏差RSDs在5．75％～6．72％之间。理论分析和实验结果表明，该方法具有操作简便，节省溶剂，快速，高效，选择性好等特点。     

GITC柱前衍生化RP-HPLC检测吡喹酮中间体的对映异构体

目的建立柱前衍生化反相高效液相色谱法(RP-HPLC),分离和检测吡喹酮中间体1-[(苯甲酰氨基)甲基]-1,2,3,4-四氢异喹啉(BTIQ)的对映异构体。方法以2,3,4,6-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯(GITC)作柱前衍生化试剂,考察衍生化试剂用量、反应溶剂、衍生化时间、流动相组成、柱温等因素对手性BTIQ分离和检测的影响。结果衍生化产物在C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)上进行分离,较优色谱分离条件为以乙腈-0.02 mol/LKH2PO4(40∶60,v/v)为流动相,检测波长为250 nm,流速1.5 ml/min,柱温30℃。在该色谱条件下BTIQ衍生物可达到基线分离,分离度为2.1,非对映异构体的保留时间在40 min以内。在2~320μg/ml范围内BTIQ对映异构体浓度和峰面积线性关系良好。结论本文所建立的方法简便、快速、可靠,可用于吡喹酮中间体BTIQ的手性分离,也可为其光学纯度的质量控制提供参考。     

超临界CO2萃取法提取库尔勒香梨精油及其成分分析研究

采用超临界CO2萃取法提取库尔勒香梨精油，用气相色谱-串联质谱技术对其成分进行分析，并对几种提取方法进行综合比较。结果表明，与水蒸气蒸馏法、固相微萃取法相比，超临界CO2萃取法具有香梨精油提取率最高，为0．0549％。感官分析的结果表明，超临界CO2萃取法所得的库尔勒香梨精油颜色为橙色透明液体，而且风味好。气相色谱-质谱联用（GC-MS）分析结果表明：超临界CO2萃取法所得的香梨精油中共鉴定出28种成分。丁酸乙酯、顺-7-十四烯-1-醇和乙酸己酯的含量最高，含量分别为5．19％、4．85％和4．37％。     

脂多糖致感染性脑水肿大鼠星形胶质细胞的活化和凋亡

目的通过观察脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）致大鼠感染性脑水肿后星形胶质细胞的凋亡、活化及iNOS表达情况，探讨在LPS致脑水肿中星形胶质细胞的作用。方法84只雄性SD大鼠，随机分为3组：空白对照纽（C组，n=12）；生理盐水对照纽（S组，n=12）；感染性水肿组（L组，n=60）。感染性脑水肿组又按颈内动脉注射脂多糖后6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组（n=12）。向颈内动脉注射脂多糖LPS150μg（0．15ml）建立大鼠感染性脑水肿模型。采用HE染色、流式细胞检测和免疫纽化染色分别观察脑组织病理改变、星形胶质细胞凋亡、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和iNOS表达情况。结果与C组和S组比较，L组大鼠星形胶质细胞胞体变大、突起增多；细胞内GFAP和iNOS表达增强，12h达高峰，除72h组，其余亚组均有统计学差异（P〈0．05）；各亚组星形胶质细胞凋亡增多（P〈0．05），24h凋亡最显著。C组和S纽比较无统计学意义（P〉0．05）。结论感染性脑水肿后星形胶质细胞凋亡增加，异常活化，分泌iNOS，参与感染性脑水肿的形成，在脑水肿的发生发展中发挥重要作用。     

潮湿环境下非氢类金刚石薄膜的超自润滑性能研究

采用脉冲激光沉积（PLD）方法在不同衬底温度条件下制备了不含氢的类金刚石薄膜，在相对湿度为80％与5％的条件下测试了类金刚石薄膜的摩擦学特性．由于PLD方法的独特性，薄膜具“软-硬”双层结构，保证了薄膜在潮湿条件（RH=80％）下仍保持非常优异的摩擦性能，摩擦系数与磨损率最低达0．045与5．94×10^-10mm^3·N^-1·m^-1，相对于干燥条件下测试结果来看，几乎没有明显变化．原子力显微镜与白光干涉仪测试结果表明，薄膜的均方根粗糙度小于1nm，最小值为0．209nm；XPS表明薄膜sp^3最高含量达72％，并且Raman光谱结果表明室温下制备的薄膜是非晶网络结构；纳米压痕迹测试表明，薄膜最高硬度与弹性模量分别达51 GPa与350 GPa，且随衬底温度升高而降低；样品表面的水接触角均大于90°，薄膜表面疏水并具有极低的表面能．     

胃癌侧群细胞耐药性研究及干细胞相关基因检测

目的研究胃癌侧群（Side Population，sP）细胞对化疗药物5-Fu（氟尿嘧啶）的耐药性及可能机制，并检测干细胞相关基因Nanog、Musashi-1及cD44的表达情况。方法选择人胃癌细胞株sGc-7901，以荧光染料H0echst 33342染色，维拉帕米桔抗对照，应用流式细胞仪分选sP细胞和nonsP细胞。细胞耐药实验比较sP细胞与nonsP细胞对化疗药物5．Fu的耐药性差异；westem_h10t检测ABcG2和bcl-2蛋白表达情况；流式细胞仪分析细胞周期；荧光定量PcR检测两组细胞中干细胞相关基因Nanog、Musashi-1及cD44mRNA的表达差异。结果胃癌细胞株sGc．790l中sP细胞的比例为2．8％，sP细胞对5-Fu的耐药存活率明显高于non-sP细胞（P〈0．05），与nonsP细胞相比，sP细胞高表达耐药蛋白ABcG2和抗凋亡蛋白bcl-2，有更多的细胞处于c0／G1期（P〈0．05），并高表达干细胞相关基因Musashi-1和cD44。结论胃癌sGC_7901细胞株中sP细胞对化疗药物5．Fu的耐药性明显高于nonsP细胞，其耐药机制可能与sP细胞高表达耐药蛋白ABcG2和抗凋亡蛋白bcl-2，有更多细胞处于G0／Gl期有关；Musashi-1和cD44可能是相对特异性的胃癌干细胞标志物。     

香烟烟雾提取物对人内皮细胞细胞色素C氧化酶活性及细胞凋亡的影响

目的探讨香烟烟雾提取物（cigarette smoking extract，CSE）对内皮细胞细胞色素C氧化酶（cytochmme Coxidase，COX）活性及凋亡的影响。方法体外培养ECV304，分别给予0％、0．5％、1％、5％CSE刺激12h，及5％CSE刺激0h、6h、12h、24h后，生化法检测COX活性；投射电镜和流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果CSE引起COX活性下降，且随着刺激浓度和时间的增加而下降（P〈0．05）；电镜示CSE干预组细胞出现明显的凋亡形态学改变；流式细胞仪结果示不同浓度CSE分别作用12h后凋亡率依次增高，除O％CSE组和0．5％CSE组间比较无统计学意义（P〉0．05），余各组间比较均有统计学意义（P〈0．05）；5％CSE作用不同时间后，随着干预时间的延长细胞凋亡率逐渐升高（P〈0．05）。结论CSE抑制内皮细胞COX活性，呈浓度和时间依赖性；CSE诱导内皮细胞凋亡，呈浓度和时间依赖性；COX活性的下降可能在CSE所致的内皮细胞凋亡中具有重要作用。     

加替沙星-壳聚糖纳米粒胶联羊膜药膜的制备及体外实验研究

目的制备一种新型生物多功能复合材料——加替沙星．壳聚糖纳米粒胶联羊膜药膜，并观察其体外缓释性能及抑菌作用。方法采用离子胶联法制备加替沙星－壳聚糖纳米粒并检测其表征，然后将栽药纳米粒加入到纤维蛋白胶中，混匀后再与羊膜胶联制成加替沙星－壳聚糖纳米粒胶联羊膜药膜，光镜及扫描电镜下观察其形态学特征，高效液相色谱法测定其中加替沙星的浓度，微量肉汤稀释法检测其体外抑菌活性。结果加替沙星纳米粒的粒径为291±33nm，载药量为10．46％，包封率为61．32％。载有纳米药物的纤维蛋白胶与羊膜基底面粘合紧密，呈圆形的加替沙星纳米粒附着在胶原纤维的网状结构上。在体外，加替沙星－壳聚糖纳米粒胶联羊膜药膜可持续释药达15天，对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度分别为0．05μg／ml和0．42μg／ml。结论加替沙星－壳聚糖纳米粒胶联羊膜药膜在体外具有良好的缓释性能及抑茵作用。     

运用磁珠分选法建立免疫细胞共培养体系

目的以相互作用的几种免疫细胞上共同表达的抗原物质为标志,运用磁珠分选技术,从慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中同时获得并建立体外多细胞共培养体系,体外观察细胞之间的相互作用.方法采用梯度离心法分离30例慢性乙肝病毒感染者外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠分选法分离获得 CXCR5+细胞,通过流式细胞仪检测 CXCR5+细胞纯度和组成,并将 CXCR5+细胞进行体外培养.在分离得到的 CXCR5+细胞的基础上,将 CXCR5+细胞分为3组,分别为对照组:不加任何刺激;实验组一:加入 IL 21刺激培养,实验组二:与人肝癌细胞系(HepG2)2215细胞混合培养.体外培养一周后,流式细胞仪检测实验组与对照组细胞 B细胞数量变化,ELISA测定培养体系中上清液 HBe抗体的含量.结果1)用流式细胞仪鉴定 CXCR5+细胞的纯度和构成:CXCR5+细胞纯度为85.5±5.8%,其中 Tfh细胞占23.8±7.4%,B细胞占35.6±7.6%;2)培养7天后,IL 21刺激组 B细胞百分率为47.2±1.8%,与(HepG2)2215混合培养组 B细胞百分率为40.2±3.5%,空白对照组 B细胞百分率为36.6±7.5%,IL 21刺激组与对照组,(HepG2)2215混合培养组与对照组 B细胞百分率均有显著差异(p<0.05);3)ELISA检测培养液上清 HBeAb定量,IL 21刺激组为0.668±0.094pg/ml,空白对照组为0.378±0.088pg/ml,两组有显著差异(p<0.05).结论使用间接免疫磁珠分离法可成功建立 CXCR5+B淋巴细胞和 Tfh细胞的共培养体系,为进一步体外研究细胞之间相互关系奠定基础     

齐墩果酸抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导凋亡的作用研究

目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）关系。方法将浓度分别为40、80、100μg／ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24h后，DAPI染色，以荧光显微镜观察细胞形态变化；以11组不同浓度齐墩果酸（5—400μg／ml）作用QGY细胞24h后，用四甲基偶氮唑蓝（Myr）法检测QGY增殖情况；分别以不同浓度齐墩果酸（80、100、120μg／ml）作用QGY细胞24h后，流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和[Ca2＋]i。结果细胞增殖被抑制并发生凋亡：不同浓度齐墩果酸能够抑制QGY细胞株增殖，且在5—120μg／mL范围内呈剂量依赖性，药物作用细胞24h、48的Ic50分别为76．27μg／mL和66．56μg／mL；处理组细胞周期在s期产生阻滞、细胞内[Ca2＋]i较对照组显著增加，细胞凋亡率和[Ca2＋]i与药物浓度存依赖关系。结论齐墩果酸能够抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导其凋亡；诱导凋亡可能与细胞内[Ca2＋]i增加有关。     

刚地弓形虫RH株感染对BALB／c小鼠情绪行为的影响

目的研究刚地弓形虫RH株感染对BALB／c小鼠学习记忆行为的影响及可能机制。方法将72只周龄、大小相近的雄性BALB／c小鼠采用随机数字表分为生理盐水对照组与不同数量（3×10^3／ml、3×10^4／ml、3×10^5／m1）弓形虫RH株感染组，每组18只。于感染第5周从每组各随机抽取6只分别进行高架十字迷宫实验、旷场实验及强迫游泳实验，观察各组小鼠在实验中情绪行为变化。并记录各项指标进行统计分析。结果在高架迷宫试验与旷场实验中，3×10^3／ml弓形虫感染组小鼠与生理盐水对照组小鼠比较，各项行为学指标无明显差异。在3×10^4／ml、3×10^5／ml弓形虫感染组小鼠与对照组小鼠比较出现明显降低（P〈0．05）．以3×10^5／ml感染组最为明显，其小鼠运动活力（0E＋cE）、进入开放臂次数比例（OE％）、开放臂停留时间比例（OT％）小鼠爬行总格数、中央格在总格数中比例分别为11．08±2．12、28．73±0．59％、25．62±2．33％、32．30±17．26、2．42±0．65％。在强迫游泳试验中，各弓形虫感染组小鼠游泳的静止时间均高于对照组小鼠（P〈0．05），3×10^5／ml感染组静止时间最长，达226．6±1．9S。结论刚地弓形虫RH株感染可引起小鼠情绪行为改变，具有焦虑抑郁倾向。     

铜合金三酸抛光微观效果研究

通过扫描电子显微镜微观观察的方法对三酸化学抛光液中各组分对铜合金表面抛光效果的影响进行了研究.结果表明,采用微观观察法能够更直观有效地研究各组分对铜合金表面抛光效果的影响,在此基础上,获得铜合金表面最佳抛光液:磷酸200~300ml/L、硫酸200~400ml/L(磷酸+硫酸500~600ml/L)、硝酸200~250ml/L(紫铜)、40~150ml/L(黄铜)、盐酸5~15ml/L.经处理的铜合金表面不仅外观光亮、微观平整,而且铜合金表面制备的转化膜中性盐雾测试时间更长、防腐性能更好.根据扫描电子显微镜观察铜合金微观形貌获得最佳抛光液组成的方法,简单方便、准确有效     

姜黄素诱导肝癌HepG2细胞凋亡及其对bcl-2及survivin蛋白表达的影响

目的 研究姜黄素对HepG2细胞凋亡的促进作用,并探讨其可能的的作用机制.方法 实验分为空白对照组、1 mg/ml、1.5mg/ml、2mg/ml的姜黄素处理组,MTT法检测不同浓度姜黄素对细胞增殖抑制情况；电镜观察细胞形态及其结构变化；流式细胞术检测凋亡率；Western blot检测各组作用24 h后细胞中bcl-...     

川芎嗪对IL-1β诱导的兔原代软骨细胞增殖和凋亡影响

目的 观察川芎嗪对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞的增殖及凋亡的影响.方法 兔原代软骨细胞培养及鉴定,用IL-1β10ng/ml和/或不同浓度川芎嗪共培养兔原代软骨细胞48h后,利用流式细胞仪检测各组软骨细胞的周期及凋亡率；利用MTT法检测软骨细胞的生长状态.结果 与对照组比较,IL-1β诱导下软骨细胞的凋亡率显著增加,差异具有显著统计学意义(P＜0.01)；加入川芎嗪能明显降低IL-1β诱导的软骨细胞凋亡率,有显著统计学意义(P＜0.01)；与对照组比较,IL-1β诱导下软骨细胞被明显阻滞在G1期(P＜0.01)；加入川芎嗪能明显降低IL-1β对软骨细胞G1期的阻滞作用,细胞增殖指数明显增加(P＜0.05或P＜0.01).结论 川芎嗪对IL-1β诱导的兔原代软骨细胞抑制凋亡并促进生长.     

2．4-6．0GHz超宽带低噪声放大器的设计

采用标准0．5μmGaAsPHEMT工艺设计了工作频段在2．4—6GHz可应用于无线局域网（WLAN）和超宽带（UWB）接收机的超宽带低噪声放大器。从宽带电路的选择、高频电路设计的器件选择和电路结构的选择等方面讨论了如何进行超宽带低噪声放大器的设计。结果表明，通过合适的电路结构和器件参数选择，可以采用0．5μmGaAsPHEMT工艺制备满足超宽带系统要求的低噪声放大器。在UWB3．1～5．15GHz低频带内，该LNA增益20．8～21．6dB，噪声系数低于0．9～1．1dB，输入输出驻波比均小于一10dB。在2．4～3GHz频带（涵盖802．11b／g的使用范围）内，该LNA增益20．8～21．5dB，噪声系数低于2dB，输入输出驻波比均小于-10dB。在频带5．2—6GHz，该LNA的噪声系数增大到1．332dB。增益则从21．4dB下降到19．7dB。电路的工作电压为3．3V。