分光光度法测定藻胆蛋白含量的研究

从多管藻和螺旋藻中提取了藻胆蛋白,利用藻胆蛋自在可见光区具有吸收的特点,建立了藻胆蛋白含量的快速测定方法．在波长565和620nm处测定藻红蛋白和藻蓝蛋白在0-1．2mg／mL内具有良好的线性关系,r藻红=0．9995,r藻蓝=0．9998,该方法测定藻红、藻蓝蛋白的回收率分别为99．07％和99．11％．与传统的Lowry法相比,该方法测定蛋向质简便快速．重现性好．     

Structure and function of PBS model complex

A complex of phycobiliproteins, containing phycoerythrocyanin (PEC), C-phycovyanin (C-PC) and allo-phycocyanin (APC) as well as some linker polypeptides, was reconstructed. The absorption and fluoreacence spectra of the complex were compared with those of native phycobilisomes (PBS) and the phycobiliproteins. Based on the measured data, it can be concluded that the complex can be taken as a model of PBS and is an entirely functional group for excitation energy transfer step by step from peripheral PEC to APC. The single terminal emitter feature of the complex makes it favorable for clarifying energy transfer pathways and the kinetics in comparison with native PBS. Further research is carried on in the lab.     

R—藻红蛋白色基多肽对肿瘤细胞光动力杀伤作用的实验研究

首次用胃酶降解及CM Sephedex C-50柱层析法获得了6种藻红蛋白的色基多肽,并用藻红蛋白及其色基多肽对两种肿瘤细胞作体外激光疗法增敏作用实验,S180小鼠腹水癌细胞株培养后分别用浓度为10,25,50,100ug/mL的藻红蛋白及其色基多肽处理,经波长为488nm的氩离子激光辐照（照射剂量为28．8J/cm2),用MTT法检测,其细胞的生存率最佳效果分别棕达45％及16％,显示出良好的剂量效应,在激光处理藻红蛋白及其色基多肽对HL60人白血病细胞所做的细胞生长曲线图的比较中可看出,色基多肽的激光增敏作用要优于藻红蛋白多聚体。     

以若丹明为母体的多发色团化合物的合成

合成了８个以若丹明６Ｇ，若丹明１０１，若丹明Ｂ或若丹明ＤＲ－２１为母体，以１，８－萘酰亚胺衍生物为天线基元，以双亚甲基作为桥链连接两者的多发色团激光染料，并对它们进行吸收光谱和荧光光谱的测试，结果表明，发生了从天线基元指向若丹明母体的分子内能量传递现象，并且多发色团激光染料相对于对应的若丹明染料的荧光量子产率有不同程度的提高。     

光谱法研究EDTA-Fe(Ⅲ)与牛血清白蛋白的相互作用

应用紫外光谱法和荧光光谱法研究了乙二胺四乙酸铁(Ⅲ)(EDTA-Fe(Ⅲ))与牛血清白蛋白的相互作用.结果表明:EDTA-Fe(Ⅲ)可以进入牛血清白蛋白的疏水腔,使蛋白质非极性区的生色基暴露于极性溶剂;EDTA-Fe(Ⅲ)通过静态猝灭的方式使牛血清白蛋白的荧光强度显著降低;EDTA-Fe(Ⅲ)与牛血清白蛋白主要以氢键和范德华力相结合.测定了EDTA-Fe(Ⅲ)与牛血清白蛋白的结合常数KA和结合位点数n,利用Forster非辐射能量转移机制确定了牛血清白蛋白与EDTA-Fe(Ⅲ)的结合距离和能量转移效率,并使用同步荧光技术探讨了EDTA-Fe(Ⅲ)对牛血清白蛋白构象的影响.     

铕(Ⅲ)三元配合物的合成与光致发光性能

用氯化铕与水杨酸(HSal)、邻菲罗啉(Phen)在乙醇溶液中反应,合成了稀土配合物[Eu(Phen)(Sal)3],研究了该配合物的IR、UV、TGA、元素分析及光致发光性能.结果表明,该配合物中的配体吸收激发光的能量后,能有效地传递给中心Eu3+,发出强的Eu3+的特征荧光.     

高氯酸镝、高氯酸铕在二苯亚砜体系中的共发光

合成了高氯酸镝铕（Ⅲ）二苯亚砜Ｄｙ１－ｘＥｕｘ（ＤＰＳＯ）η（ＤＰＳＯ）η（ＣｌＯ４）３（ｘ＝１．０００￣０．０００）一系列固体配合物,测定了配合物的组成及荧光激发和发射光谱、发现镝（Ⅲ）和铕（Ⅲ）的姚有猝灭作用,铕（Ⅲ）对镝（Ⅲ）的发光也有猝灭作用,同时研究了Ｄｙ＾３＋、Ｅｕ＾３＋相互猝灭的浓度范围,并根据实验结果了配体Ｓ１能级以及Ｄｙ＾３＋的有关能级     

铕(钇)-水杨酸-邻菲啰啉配合物的合成、表征及发光性能

以水杨酸(Hsal)和邻菲啰啉(phen)为协同配体,铕钇离子为中心体,合成不同Eu/Y摩尔比的系列三元双核配合物,并通过元素分析、紫外可见光和红外光谱确定配合物的组成.研究配合物的发光性能以及Eu/Y摩尔比的影响.结果表明,配合物的组成为EuxY1-x(sal)3(phen)(x=0.1~1.0).在Eu/Y摩尔比为0.6:0.4时,配合物Eu0.6Y0.4(sal)3(phen)的发光强度最强.在该系列配合物中,不仅配体可以将吸收的能量传递给发光的铕离子,使其发光,而且不发光的钇配合物也可将其吸收的能量通过分子内能量传递给铕离子,增强铕的发光强度.     

荧光素与中性红酸、碱染料间荧光共振能量转移机理

应用荧光光谱法研究了水溶液体系中酸性染料四溴荧光素(TBF)、四碘荧光素(TIF)、四氯四碘荧光素(TCTIF)、四氯四溴荧光素(TCTBF)分别与碱性染料中性红(NR)之间的相互作用.实验表明:NR对各酸性染料的荧光都有较强的猝灭作用,据此求得不同温度下NR与各种酸性染料的结合常数K.发现K值随反应温度上升而下降,且随酸性染料取代基的电负性增加而增大,证实了该反应为单一静态猝灭过程.由反应焓变、熵变确定NR与酸性染料间的结合力主要是静电引力.依据非辐射能量转移机理,探讨了不同温度下各酸性染料与NR相互结合时,能量转移效率、能量给体与受体间距离r等参数,各体系r7 nm表明该荧光猝灭是通过非辐射能量转移过程产生的.并发现随着染料取代基的电负性增加,能量转移参数的某些变化规律.     

掺杂非醚聚苯基喹嗯啉(PPQ)薄膜的光致发光和电致发光

用具有强蓝光发射的1,3,5-三芳基-2-吡唑啉化合物TPL对非醚聚苯基喹嗯啉（PPQ）进行掺杂,测量掺杂PPQ薄膜的光致发光和电致发光谱,根据掺杂前后PPQ薄膜的荧光谱变化,表明掺杂PPQ薄膜发光存在着基质分子和掺杂分子间的能量传递或电荷转移,掺杂PPQ薄膜的电致发光谱随外加电压变化,说明外加电压对PPQ具有调制作用。     

红藻藻胆体内部蛋白间的能量传递研究 Ⅰ.人工合成R-PE/R-PC/APC复合物内的能量传递

研究了人工合成的藻胆体模拟复合物的时间分辨荧光光谱,并运用多指数拟合的方法对数据进行了详细的处理和分析,结果表明能量在Ｒ－ＰＥ和Ｒ－ＰＣ之间的传递时间与能量从Ｒ－ＰＣ传递到ＡＰＣ的时间几乎相等（５０ｐｓ）;除此之外,Ｒ－ＰＥ到ＡＰＣ还有两种能量传递的通道,能量在这两个通道的传递时间分别为１１０ｐｓ和４００ｐｓ．即：蛋白之间的能量传递通道是并行的．     

新型杯[5]芳烃衍生物的合成及发光行为

本文合成了一种新型杯[5]芳烃衍生物5,11,17,23,29-五叔丁基-37,38,39,40,41-五羧甲氧基杯[5]芳烃,通过荧光光谱研究了其与铽（Ⅲ）离子形成1：1配合物的发光行为.结果表明,配合物的发光行为基于分子间能量转移,pH=8～10范围内荧光强度几乎没有变化,溶剂极性明显影响荧光的强度;通过紫外滴定和荧光滴定确定了体系的稳定常数.该主体化合物、铕（Ⅲ）离子和邻菲罗琳在无水乙腈中,于321nm激发波长下检测到铕（Ⅲ）的特征荧光.     

电子俘获材料CaS:Eu,Sm可见光激发优势机理的研究

实验测定了电子俘获材料CaS:Eu,Sm的荧光激发谱，辐射谱以及红外上转换光激发光谱，发现可见光对红外上转换辐射光的激发灵敏度高达50%，而紫外光只有18%，具有可见光激发的优势，根据电子俘获材料的能级模型，电子俘获发光机理以及稀土离子在立方晶场中的能级结构，并结合光谱测试所提供的信息，分析了电子俘获材料CaS:Eu,Sm在光激发过程中的能量传递途径，阐明了电子俘获材料CaS:Eu,Sm可见光激发优势的机理。     

红藻藻胆体内部蛋白间的能量传递研究 Ⅱ.人工合成复合物RPE/RPC以及RPE/APC内的能量传递

研究了２种人工合成的二元藻胆体模拟复合物（ＲＰＥ／ＲＰＣ和ＲＰＥ／ＡＰＣ）的时间分辨荧光光谱并运用多指数拟合的方法对数据进行了详细的处理和分析,研究结果证实了能量在ＲＰＥ和ＲＰＣ之间的传递时间与能量从ＲＰＥ传递到ＡＰＣ的时间几乎相等（５０ｐｓ）;此外,ＲＰＥ到ＡＰＣ还有２个能量传递的途径,能量在这２个通道的传递时间分别为：１３５ｐｓ和４３６ｐｓ,而ＲＰＥ到ＲＰＣ的光谱解叠结果并未显示有上述的通道,即：能量可以从ＲＰＥ直接传递到ＡＰＣ同时也可以经过ＲＰＣ传递到ＡＰＣ,在实际的体系中应该是二者竞争的机制     

红藻藻胆体内部蛋白间的能量传递研究 Ⅲ.人工合成复合物R-PC/APC内的能量传递

研究了人工合成的二元藻胆体模拟复合物（ＲＰＣ／ＡＰＣ）的时间分辨荧光光谱并运用多指数拟合的方法对数据进行了详细的处理和分析,研究结果证实了能量在ＲＰＣ和ＡＰＣ之间的传递时间与能量从ＲＰＥ传递到ＲＰＣ的时间几乎相等（５０ｐｓ）;除此之外,ＲＰＣ到ＡＰＣ没有其它能量传递的通道．结果为能量可以从ＲＰＥ直接传递到ＡＰＣ同时也可以经过ＲＰＣ传递到ＡＰＣ,ＲＰＣ作为能量传递的中间受体,在实际的体系中其作用是通过竞争的机制实现的．     

光谱法研究辛伐他汀与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱、圆二、傅立叶变换红外光谱及三维荧光光谱等分子光谱法研究了在生理条件下,辛伐他汀（Sire）与牛血清白蛋白（BSA）的结合作用．结果表明,Sire对BSA的猝灭方式为静态猝灭．根据F6rster非辐射能量转移理论,计算了Sim与BSA结合部位与色氨酸残基的距离r=1．8nm．利用标记药物进行了结合位点的定位,确定了Sim结合位置是BSA的siteI．由圆二、红外及三维光谱可知,Sim对BSA二级结构的改变主要在肛折叠区,在与Sire结合反应过程中,BSA的微环境与构象都发生了变化;同步荧光表明,Sim与BSA的作用部位主要在色氨酸（Trp）残基周围．     

发菜中红色蛋白的研究

研究发菜中一种红色蛋白(Rx)的分离纯化及其光谱学性质.采用超声法破碎发菜细胞,盐析法初步纯化藻胆蛋白,利用DEAE-DE52交换介质得到藻胆蛋白纯品;测定室温和低温(液氮)下的荧光激发光谱和发射光谱.Rx的吸收峰在520 nm,室温与低温下的荧光发射峰分别在625和630 nm,室温与低温下的荧光激发峰分别在615和610 nm,室温下,Rx在藻胆体中的荧光上升时间和荧光寿命分别为495和2 200 ps.结果表明,Rx既可以把它吸收的光能传递给藻蓝蛋白(PC),再经由PC传递给别藻蓝蛋白(APC),又可以直接将能量传递给APC.     

四羧基酞菁锌的合成及其荧光猝灭

合成了2,9,16,23－四羧基金属酞菁锌（Zn-taPc),用紫外－可见光谱和红外光谱对其进行了表征。测试了其在乙醇溶剂中的荧光光谱,在356nm的紫外光激发下,Zn-taPc在456nm附近出现发射峰。发现了碘的乙醇溶液对其有荧光猝灭现象,并进行了初步分析。     

Excitation energy transfer mechanisms in allophycocyanin (Ⅰ)——Energy transfer mechanisms in monomer

The mechanisms of excitation energy transfer within allophycocyanin monomer with the theory of generalized master equation (GME) and the technique of time-resolved fluorescence anisotropic spectroscopy are studied. In the case of known information of its structure and spectra, the theory applied is based on the assumption that the coupling interaction between two chromophores is fairly weak. The theory correctly predicts the experimentlly observed rate for excitation energy transfer in allophycocyanin monomer. Based on the results, the energy transfer mechanism can be described as Forster and these processes cannot take place from the high vibrational levels of donor to acceptor.     

Excitation energy transfer mechanisms in allophycocyanin (I)

The mechanisms of excitation energy transfer within allophycocyanin monomer with the theory of generalized master equation (GME) and the technique of time-resobed fluorescence anisotropic spectroscopy are studied. In the case of known information of its structure and spectra, the theory applied is based on the assumption that the coupling interaction between two chromophores is fairly weak. The theory correctly predicts the experimentlly observed rate for excitation energy transfer in allophycocyanin monomer. Based on the results, the energy transfer mechanism can be described as Förster and these processes cannot take place from the high vibrational levels of donor to acceptor.