痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae)对荷瘤小鼠免疫保护及作用机制初报

本文以荷瘤小鼠为模型,初步观察了痢疾志贺氏菌（Ｓｈ．ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）的抗瘤作用。结果显示：痢疾志贺氏菌能显著抑制ＤＢＡ小鼠的移植性肿瘤Ｌ５１７８Ｙ、Ｐ８１５的生长,提高荷瘤小鼠的生存率,痢疾志贺氏菌还能提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞和脾脏ＮＫ细胞杀瘤活性。痢疾处理的荷瘤小鼠脾脏及腹腔渗出非粘附细胞无杀瘤活性,而痢疾处理的荷瘤小鼠脾脏非粘附细胞和经痢疾处理的正常小鼠腹腔巨噬细胞混合后可表现出协同杀瘤活性,且是特异性杀瘤     

痢疾志贺氏菌8型O-抗原基因簇的破译和特异基因的筛选

志贺氏菌是引进细菌性痢疾的重要病原菌，尤其对发展中国家卫生条件不平衡的地区，可造成爆发性流行．本研究用鸟枪法对痢疾志贺氏菌8型的O—抗原基因簇进行测序，得到序列全长为9227bp．用生物信息学的方法进行序列分析，共发现7个基因，分别是：单糖合成基因gne，糖基转移酶基因(4个)；O—抗原转运酶基因wzx和O—抗原聚合酶基因wzy．并用PCR的方法筛选出了针对痢疾志贺氏菌8型细菌的特异基因，可以用于基因芯片或PCR方法对痢疾贺氏菌8型细菌的快速检测．     

亮菌多糖对S180荷瘤小鼠免疫功能的研究

通过对荷瘤小鼠腹腔注射亮菌多糖后，观察其对荷瘤小鼠淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及对IL-1、IL-2、TNF-α、IFN-γ诱生的影响.研究结果表明：亮菌多糖能够显著提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤活性、对ConA刺激的小鼠淋巴细胞有明显的促进作用，提高荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2的能力；促进荷瘤小鼠机体细胞分泌TNF-α；明显提高荷瘤小鼠血清中IFN-γ的含量.提示亮菌多糖可通过调节机体免疫功能而间接起到抗肿瘤的作用.     

壳寡糖抗肿瘤和免疫调节作用的实验研究

研究壳寡糖抗肿瘤的作用和免疫调节作用.应用SRB法对壳寡糖进行体外抗肿瘤作用研究,对S180荷瘤小鼠的瘤重和胸腺及脾指数进行了的观察,同时观察了壳寡糖体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力的影响.壳寡糖体外对肿瘤生长的抑制作用不明显,体内实验表明壳寡糖能抑制S180小鼠的瘤重.壳寡糖能显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数.壳寡糖体外实验能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力.提示壳寡糖有可能是通过调节荷瘤小鼠免疫力实现抗肿瘤作用的.     

小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR方法的建立

目的为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR检测方法。方法根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox基因、假结核耶尔森氏菌inv基因、志贺氏菌ipa H基因及空肠弯曲菌gyr A基因设计并筛选出特异性引物;优化退火温度等条件,分析多重PCR的特异性、敏感性,使用该多重PCR方法检测小鼠和豚鼠样品。结果多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即小肠结肠炎耶尔森氏菌(511 bp)、假结核耶尔森氏菌(779 bp)、志贺氏菌(290 bp)和空肠弯曲菌(156 bp)。该方法的灵敏度为1×10-3ng/μL(小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌)和1×10-2ng/μL(空肠弯曲菌)。特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带。使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数。结论该多重PCR方法对实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景。     

沙葱多糖的体外抑菌试验研究

采用琼脂扩散法比较了沙葱多糖(SCSP)、沙葱鲜汁及黄芪多糖(HQSP)在体外对大肠杆菌、痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、普通变形杆菌的抑菌作用.结果表明20 mg/mL和40 mg/mL的SCSP对以上6种细菌均有一定的抑制作用,但两者之间的作用效果无显著性差异(P>0.05),SCSP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较为明显,最大抑菌圈直径分别为13.3 mm、9.9 mm;HQSP对以上6种细菌均无任何抑制作用;沙葱鲜汁的抑菌效果最为显著,对6种细菌均有较强的抑制作用,抑菌圈直径均≥8 mm,尤其对肠道细菌痢疾志贺氏菌的抑菌效果更为显著,最大抑菌圈直径为21.2 mm.     

乳粉中常见致病菌的多重荧光PCR检测

利用多重荧光PCR技术快速检测乳粉中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌.以沙门氏菌的invA基因、志贺氏菌的ipaH基因、金黄色葡萄球菌的nuc基因为靶基因,选择特异性引物,以参照菌种为对象,验证引物的特异性,建立多重荧光PCR检测方法,人工添加沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌,确定方法的检出限.结果表明该方法特异性强、灵敏度高,乳粉中检测的灵敏度为1CFU/mL,可在8h内完成对乳品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌的检测.     

小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCＲ 方法的建立

摘要: 目的为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCＲ 检测方法。方法根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox 基因、假结核耶尔森氏菌inv 基因、志贺氏菌ipaH 基因及空肠弯曲菌gyrA 基因设计并筛选出特异性引物; 优化退火温度等条件,分析多重PCＲ 的特异性、敏感性,使用该多重PCＲ 方法检测小鼠和豚鼠样品。结果多重PCＲ 扩增出了预计的PCＲ产物,即小肠结肠炎耶尔森氏菌( 511 bp) 、假结核耶尔森氏菌( 779 bp) 、志贺氏菌( 290 bp) 和空肠弯曲菌( 156 bp) 。该方法的灵敏度为1 × 10 － 3 ng /μL( 小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌) 和1 × 10 － 2 ng /μL( 空肠弯曲菌) 。特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带。使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数。结论该多重PCＲ 方法对实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景。     

姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

研究姜黄素对S180和H22荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响.观察姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力;观察姜黄素对荷瘤小鼠红细胞免疫调节因子活性的影响;采用DPH荧光探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P),并计算膜的微黏度(η)研究红细胞膜脂流动性(LFU).姜黄素能对两种荷瘤小鼠均具有非常显著的抑瘤作用;能够升高两种荷瘤小鼠的红细胞黏附肿瘤细胞的花环率;显著提高两种荷瘤小鼠红细胞C3b受体花环促进率,降低其抑制率;提高两种荷瘤小鼠的红细胞膜的流动性.姜黄素可能是通过提高两种荷瘤小鼠红细胞免疫调节因子活性及红细胞膜脂流动性.从而恢复荷瘤小鼠红细胞免疫功能进而达到抗肿瘤目的.     

绿茶素对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 :观察绿茶素对荷瘤小鼠治疗前后红细胞免疫功能的变化。方法 :将移植 S1 80 实体瘤的昆明种小鼠随机分为治疗组和对照组 ,并设一正常组 ,灌胃给药 ,检测肿瘤红细胞花环率。结果 :对照组肿瘤红细胞花环率与正常组相比显著降低 ;治疗组肿瘤红细胞花环率与对照组相比显著提高。结论 :荷瘤小鼠红细胞免疫功能比健康小鼠低 ,绿茶素能提高荷瘤小鼠机体的红细胞免疫功能     

福氏志贺菌ipaC基因的克隆及序列分析

为了克隆福氏志贺氏菌的ipaC基因，以志贺氏菌福氏2a菌株为摸板进行PCR，并将PCR产物插入列pMD-T载体中，得到阳性重组子，并命名为pMD-ipaC．测序结果显示，其核苷酸序列与文献报道的序列有差异，但编码的氨基酸序列相同，表明志贺氏菌的ipaC基因已被成功克隆．     

青刺胶囊抗肿瘤作用及调节免疫功能的实验研究

目的:研究青刺胶囊对荷S180瘤细胞小鼠的体内抗肿瘤活性和对体液免疫功能的影响。方法:采用S180瘤细胞悬液接种小鼠皮下造实体肉瘤为模型,分别以环磷酰胺片组为阳性对照组、模型组为阴性对照组,青刺胶囊以高、中、低3种剂量为受试药物组,每组ig给药,1次/日,连续给药10天。结果:青刺胶囊显著抑制S180荷瘤小鼠瘤体积的增长速度,使荷瘤小鼠的一般生活状况明显提高,抑瘤率可达到65.2%,瘤重与模型对照组比较P0.01;提高荷瘤鼠血清中溶血素水平(P0.05);提高二硝基氯苯所致的迟发超敏反应强度(P0.05)。结论:通过实验证明,青刺胶囊具有明显的体内抗肿瘤活性,能显著提高荷瘤鼠机体的体液免疫功能,为青刺胶囊的临床应用提供实验依据。     

志贺氏菌实时荧光单引物等温扩增方法的建立及应用

以志贺氏菌ipaH基因特异序列为靶序列,设计RNA-DNA组合引物和链终止序列,优化反应体系,建立实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌的方法,反应时间为44min。通过对4株不同群志贺氏菌和12株其他食源性致病菌进行实时荧光单引物等温扩增检测,结果表明,除4株志贺氏菌外,其他细菌均未扩增出荧光曲线。进一步研究表明,采用普通热裂解法提取DNA,实时荧光检测福氏志贺氏菌DNA的灵敏度为1.16fg/μL,纯培养菌液的灵敏度为1.3CFU/mL;对牛奶模拟样品中福氏志贺氏菌的检出限是1.8CFU/mL。研究结果表明,实时荧光单引物等温扩增检测志贺氏菌灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。     

佛手挥发油对小鼠体内B16黑色素瘤生长的影响

观察了佛手挥发油对小鼠体内B16黑色素瘤生长的影响．以B16黑色素瘤细胞感染小鼠建立动物肿瘤模型,设正常对照组、阴性对照组和阳性对照组及佛手挥发油低、中、高剂量组,各组荷瘤小鼠予以相应的药物实施干涉14d,每天观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况,14d后测定荷瘤小鼠的心、肝、肾中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量．与阴性对照组相比,50mg／kg剂量佛手挥发油能显著抑制雌性荷瘤小鼠移植瘤的增殖（P〈0．05）,显著提高其肝脏中SOD活性（P〈0．01）．表明佛手挥发油对B16移植瘤具有抑制作用．     

甘肃猫儿眼提取物对S180瘤株毒性作用

给予S180荷瘤小鼠不同剂量的甘肃猫儿眼提取物后，对瘤体、胸腺和脾脏重量以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响进行测定分析。结果为，给予甘肃猫儿眼提取物20．0g／kg体质量／d，po，10d后测定，甘肃猫儿眼提取物对S180生长抑制率为42％；对小鼠碳粒廓清指数、免疫器官的重量、血清溶血素值增高等均有促进作用，组织病理学观察，给药组S180瘤体均见坏死灶，坏死面积与给药剂量呈正相关。提示，甘肃猫儿眼提取物对8180细胞增殖具有明显的抑制作用，其作用机制与提高荷瘤小鼠免疫功能有关．     

吐温80合并温热对小鼠黑色素瘤及主要脏器的形态？…

目的：研究质膜作用药物吐温８０合并湿热对荷瘤鼠的抑瘤效果及主要腹部脏器的影响。方法：小鼠腹腔接种Ｂ１６黑色素瘤细胞，建立实例瘤瘤模型，经尾静脉给予吐温８０和进行腹部４１℃６０ｍｉｎ加温处理，观测荷瘤动物存活时间、实体瘤及重要脏器的光镜、超微细胞和组织化学的变化。结果：吐温８０与４１℃温热合并并可明显提高小鼠存活时间，可致肿瘤组织血管阻塞，肿瘤细胞广泛坏死；形态学表现与细胞凋亡的形态学描述相似。对肝     

龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响

研究龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响,从免疫学角度初步探讨龙葵多糖的抗肿瘤药效学作用.实验采用MTT法观察龙葵多糖对Hep G-2和SGC-7901两种人肿瘤细胞的生长抑制作用.测定S180小鼠瘤重,H22荷瘤小鼠生存时间以及胸腺指数、脾指数等.实验结果表明龙葵多糖对Hep G-2细胞和SGC-7901细胞的IC50分别为189.60μg/m L和186.56μg/m L.龙葵多糖能够显著降低S180荷瘤小鼠平均瘤重,与阴性对照组比较具有显著性差异(P0.01),龙葵多糖能明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间(P0.05或P0.01),显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数(P0.05或P0.01).表明龙葵多糖的肿瘤作用是通过改善机体免疫力实现的,而不是通过细胞毒作用发挥的.     

吐温80对温热抑癌作用的增强效应：小鼠黑色素瘤实 …

目的：研究吐温８０合并４１℃温热的抗肿瘤效应;方法：接种Ｂ１６黑色素瘤细胞至ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠不同部位建立荷瘤鼠模型,观察荷瘤鼠死亡率、肿瘤生长曲线、血清肿瘤坏死因子和唾液酸的变化以及经血行转移的肺部瘤灶数的变化;结果：吐温８０合并４１℃温热能明显地抑制小鼠黑色素瘤的生长,延长荷瘤小鼠平均存活时间,使肺部的转移瘤灶数大大降低。但吐温８０和温热单独作用时均无此效果。荷瘤小鼠血清肿瘤灶数大大降低。但吐温     

天门冬提取物对Hep细胞毒性作用研究

以Hep荷瘤小鼠为实验对象,每天给予Hep荷瘤小鼠天门冬提取物10.02、0.0g/kg体重(PO),连续给药10天后,对瘤体、胸腺和脾脏重量以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响进行检测分析。结果为:与对照组比,天门冬提取物对Hep瘤体生长抑制率为31.2%、67.1%,小鼠碳粒廓清指数分别提高了11.2%、37.2%,血清溶血素值分别提高了19.6%、36.5%,动物胸腺和脾脏的重量明显增加;组织病理学观察,给药组Hep瘤体均见坏死灶,坏死面积与给药剂量呈正相关。     

吐温80对温热抑瘤作用的增强效应—小鼠黑色素瘤实验研究

研究吐温８０合并４１℃温热的抗肿瘤效应；方法：接种Ｂ１６黑色素瘤细胞至ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠不同部位建立荷瘤鼠模型，观察荷瘤鼠死亡率、肿瘤生长曲线、血清肿瘤坏死因子和唾液酸的变化以及经血行转移的肺部瘤灶数的变化；结果：吐温８０合并４１℃温热能明显地抑制小鼠黑色素瘤的生长，延长荷瘤小鼠平均存活时间，使肺部的转移瘤灶数大大降低。但吐温８０和温热单独作用时均无此效果。荷瘤小鼠血清肿瘤坏死因子（ｓＴＮＦ）活性和唾液酸水平均明显高于正常ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，吐温８０合并４１℃、１００ｍｉｎ温热可显著降低ｓＴＮＦ活性，并引起血清唾液酸水平的进一步升高。处理后第１０周，随着肿瘤的缩小，唾液酸水平有明显的下降。结论：吐温８０能使温热在低于临界温度时即可发挥有效的抗肿瘤效应，明显提高温热治疗的疗效和安全性，是一较理想的温热合并药物治疗方法。血清ＴＮＦ和唾液酸的变化提示协同效应可能与肿瘤抗原的暴露和机体免疫抗肿瘤作用的活化亦有关