鱼类促性腺激素在文昌鱼哈氏窝免疫细胞化学定位

张致一及其同事曾证实文昌鱼哈氏窝对哺乳动物促性腺激素(LH和FSH)抗体发生免疫阳性反应。方永强等发现了文昌鱼哈氏窝匀浆中含有一种促性腺激素物质,并用电镜观察证实了这种物质存在于哈氏窝上皮细胞中。但Sahliil未能证实文昌鱼哈氏窝与脊椎动物垂体激素的抗体发生免疫反应。新近,Nozaki和Gorbman用免疫组织化学ABC法发现了人黄体生成素β-亚单位(hLHβ)与人绒毛膜促性腺激素(hCG)抗体在哈氏窝中呈现免     

文昌鱼在生殖内分泌进化中的地位

评述了近十多年来国内外学者先后发现文昌鱼哈氏窝能够合成脊椎动物促 性腺激素样物质体内存在促性腺激素释放素与性腺发育周期呈现下在的相关性,以及性腺中存在着性固醇激素。     

损伤文昌鱼哈氏窝对其结构与功能的影响

在繁殖季节,用谷氨酸单钠损伤文昌鱼哈氏窝结构和内分泌功能之后,发现性成熟文昌鱼出现排卵障碍,大生长期卵巢和精巢发育停滞;在非繁殖季节,则推迟文昌鱼性腺发育的启动。用外源性促性腺激素进行替代疗法,可使排卵和性腺发育得到一定程度的恢复。这些结果可为完善和了解脊椎动物脑垂体功能的进化历程以及哈氏窝在文昌鱼生殖内分泌调控系统中所起的重要作用提供新的证据。     

皱瘤海鞘神经复合体与性腺发育相关性研究

一些学者已证明,脊索动物头索类文昌鱼的神经系统和哈氏窝存在两种类似脊椎动物生殖激素,即促性腺激素释放素(GnRH)和促性腺激素(GTH).这类激素参与调控文昌鱼性腺发育及其生殖活动.然而,更原始的尾索类海鞘神经复合体(脑神经节和神经腺)是否也存在这两种生殖激素及其与性腺发育的关系,迄今仍未见报道.本文用免疫细胞化学方法首次发现了皱瘤海鞘神经复合体和性腺存在上述两种激素,并与它们的性腺发育相关.     

文昌鱼排卵(精)过程中神经递质的变化

在进化上具有重要代表性的文昌鱼的生殖生理,长期以来了解甚少。近几年来张致一等对文昌鱼生殖过程中的激素调控进行了较多的研究,并利用免疫组织化学观察到文昌鱼哈氏窝上皮细胞存在多种肽类促性腺激素的阳性颗粒。本文作者曾进一步发现在文昌鱼中存在着两种类型的LHRH(类似哺乳动物和鲑鱼的LHRH)和多种阿片肽激素,而且它们     

促黄体素(LH)在文昌鱼哈氏窝中的免疫细胞化学定位

哈氏窝组织是一个沟状结构,位于文昌鱼轮器的前部,人们长期以来推测它可能与脊椎动物的垂体前叶同源,但是没有确凿的生理学证据。最近我们应用免疫细胞化学技术,证实了LH免疫阳性颗粒呈现于哈氏窝的上皮细胞中,这个发现在系统发育上有着很大意义,因为它首次提供了确切的依据,证明文昌鱼的哈氏窝与脊椎动物的垂体同源。     

文昌鱼类固醇激素水平与性腺发育相关性的研究

张致一等人用放射免疫测定法证实了性成熟文昌鱼性腺中存在性类固醇激素.然而,文昌鱼在性腺发育不同时期,性类固醇激素含量是否像脊椎动物那样,也发生相关性变化,迄今仍不了解.因此,本研究对进一步明了文昌鱼性腺发育的激素调控有重要的理论意义.     

视网膜中谷氨酸和γ-氨基丁酸受体及其特性

谷氨酸和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）是视网膜神经回路中的重要神经递质,利用膜片钳技术和快速灌流系统,对视网膜中谷氨酸受体和ＧＡＢＡ受体进行了细致的研究,取得了若干重要进展,实验表明,水平细胞上的谷氨酸体为ＡＭＰＡ亚型,主要由ｆｌｏｐ型的剪接变异体组成,在双极细胞上,ＧＡＢＡＡ和ＧＡＢＡＣ两处受体亚型共存,并且首次发现ＧＡＢＡＣ受体显示明显的失敏,对受体动力学的分析表明,ＧＡＢＡＣ受体的激活、失活和失敏     

人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

通过筛选人胎儿脑ｃＤＮＡ文库,克隆了编码一个新的ＲＮＡ结合蛋白的人ｃＤＮＡ,命名为ＧＲＹ－ＲＢＰ,人ＧＲＹ－ＲＢＰ ｃＤＮＡ的长度为２９３２ｂｐ,编码一个具６２３个氨基酸,分子量为６９．６ｋｕ的ＲＮＡ结合蛋白。ＧＲＹ－ＲＢＰ蛋白含有３个ＲＮＡ识别基序（ＲＮＡ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｍｏｔｉｆｓ,ＲＲＭｓ）和一个富含甘氨酸（Ｇ）、精氨酸（Ｒ）、酷氨酸（Ｙ）的羧基端,经数据库比较发现该蛋白与许多ＲＲ     

Wnt/Frizzled信号传导通路在肾癌细胞系的表达

对Ｗｎｔ５Ａ,Ｗｎｔ５Ａ受体Ｆｒｉｚｚｌｅｄ５（ｈＦｚ５）及其信号传导系统下游成分－致癌性β－连环蛋白（β－ｃａｔｅｎｉｎ）在肾癌细胞系ＧＲＣ－１中表达的变化进行了观察,并定量ＲＴ－ＰＣＲ结果表明ＧＲＣ－１细胞系中Ｗｎｔ５Ａ和ｈＦｚ５的ｍＲＮＡ水平明显高于正常肾细胞系,这一发现被原位杂交结果证实,进上步的研究发现β－连环蛋白的含量明显高于正常肾小管细胞（Ｐ〈０．０１）。应用持异性免疫细胞化学和ＳＳ     

稻瘟病病原物诱导启动子的构建及表达

利用ＰＣＲ技术从小麦和马铃薯中分别扩增并克隆了病原诱导性谷胱甘肽－Ｓ－转移酶基因ＧｓｔＡｌ和Ｇｓｔｌ启动子片段,将它们分别与水稻肌动蛋白基因（Ａｃｔｌ）核心启动子序列、５’端非翻译前导序列以及ＧＵＳ基因融合构建出植物载体ｐＷＭＩＧ－５０和ｐＰＭＩＧ－５０,然后转化水稻,并对嵌合启动子的诱导活性进行了分析。结果表明：（１）在转基因水稻细胞中嵌合启动子可受稻瘟病病原物的诱导;（２）水稻Ａｃｔｌ第一内含     

PKC对HeLa细胞G1/S期进程调控及其机理的研究

研究了ＰＫＣ活性变化对ＨｅＬａ细胞Ｇ１／Ｓ期进程的影响及其作用机理,结果表明：（１）ＨｅＬａ细胞Ｇ１期ＰＫＣ活性的变化影响其Ｇ１／Ｓ期进程,其中Ｇ１期ＰＫＣ活性升高促进Ｇ１／Ｓ期进程,而ＰＫＣ活性降低显著抑制Ｇ１／Ｓ期进程;（２）ＰＫＣ的刺激剂ＴＰＡ促进早期应答基因ｃ－ｍｙｃ与ｃ－ｊｕｎ的表达,ＰＫＣ的抑制剂ＧＦ－１０９２０３Ｘ抑制其表达;（３）ＨｅＬａ细胞Ｇ１／Ｓ期进程中,ＴＰＡ作用促进Ｇ１期Ｃ     

绿茶多酚对自由基诱导的红细胞氧化性溶血的抑制作用

以人血红细胞在体外的氧化性溶血为模型研究了自由基诱导的生物膜损伤及天然抗氧化剂对它的抑制作用,采用水溶性偶氮引发剂２,２‘－偶氮二（２－脒基丙烷）二盐酸盐（ＡＡＰＨ）引发红细胞的溶血并以从绿茶中提取的主要多酚类化合物抑制其溶血,使用的茶多酚有：（一）－表儿茶素（ＥＣ）,（－）－表Ｐｅｉ儿茶素（ＥＧＣ）,（－）－表Ｐｅｉ儿茶素Ｐｅｉ酸酯（ＥＧＣＧ）和Ｐｅｉ酸（ＧＡ）。研究发现,在３７℃时加入ＡＡＰＨ     

孤儿受体TR3 mRNA在大鼠卵泡中的表达和定位

采用原位杂交方法,研究了孤儿受体ＴＲ３ｍＲＮＡ在大鼠卵泡早期发育过程中的定位,结果ＴＲ３ｍＲＮＡ首先在出生后２ｄ（Ｄ２）的卵巢间质细胞中表达;随后在出生后４ｄＤ４）的初级卵泡颗粒细胞（ＧＣ）中表达,ＴＲ３ｍＲＮＡ在ＧＣ的表达随卵泡的发育而增另,在Ｄ６其高量表达逐渐转至ＧＣ外层和膜细胞（ＴＣ）内层,这种表达方式一直维持到小窦状卵泡期（Ｄ１０￣１６）,在Ｄ３０９某些小窦状卵泡的ＧＣ内层又有较高量的表达     

人δ珠蛋白基因启动子区-64位C→T点突变对DNA结合蛋白的影响

用凝胶迁移改变实验研究了人δ珠蛋白基因启动子区－６４Ｃ→Ｔ点突变对ＤＮＡ结合蛋白的影响,人工合成两条３６ｂｐ该基因启动子区－８３－－４８ｂｐ之间的片段ＷＯＧ和ＭＯＧ,ＷＯＧ含有野生型“ＣＡＡＴ样盒”以及,ＭＯＧ含有变异型“ＣＡＡＴ样盒”。结果表明：（１）在红系细胞ＭＥＬ,ｋ５６２以及经Ｈｅｍｉｎ诱导的ｋ５６２细胞中,ＭＧ对ＣＣＡＡＴ结合蛋白和ＧＡＴＡ－１的要和力显著增加;（２）经Ｈｅｍｉｎ诱导的ｋ     

沙冬青抗冻蛋白的分离、纯化及其理化特性分析

用ＤＥＡＥ－纤维素ＤＥ－５２,丙烯葡聚糖Ｓ３００柱层析,热处理及等速电泳技术分离纯化了热稳定的冬季沙冬青叶片抗冻蛋白（ＡＦＰ）,获得了电泳纯的分子量约为５０ｋｕ的ＡＦＰ,经Ｓｈｉｆｆ试剂检验为含糖的ＡＦＧＰ,显微镜观察冰点熔点差异技术和差示扫描量热法（ＤＳＣ）测定了该蛋白热滞活性（ＴＨＡ）,用ＤＳＣ测定ＴＨＡ在５ｍｇ／ｍＬ时约为０．３５℃．圆二色性（ＣＤ）分析表明,该ＡＦＧＰ中ａ－螺旋为１１％,反     

人白介素-6受体胞外区配基结合功能域活性部位的设定

以人生长激素受体（ｈｕｍａｎ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ, ｈＧＨＲ）胞外区配基结合功能域（Ｋ５２－Ｌ２５１）的晶体结构为模板,同源模建了可信度较高的人白介素－６受体（ｈｕｍａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ｈＩＬ－６Ｒ）胞外区配基结合功能域（Ｖ１０６－Ｐ３２２）的三维空间结构．通过观察该功能域中影响受体与配基结合的一些重要氨基酸残基的空间定位和分析４个保守的半胱氨酸残基定点突变对该功能域三维空间结构产生的影响,发现在ＩＬ－６受体双桶结构中３０５位谷氨酸残基的羧基侧链的空间构象对整个ＩＬ－６Ｒ的配基结合活性的改变起着关键作用．进一步借助于ＩＬ－６Ｒ和配基（ＩＬ－６）分子对接,确认了活性部位中３０５位谷氨酸残基的羧基侧链的空间构象对受体和配基对接时的静电势互补至关重要．     

转甜菜碱醛脱氢酶基因烟草叶片中抗氧化酶活性增高

转甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）基因烟草叶片超氧物歧化酶（ＳＯＤ）的活性比对照增加约３６％,过氧化氢酶（Ｃａｔ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）活性分别提高约的６２％和８８％,定位于叶绿体中的抗坏血酸－谷胱甘肽途径的抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡＰＯＤ）,脱氢抗坏血酸还原酶（ＤＡｓＡＲ）和谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性分别提高６７．７％,４７．９％和３８．８％,表明由ＳＯＤ催化阴离子自由基Ｏ２所产生的活性氧Ｈ２Ｏ２能被     

孤啡肽及其片段的合成和构效关系

用固相多肽合成方法合成了孤啡肽（ＮＣ）及其４个片段,并进行了受体选择性和亲和性测定、降血压作用及其机理和构效关系的研究。发现ＮＣ（１￣１３）ＮＨ２是拥有ＮＣ全部活性的最小片段。Ｃ端４肽对于ＮＣ可能不是完全必需的,但继续缩短则导致受体选择性和性的严重改变。１２￣１３位的Ａｒｇ－Ｌｙｓ是ＮＣ的活性中起到了重要作用。ＮＣ的降压作用与肾素－血管紧张素系统的升压作用不互相拮抗。     

小麦黄花叶病毒72ku蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备

采用逆转录－ＰＣＲ方法,扩增获得小麦黄花叶病毒（ＷＹＭＶ）ＲＮＡ２上的７２ｋｕ蛋白基因,将其克隆到ｐＥＴ３０ａ（＋）上,构建了该基因的原核表达载体ｐＥＴＰ７２。ＳＤＳ－ＲＡＧＥ分析结果显示,经ＩＰＴＧ诱导,７２ｋｕ蛋白基因在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中得到高效表达。以含表达产物的凝胶作为抗原,免疫家兔,首次制备了小麦黄花叶病毒ＲＮＡ２７２ｋｕ蛋白特异性抗血清。