镉对匍匐翦股颖成熟胚愈伤组织诱导及再生的影响

研究了不同浓度的镉离子对匍匐翦股颖愈伤组织形成、生长和植株再生的影响. 结果表明: 当培养基中镉离子浓度在2.50 mg/L 以下时, 愈伤组织的诱导频率高于对照, 并在浓度为2.50 mg/L 时高达83.3%, 说明低浓度镉离子对匍匐翦股颖愈伤组织的形成可能具有刺激效应; 随着镉离子浓度的进一步增加,  愈伤组织的诱导频率明显下降, 并在浓度大于50.00 mg/L 时完全抑制了愈伤组织的形成; 在愈伤组织生长初期(0~30 d), 镉离子浓度为12.50 mg/L 时, 愈伤组织生长形态最大, 随着愈伤组织继续生长(30~45 d), 低浓度(2.50 mg/L)的镉离子对愈伤组织生长的刺激效应强于更高浓度. 在植株再生过程中, 当镉离子浓度为1.25 mg/L 时的效果最佳, 再生苗生长最好.     

NaCl胁迫对胀果甘草子叶愈伤组织总黄酮合成的影响

用不同浓度的NaC1处理胀果甘草子叶愈伤组织,分别在处理7 d、14 d、21 d、28 d、35 d和42 d取样,测定甘草子叶愈伤组织鲜重和总黄酮含量.结果表明当培养基中添加NaCl的浓度低于85.5 mmol/L时,随着NaCl胁迫程度的增加,胀果甘草子叶愈伤组织的生长量总体呈现升高的趋势,黄酮含量随NaCl浓度的增加而升高.其中在第28 d时,85.5 mmol/L NaCl处理的子叶愈伤组织中甘草黄酮含量达到最高值,为1.41 mg/g,比未作NaCl处理的对照愈伤组织的黄酮含量(1.31 mg/g)提高了7.83％(为0.10 mg/g),约为对照的1.078倍.试验结果表明一定浓度的NaCl胁迫可以提高胀果甘草子叶愈伤组织的甘草黄酮含量.     

尖叶拟船叶藓愈伤组织诱导实验

以尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis (Mitt.) Nog.)原丝体为外植体,研究2种植物激素(2,4-D和6-BA)对其愈伤组织诱导的作用,并在显微镜下观察原丝体细胞在愈伤组织诱导过程中的变化特征.实验结果表明：植物激素对其愈伤组织的诱导是必需的,2,4-D质量浓度为1.0～1.5 mg/L时对愈伤组织诱导无影响,6-BA质量浓度为1.0～1.5 mg/L时能诱导出愈伤组织.     

怀牛膝愈伤组织诱导及分化的研究

对怀牛膝叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究.结果表明:KT 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为根,6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.     

小麦Ⅱ型胚性愈伤组织的获得及培养特性研究

从小麦品系“鄂35816”幼穗愈伤组织中得到了Ⅱ型胚性愈伤组织。根据愈伤组织的状态和生长速度提高继代频率，可促使I型向Ⅱ型胚性愈伤组织转变，并保持植株再生潜能；1．0－2．0mg／L，2，4－D、CaC.2H2O3．0mmol/L和KH2PO43．0mmol/L的组合有利于Ⅱ型胚性愈伤组织的生长和植株再生。     

不同激素对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响

本实验研究了6-BA、2,4-D、IAA、NAA、IBA、KT对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响,以及探索愈伤组织诱导的最适培养基配方.激素筛选实验结果表明2,4-D能诱导蜡梅分化出愈伤组织.在2,4-D浓度梯度实验中,设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,结果表明浓度为0.25~1.0 mg/L的2,4-D诱导愈伤组织的效果最好.在6-BA浓度梯度实验中,也设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,均未诱导出愈伤组织,表明6-BA不能单独诱导出蜡梅愈伤组织.以葡萄糖、6-BA和2,4-D三因素组合正交实验共设置了25个组合,得到诱导蜡梅愈伤组织的最适培养基配方为:1%葡萄糖+0.25 mg/L2,4-D+1.5 mg/L6-BA.     

香水草组织培养植株再生系统建立

香水草(Heliotropium arborescens)无菌实生苗下胚轴和子叶接种于含1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)或2.0mg/L 6-苄氨酸嘌呤(BA)的MS培养基上能脱分化形成白色松散状或绿色致密状愈伤组织,但愈伤组织诱导率较低,分别为8.3%和26.5%.愈伤组织培养于含2.0mg/L NAA和0.5mg/L BA的MS培养上建立了具再生能力的愈伤组织继代培养方法.愈伤组织转移至含2.0mg/L BA和含0.1mg/L NAA的MS培养基上建立了不定芽分化再生方法.不定芽分化率最高91.3%.不定芽长大后,转移至含1.0mg/L IBA的减半MS培养基中不定芽生根率可达87.6%.     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

粳稻成熟胚愈伤组织诱导及其分化培养体系的建立

为了促进新型高产水稻品种的抗病性,以粳稻成熟胚为外植体,通过诱导培养基、继代培养条件、分化培养路线、光照强度和蔗糖浓度的优化,建立了适合新稻18和豫粳6号的高效再生体系.结果表明:选择适宜的培养基是提高愈伤组织诱导率及愈伤组织质量的基础.新稻18和豫粳6号的水稻成熟胚诱导愈伤组织的培养基分别为MB1(MSB5+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+ABA 1 mg/L)和MB2(MSB5+2,4-D 3 mg/L+6-BA 1mg/L+ABA 0.5 mg/L),愈伤诱导率分别达95.24%和91.07%;愈伤组织剥离后的继代培养基为MB3(MSB5+2,4-D 3.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L);愈伤组织的分化培养路线为三步分化法MSD0/N6B5D0→N6B5D2→MSD0,适宜的分化培养温度为33℃,光照强度为43.75μmol.m-2.s-1.新稻18和豫粳6号的愈伤分化率最高分别达到99.3%和83.33%.     

‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导及不定芽分化

为建立枣高效花药培养体系,获得再生植株,以‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药为外植体,利用L9(34)正交设计筛选适宜枣愈伤组织诱导的培养基;并以MS和WPM培养基添加不同浓度的TDZ,2,4-D,IAA,GA3试验了花药愈伤组织的分化能力。结果表明,适宜‘鲁枣2号’和‘鲁枣6号’花药愈伤组织诱导的培养基为1/4 MS,NAA的质量浓度0.3 mg·L~(-1),2,4-D的质量浓度1.5 mg·L~(-1),麦芽糖的质量浓度30.0 g·L-1;诱导得到3种类型的愈伤组织,其中黄白色致密愈伤组织分化能力强。在分化培养基MS,TDZ的质量浓度0.1 mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.1 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)和培养基WPM,KT的质量浓度0.2mg·L~(-1),IAA的质量浓度0.5 mg·L~(-1),GA3的质量浓度1.0 mg·L~(-1)上均能分化得到正常不定芽,分化率分别达80.0%~100.0%(‘鲁枣2号’)和41.7%~50.0%(‘鲁枣6号’)。建立了‘鲁枣2号’及‘鲁枣6号’花药培养体系,获得再生植株。     

全缘贯众的组织培养及无性系建立

以蕨类植物全缘贯众根茎、叶片和叶柄为外植体诱导愈伤组织,选取诱导率最高的根茎愈伤组织为材料诱导分化形成幼叶,继续培养成生根试管苗,建立起全缘贯众的无性系.结果表明,1/2 MS NH4H2PO4(100 mg·L-1) BA(0.5 mg·L-1) 2,4-D(1.2 mg·L-1) NAA(1.2 mg·L-1)是诱导根茎愈伤组织的最佳培养基;愈伤组织分化形成幼叶的最佳培养基是1/2 MS BA(0.2 mg·L-1) NAA(0.1 mg·L-1);试管苗生根培养的最佳培养基是1/3 MS IAA(0.6 mg·L-1);移栽后根茎上的须根比对照野生苗增加1.5～2.5倍.     

彩云阁快繁技术的研究

通过愈伤组织诱导途径进行快繁,由茎段诱导愈伤组织阶段和愈伤组织诱导芽阶段的最佳PGR种类和浓度配比分别为2mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L NAA、3.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA;通过促进腋芽生枝途径进行快繁,茎节诱导芽阶段最佳PGR种类和浓度配比为1.5mg/L6-BA+0.3mg/L NAA;由芽诱导生根阶段最佳PGR种类和浓度配比为0.1mg/L NAA.     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

腐胺促进棉花胚性愈伤组织分化的初步研究

为了利用多胺促进棉花体细胞胚胎发生,提高农杆菌介导的棉花遗传转化效率,本研究以4个陆地棉品种新陆早33号(L33)、新陆早36号(L36)、新彩棉7号(C7)、豫早1号(Y1)为试验材料,下胚轴在附加有0.1 mg/L2,4-D和0.1 mg/L KT的MSB培养基中培养4周后,分别继代到附加了1 mmol/L腐胺(Put)、1 mmol/L D-精氨酸(D-Arg)和对照的3种分化培养基中培养4周后,记录愈伤组织的增殖和分化情况。结果表明:D-Arg可以显著抑制愈伤组织增殖,4个品种都表现出严重的褐化,而附加Put则能够一定程度地促进愈伤组织的增殖。在胚性愈伤组织分化方面,D-Arg处理后L33和L36均未见分化,C7和Y1分别为对照处理的49.38%和324%;而经Put处理后,所有品种的胚性愈伤组织分化率均表现为提高,其中Y1和L33的胚性愈伤组织分化率提高了3倍多。此外,内源多胺含量测定发现,施加外源腐胺和D-Arg之后愈伤组织的多胺含量发生明显变化,可能与后期胚性愈伤组织分化有关。因此,多胺在促进棉花胚性愈伤组织分化方面发挥重要作用。     

唐古特白刺愈伤组织诱导及再生体系的研究

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)子叶、下胚轴、根为外植体, 接种在不同浓度激素配比的培养基中, 研究愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明: 子叶和下胚轴是诱导愈伤组织的良好外植体; 以MS补加2,4-D(0.5～1.0 mg·L-1)或6-BA(1.0～2.0 mg·L-1)+NAA(0.5～1.0 mg·L-1)可100%高频产生愈伤组织;在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1培养基上,下胚轴可产生不定芽; 最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA(0.5～1.0 mg·L-1),增殖系数为5.75; 最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率达94.6 %.     

外源激素对龙葵愈伤组织形成和器官发生的影响

龙葵不同部位的外植体在愈伤组织形成过程中所需的外源激素浓度不同。茎尖外植体在附加6—BA0.1—2.0(mg/L)、NAA0.1—2.0(mg/L)的Ls培养基上可高频率地诱导出愈伤组织。培养基中只加6—BA(2.0mg/L)或NAA(2.5mg/L)一种外源激素也可诱导出愈伤组织,但诱导所需的时间较长。较高的6—BA浓度(2.0mg/L)有利于子叶外植体形成愈伤组织,较高的NAA(2.0mg/L)有利于胚轴形成愈伤组织。器官分化过程决定于诱导愈伤组织时培养基中的激素成分。     

12个草地早熟禾品种愈伤组织诱导体系的研究

 以生产中常见的12种草地早熟禾(Poa pratensis L.)成熟种子为外植体,对其愈伤组织诱导及愈伤组织增殖生长体系进行了优化试验.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织诱导率在60%~93%之间,2,4-D质量浓度3 mg/L时12个早熟禾品种的愈伤组织诱导率均值最高,达到86%;在2,4-D基础上添加少量6-BA(0.1~0.2 mg/L)后,不同品种愈伤组织诱导率在30%~92%之间,12个品种的愈伤组织诱导率均值有所降低(3.1%~25.4%).在愈伤组织增殖试验中,单纯使用2,4-D时,不同品种愈伤组织增殖率在38%~164%之间,12个早熟禾品种的愈伤组织增殖率均值在3 mg/L 2,4-D时最高,达到81%;在3 mg/L 2,4-D基础上施加少量的6-BA(0.05~0.2 mg/L)后,愈伤组织增殖率均值有所降低,但存在品种的差异性.研究结果还显示,热激处理对部分草地早熟禾愈伤组织诱导及增殖有一定的促进作用.     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

三种切花单头菊试管苗口t片植株的再生

选用3个切花单头菊品种,以试管苗叶片为外植体,通过愈伤组织途径和直接诱导芽途径建立再生体系,探讨叶片不同部位、激素种类及浓度、基因型对再生率的影响.结果表明:3个品种中"贵"诱导愈伤组织能力和分化芽能力最强,MS+NAA 1 mg/L+6-BA 2～3 mg/L.为诱导愈伤组织的适宜培养基,MS+6-BA 1 mg/L+IAA 0.3～0.5 mg/L为分化不定芽的适宜培养基.     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.