SPF家兔的培育及植入肠道正常菌群后生长性能的观察

目的对普通级实验家兔进行剖腹净化建立SPF家兔种群,提高实验用兔的质量,满足科研、生产及检定工作需要。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以人工哺乳方法将仔兔培育成无菌兔,再将双岐杆菌等肠道正常菌接种到无菌兔体内,使其成为SPF兔;对SPF环境中植入肠道正常菌兔和未植菌兔离乳后生长性能进行观察比较。结果人工培育出的SPF兔,经微生物和寄生虫检测,符合国家SPF兔标准;植入肠道正常菌群兔体重与未植入肠道正常菌兔生长体重相比极显著增加。结论通过剖腹摘取子宫术,人工哺乳仔兔和植入肠道正常菌群的方法建立了SPF实验用兔种群。     

SPF家兔种群的建立

目的对普通级实验家兔进行了剖腹净化,建立我国SPF家兔种子核心群,使普通级兔子升级换代,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要.方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以吮吸法人工哺乳仔兔,离乳后将正常菌群植入仔兔体内,并转入SPF屏障设施内饲养、繁殖.结果建立了具有100只种兔的SPF兔子核心群,兔群生长发育正常.经多次微生物检测,符合SPF标准.SPF兔群将作为建立SPF实验用兔生产群的核心种群.     

ICR母鼠代乳在长爪沙鼠剖腹产净化中的应用

目的优化长爪沙鼠剖腹净化的技术方法。方法在超净工作台中对长爪沙鼠进行剖腹取胎,选择有2～3胎哺乳经验的ICR母鼠代乳,统计子鼠成活率和离乳率,绘制生长曲线。分别按小鼠微生物学和寄生虫学质量控制标准,对1月龄和2月龄的子鼠进行检测。结果代乳成活率超过50％,微生物学和寄生虫学检测均符合小鼠相关国家标准。代乳鼠与非代乳鼠其生长曲线没有差异。结论长爪沙鼠剖腹取胎,以ICR小鼠代乳方法,可以达到微生物净化的目的。     

IRM-2小鼠SPF核心保种群的建立

目的为建立我国SPF级IRM-2小鼠核心群,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要,对普通级IRM-2小鼠进行了剖腹净化。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内操作、饲养和繁殖。结果建立了具有12只SPF级IRM-2小鼠核心群,种群生长发育正常。经2次微生物检测,符合SPF级标准。结论通过剖腹技术成功地建立了SPF级IRM-2小鼠核心保种群。     

新西兰兔剖腹产人工净化

为了对新西兰兔进行生物学净化 ,剔除其体内外所携致病微生物 ,提高新西兰兔的微生物学等级。采用隔离器剖腹产净化 ,以全子宫摘除法对 11只临产新西兰孕兔施行剖腹产 ,选择出生体重 5 0g以上仔兔进行人工哺乳净化。结果发现对 34只仔兔进行人工哺乳 ,42d断乳成活 2 7只 ,离乳率 74 9%。经广东省实验动物监测所检测 ,达到清洁级标准。采用该方法对实验动物进行生物学净化取得了良好效果 ,达到了预期目的     

胚胎－ 胎仔发育毒性试验中阳性模型的建立

摘要: 目的探讨SD 大鼠胚胎－ 胎仔发育毒性试验中,皮下给予不同剂量的环磷酰胺进行其剂量相关性的比较研究,建立阳性模型,积累实验室背景数据。方法取健康受孕SD 大鼠100 只,按体质量随机分为溶媒对照组( Veh:7. 5 mg·kg － 1 氯化钠注射液) 、环磷酰胺低( L: 7 mg·kg － 1 ) 、中( M: 10 mg·kg － 1 ) 、高( H: 15 mg·kg － 1 ) 剂量组,每孕鼠组不少于20 只,按程序皮下注射给药,观察临床表现,统计各剂量组孕鼠的体质量、摄食量、窝质量、黄体数、着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数等指标,以及胎鼠的性别、体质量、身长、外观畸形、内脏畸形和骨骼畸形等指标。结果环磷酰胺低、中、高各剂量组对大鼠胚胎－ 胎仔发育均有毒性作用且具有明显的量效关系。结论皮下给予不同剂量的环磷酰胺对大鼠胚胎－ 胎仔发育毒性均产生影响且具有明显的量效关系,三种给药剂量均可建立胚胎－ 胎仔发育毒性试验阳性模型。     

SD大鼠的剖腹净化

1994年从日本引进的SD大鼠种群 ,本身携带有金黄色葡萄球菌 ,不符合我国SPF动物的等级要求 ,为使之符合我国三级动物的要求 ,通过剖腹产手术进行净化 ,并用SPFWistar大鼠为保姆代乳。成功剖腹孕鼠 35只 ,选取活仔 115只 (每只母鼠选仔 4— 6只 ) ,经过扩大繁殖 ,目前已为 180只生产母鼠 ,4 0只生产雄鼠的生产群。经过 4年共18次的微生物检测 ,不但去除了金黄色葡萄球菌 ,而且 ,各项微生物检测指标均符合我国SPF大鼠的等级标准。表明剖腹净化是成功的     

ICR／RMU—nu无胸腺裸鼠的培育

作者从一窝白色ＩＣＲ远交系小鼠群中发现突变裸鼠，采用回交一互交号法“ｎｕ”基因保留下来，随后用隔离器养的ＩＣＲ小鼠为代乳鼠，通过剖腹取胎净化该种群，微生物学检查其主要项目达到ＳＰＦ级标准，术后动物饲养于洁净层流架中，＾６０Ｃｏ灭菌饲料，酸化水、鼠盒、垫料均高压灭菌，以纯合雄鼠与杂合雌鼠１：１非近亲繁殖，扩大了种群，定名ＩＣＲ／ＰＭＵ－ｎｕ裸鼠。与此同时，对突变裸鼠进行了免疫生物学检查，剖检１０余只     

气管滴注纳米材料对妊娠大鼠胚胎毒性影响的初步研究

选择4种典型纳米材料(纳米碳、纳米氧化锌、碳纳米管、纳米二氧化硅),采用气管滴注染毒方式染毒受孕1 d Wistar大鼠,连续给药7 d,染毒剂量为10 mg/kg体重,对照组滴注相同体积的纳米颗粒悬液--新生小牛血清;于妊娠第20 d处死动物,剖腹取胎,记录大鼠最终妊娠数、胎鼠数;测量胎仔体重、身长、尾长及股骨长.结果表明mano-C、nano-ZnO、CNT和nano-SiO2>组孕鼠的妊娠率均显著低于溶剂对照组(CT)(P<0.05);nano-ZnO组的孕鼠的产仔数,胎鼠的体重、身长、尾长与各组比较显著降低(P<0.05);nano-C组胎鼠的体重、股骨长与各组比较差异显著(P<0.05).CNT和nano-SiO2组胎鼠的体重、身长、尾长及股骨长与溶剂对照组比较差异无显著性(P>0.05).在本实验条件下纳米材料降低受孕大鼠妊娠力;不同种类的纳米材料对胎鼠的毒性效应不同.     

慢性呼吸道疾病的致病原,大鼠纤毛相关呼吸道杆菌,一种新认识的病原菌的分离,培养和特征

<正> 把患有慢性呼吸道疾病(CRD)的实验大鼠的支气管擦洗物,接种到鸡胚尿囊内进行纯培养,分离出一种革兰氏阴性的丝状杆菌。它不能在无细胞培养基上生长。在间隔为1周的20次连续传代中,没有鸡胚死亡。将传到第十代的鸡胚尿囊液,给8—12周令的剖腹取胎后养在屏障系统内的SD大鼠鼻腔接种,这种杆菌可重新从鸡胚中分离出来。在研究过程中,被接种的大鼠放在Horsfall单位中,使之保持无其它已知的呼吸道病原,如霉形体和鼠病毒。这种杆菌生长在     

实验鼠的剖腹产代乳净化

实验动物的生物净化方法主要有药物净化和剖腹产净化两种，一般要得到较高级别的实验动物主要是通过剖腹产净化的方法达到，目前国内多采用手术隔离器进行剖腹产手术，笔者利用北京实验动物研究中心的悉生工程设备，以澳大利亚引进的无菌ＮＩＨ小鼠和ＳＤ大鼠作为代乳鼠，分别对来自美国的清洁级ＮＩＨ小鼠和来自澳大利亚的清洁级ＳＤ大鼠首次进行了在超净工作中做剖腹产手术的尝试。     

SPF隔离器的使用和保养

SPF设施是进行实验动物饲育、维持、保种、生产、实验研究的设施,本文从净化的角度阐述了SPF设施(正/负压隔离器)的使用和保养,以满足隔离系统对无菌动物和悉生动物的饲育.     

新生鼠坏死性小肠结肠炎模型建立方法的改进及评价

目的 通过改进和比较国内、外常用的坏死性小肠结肠炎(Necrotizing Enterocolitis,NEC)动物模型建立方法,明确简便有效的NEC建模方法。方法 采用出生2 h内新生SD大鼠,随机分为5组,对照组10只,实验组每组20只。A组与代母鼠同笼鼠乳喂养,且未行任何干预;B 组人工喂养+缺氧冷刺激+(脂多糖)LPS灌胃(5 mg/kg体质量);C组人工喂养+缺氧冷刺激+LPS灌胃(10 mg/kg);D组人工喂养+缺氧冷刺激+LPS腹腔注射(2 mg/kg);E组人工喂养+缺氧冷刺激+LPS腹腔注射(5 mg/kg)。每日观察新生鼠的活动状况和体质量变化。实验结束后取小肠组织行苏木素-伊红染色、评价小肠病理损伤程度;检测小肠组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 实验组新生鼠均出现不同程度的活动减少,腹胀腹泻,黑便,体质量减轻。病理评分显示实验组较对照组新生鼠病理损伤评分显著增高(P<0.05)。LPS腹腔注射组(D、E)较经口给药组(B、C)NEC发病率更高(P<0.05),但LPS大剂量(5 mg/kg)腹腔注射组较其他组,非NEC相关性致死率明显增高(P<0.05)。结论 在人工喂养、缺氧冷刺激的基础上结合小剂量LPS(2 mg/kg)腹腔注射建立NEC的方法更具有可操作性、稳定性。     

基因工程小鼠剖宫取胎的适宜条件

目的　净化升级基因工程小鼠。方法　采用统计学方法对基因工程小鼠剖宫取胎净化过程中的大量数据进行分析。结果　①按规律准确判断妊娠天数 ,可使剖得的仔鼠成活率达到 81 0 % ,②CD_1小鼠作为代乳母鼠剖得的仔鼠离乳成活率为 5 1 5 %。结论　适宜的剖宫取胎条件是提高剖出仔鼠和离乳仔鼠成活率的关键。     

大鼠早期胚的快速冷冻保存

为建立大鼠胚胎冷冻保存库探索一种经挤有效的冷冻处理技术,本文着重探讨了两种不同的快速冷冻处理方法(1.把胚胎先在—30℃下保持60分钟后投入液氮;2.在液氮蒸气中停留5分钟后投入液氮)及四种不同的防冻液(添加2.8M甘油,0.5M蔗糖的PBS 20％大鼠血清或胎牛血清,生理盐水 20％大鼠血清或胎牛血清)对大鼠早期胚冷冻-解冻后发育率的影响。实验结果表明,在液氮蒸气中保持5分钟后投入液氮比在-30℃下保持60分钟的效果好,防冻液内添加胎牛血清(FCS)比大鼠血清(RS)效果好,PBS与生理盐水之间无明显差异。以含有2.8M甘油,0.5M蔗糖的PBS 20％FCS作为防冻液,用第二种方法进行冷冻处理的大鼠早期胚解冻后其发育率为81％,把用上述方法处理的135枚发育胚移植到17只受体鼠的子宫角内,有2只妊娠产仔4只。     

幼龄和老龄SD大鼠肝、肾组织中生化指标变化的研究

目的研究过氧化脂质(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)在幼龄和老龄SD大鼠肝、肾组织中的变化,探讨此三种酶在机体衰老过程中的意义。方法21日龄和18月龄SD大鼠各10只,4℃取鼠肝、肾组织,用硫代巴比妥酸法测定LPO的含量;化学发光法测定SOD活力;DTNB直接法测定GSH-Px活力。结果幼龄SD大鼠肝、肾组织中LPO含量明显低于老龄鼠(P<0.01);SOD活力显著高于老龄鼠(P<0.01);GSH-Px的活力明显低于老龄鼠(P<0.01)。结论LPO、SOD、GSH-Px在幼龄和老龄鼠中有显著的变化,对机体衰老过程的研究具有指标意义。     

环磷酰胺对SD 大鼠生育力与早期胚胎发育毒性阳性模型的建立

摘要: 目的探讨生育力与早期胚胎发育毒性试验中,皮下给予不同剂量的环磷酰胺对SD 大鼠的影响,选择合适的剂量建立阳性模型,积累实验室背景数据。方法取7 ～ 8 周龄健康SD 大鼠176 只,雌雄各半。按体质量随机分为溶媒对照组( Veh) 、环磷酰胺低( L: 10 mg·kg － 1 ) 、中( M: 20 mg·kg － 1 ) 、高( H: 40 mg·kg － 1 ) 剂量组,每组44 只,雌性各半。雄鼠于交配前28 d 开始给药,每周一次,给药期持续整个交配期直至处死; 雌鼠于交配前14 d 开始给药,交配前每周1 次,交配成功后第0 天给药1 次,总共给药3 次。雄鼠及未交配成功雌鼠于交配结束后处死剖检,雌鼠于受孕后第15 d 剖检,统计各剂量组雄鼠生育率; 雌鼠性周期、妊娠率; 孕鼠死亡率和死胎率。结果环磷酰胺低、中、高各剂量组对SD 大鼠生育力与早期胚胎发育均有一定的毒性作用,且随给药剂量增加,毒性作用增强。结论皮下给予SD 大鼠不同剂量的环磷酰胺,高剂量组对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性影响较为明显,故选择此剂量作为本实验室的阳性模型。     

胚胎大鼠肺成纤维细胞的体外培养

目的:探讨胚胎大鼠肺成纤维细胞的体外培养条件.方法:采用胶原酶消化19d胎鼠肺组织块,经差速离心和反复贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞后采用加胎牛血清的DMEM培养液,进行细胞培养.用波形蛋白免疫细胞化学染色对所分离的细胞进行鉴定.结果:细胞培养24h后有一定量细胞贴壁,48h后贴壁细胞开始生长.结论:该实验方法可以成功地培养大鼠胚胎肺成纤维细胞.     

两种不同妊娠方法对大鼠繁殖性能的影响

目的　比较带乳妊娠 (哺乳期妊娠 )和一般妊娠这两种繁殖方法在子代生产中的作用。方法　取 5月龄左右的SD母大鼠 ,分为试验组 (带乳妊娠 )和对照组 (一般妊娠 ) ,两组都按 1∶1(♀∶♂ )交配方式 ,连续试验三次。结果试验组平均产仔数为 9 3 0只 ,对照组平均产仔数为 8 0 7只 ,而且在此期间带乳妊娠的自发性乳腺瘤普遍降低。结论　带乳妊娠是提高大鼠产量的一种有效方法     

经产大鼠肝郁气滞型乳腺增生病模型血清激素变化观察

目的观察经产大鼠乳腺增生病病证结合模型血清激素变化。方法将20只雌性经产SD大鼠分为正常组、模型组,模型组大鼠隔2日肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液1.0mg/kg,连续10次,之后每日肌肉注射黄体酮5.0mg/kg,连续5日,在整个造模过程中隔日一次将其装入特制的束缚笼中束缚固定过夜,共15次。在末次注射黄体酮次日禁食12h,速眠新麻醉股动脉取血备检。结果模型组大鼠血清泌乳素、雌二醇升高,孕酮降低。结论经产大鼠肝郁气滞型乳腺增生病模型血清激素变化以血清雌二醇升高为主要特征。