多菇口服液毒理安全性实验研究

目的检测多菇口服液作为保健食品的安全性。方法通过小鼠经口急性毒性试验、致突变试验,大鼠30d喂养试验对多菇口服液进行检测。结果小鼠经口LD50>21.5g/kg,属无毒级物质;致突变试验结果为阴性;大鼠30d喂养试验表明各剂量组体重增长、食物利用率、脏体比、血液学及血清生化指标与对照组比较均无显着性差异(P>0.05)。病理检查主要脏器未发现与实验有关的病理性改变。结论多菇口服液为无毒、无致突变作用的保健食品。     

骨营养素安全性毒理学实验研究

目的检测骨营养素作为保健食品的安全性。方法依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》,通过小鼠经口急性毒性试验、致突变试验,大鼠30 d喂养试验对骨营养素进行检测。结果小鼠经口LD50>21.5 g/kg,属无毒级物质;致突变试验结果为阴性;大鼠30 d喂养试验表明,各剂量组体重增长、食物利用率、脏体比、血液学及血清生化指标与对照组比较均无显着性差异(P>0.05),通过病理检查,主要脏器未发现与实验有关的病变。结论骨营养素为无毒、无致突变作用的保健食品。     

玛咖细粉毒理安全性实验研究

目的检测玛咖细粉作为保健食品的安全性。方法小鼠经口急性毒性、二项致突变试验(小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验)以及90 d喂养试验。结果玛咖细粉对两种性别的SPF级昆明种小鼠急性经口毒性试验,24 h累积两次灌胃总量为10 g/kg.BW(相当于人群推荐日摄入量0.033 g/kg.BW的300倍),观察两周内动物未见明显中毒症状,无动物死亡,按急性毒性分级标准评价,该受试物属实际无毒级。二项致突变试验(骨髓细胞微核、小鼠精子畸变)结果均为阴性。90 d喂养试验结果表明:以1.5%、3.0%、6.0%比例将玛咖细粉加入基础饲料中进行90 d喂养实验,连续经口给予13周。低、中、高剂量组雌、雄性大鼠实际摄入受试物的量分别为1.51 g/kg.BW、3.05 g/kg.BW、6.16 g/kg.BW和1.42 g/kg.BW、2.87g/kg.BW、5.78 g/kg.BW(分别相当于人群推荐日摄入量0.033 g/kg.BW的46、93、187倍和43、87、175倍),对Wistar大鼠的临床检查、血液学、生化学、脏器重量和系数以及病理组织学等指标无明显影响,未发现该受试物有明显的毒性作用。结论玛咖细粉作为保健食品是安全的。     

龙肽免疫胶囊毒理安全性实验研究

目的检测龙肽免疫胶囊作为保健食品的安全性。方法急性经口毒性、二项致突变试验(小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验)以及大鼠30d喂养试验。结果龙肽免疫胶囊对两种性别的SPF级昆明种小鼠急性经口毒性试验,24h二次灌胃量达20g/kg(相当于人群推荐日摄入量3.0g/60kg的400倍),两周内动物未见明显中毒症状,无动物死亡,按急性毒性分级标准规定,该受试物属无毒级。二项致突变试验结果均为阴性。30d喂养试验结果表明:将受试样品按1.25%、2.50%、5.00%的比例加入基础饲料中(分别相当于人群推荐日摄入量0.05g/kg的25、50、100倍),受试样品各剂量组对Wistar大鼠体重、进食量、食物利用率、血液学、血液生化、脏器重量、脏/体比值以及病理组织学等指标与正常对照组比较,均无显著性差异,未发现该受试物有明显的毒性作用。结论龙肽免疫胶囊作为保健食品是安全的,可以通过一、二阶段的毒理学安全性评价。     

草苁蓉多糖的毒性实验研究

按照我国<食品安全性毒理学评价程序和方法>的要求,采用急性毒性实验(LD50)、最大耐受量测定、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验及小鼠精子畸变实验,研究了草苁蓉多糖急性毒性及遗传毒性作用.结果表明,草苁蓉多糖LD50值大于24 g/kg,最大耐受量为30 g/kg;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核数量、小鼠精子畸变数量与空白对照组比较无明显差异.草苁蓉多糖属一级无毒物,未见有致突变作用.     

银杏叶食用安全性的毒理学评价

对银杏叶食品安全性毒理学进行了全面评价,试验动物经口LD50 >21. 5g/kg,基本无毒;遗传毒性实验未见有致突变作用; 30d喂养实验表明动物各项生理指标均未发生异常,表明银杏叶有较高的食用安全性.     

土家药山姜挥发油的安全性初步评价

以小鼠为实验对象,通过急性毒性试验和亚急性毒性试验,初步评价土家药山姜挥发油的安全性.急性毒性试验分为挥发油组和对照组,挥发油组以最大耐受量单次给药5 mL/kg.亚急性毒性试验分为挥发油低剂量组(给药剂量1.3 g/kg)、挥发油高剂量组(给药剂量2.6 g/kg)和对照组,灌胃给药,每天1次,连续15 d.给药后,观察小鼠的体征变化,记录体重和脏器系数,检测血浆中尿素氮、肌酐含量及血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力,进行组织病理学检查.结果表明,与对照组相比,给药后大部分小鼠体征正常,个别小鼠有竖毛等现象,小鼠的脏器系数、尿素氮含量、肌酐含量、谷丙转氨酶活力、谷草转氨酶活力无明显变化(P>0.05);与开始试验时的体重相比,结束试验时的小鼠体重未呈下降趋势;急性毒性试验中1只小鼠死亡;亚急性毒性试验中1只小鼠的谷丙转氨酶活力明显升高(135.30 U/L);1只小鼠肝组织有炎症,1只小鼠存在肝纤维化迹象.实验结果提示山姜挥发油急性毒性低,但在临床高剂量下连续用药可能出现一定的肝毒性,临床上使用应注意其安全性.     

新氨基酸螯合钙制剂L-亮氨酸钙的急性毒性及致突变性

研究自制的新型氨基酸螯合钙制剂--L-亮氨酸钙的急性毒性及致突变性,并对其安全性进行评价.对小鼠分别给予不同质量的L-亮氨酸钙混悬液灌胃, 连续7 d观察小鼠急性毒性.将50只小鼠随机分为5组:阴性对照组、质量比为0.04 g·kg-1的环磷酰胺组,以及质量比分别为0.5,2.5,5.0 g·kg-1的L-亮氨酸钙混悬液组通过染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,观察L-亮氨酸钙的遗传毒性.结果表明,为小鼠灌胃7 d后半数致死计量(LD50)大于10 g ·kg-1,L-亮氨酸钙属实际无毒物质在染色体畸变试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验中均呈阴性反应,未显示致突变作用,表明L-亮氨酸钙无毒性和无致突变性.     

油橄榄提取物复配左旋肉碱酒石酸盐抗疲劳功能及安全性评价

为研究油橄榄提取物复配左旋肉碱酒石酸盐抗疲劳功能及其安全性,将小鼠随机分为3个剂量组(1.05、0.70、0.35g/kg)和1个阴性对照组,用油橄榄复配物对小鼠进行灌胃,连续30d后,测定负重游泳时间及血尿素氮、肝糖原、血乳酸含量;通过急性毒性实验、遗传毒性实验、大鼠30d喂养实验,对油橄榄复配物进行安全性评价。研究结果显示:灌胃30d后,与阴性对照组比较,高剂量组小鼠负重游泳时间显著延长(P<0.05);无负重游泳90min,高剂量组小鼠血尿素氮含量显著降低(P<0.05),中剂量组极显著降低(P<0.01);无负重游泳10min,高剂量组小鼠血乳酸含量显著下降(P<0.05);小鼠肝糖原的储备量无显著差异(P>0.05)。安全性评价结果显示,油橄榄复配物无急性毒性和遗传毒性,并且在30d喂养实验期间,与阴性对照组比较,各剂量组的动物体重、进食量、食物利用率、血液学、血液生化学和组织病理学等指标均无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,油橄榄复配物有明显的抗疲劳功能并且具有较高的安全性。     

破壁灵芝孢子粉胶囊毒性的实验研究

摘要: 目的观察破壁灵芝孢子粉胶囊毒性。方法( 1) 急性毒性试验: 选用昆明种小鼠20 只,雌雄各半,实验前禁食16 h, 24 h 内灌胃3 次,剂量为15 g /kg BW。灌胃后,连续观察7 d,记录中毒表现及死亡情况。( 2) 30 d 喂养试验: 断乳大鼠,体质量60 g 左右, 80 只,雌雄各半。随机分为4 组,即对照组和高、中、低剂量实验组( 1. 5、0. 75、0. 375 g /kg BW) ,各剂量组在基础粉料中分别掺入1. 5%、0. 75%、0. 375% 的受试物,单笼喂养,自由饮食,记录大鼠进食量、体质量,连续喂养并观察30 d。观察动物的一般表现、体质量、食物利用率,血常规及生化指标: 白细胞计数及其分类、红细胞计数、血红蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白。结果各剂量组动物体质量、食物利用率与对照组比较差异无显著性( P ＞ 0. 05) 。其血液指标: 白细胞计数及其分类、红细胞计数、血红蛋白; 生化指标: 谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、白蛋白均在正常值范围; 病理学检查未见有意义的病理变化。该受试物对两种性别小鼠的急性毒性LD50均大于15 g /kg BW。结论破壁灵芝孢子粉胶囊属无毒级。     

农杆菌介导人肝再生增强因子转化河套蜜瓜的研究

利用三亲融合法将含有人肝再生增强因子(hum an augm en ter of liver regeneration,hALR)的果实特异性表达载体pPZP-CAN导入农杆菌LBA 4404,转化河套蜜瓜子叶外植体,经诱导与筛选获得了抗性再生植株,PCR扩增、PCR-Sou thern和斑点杂交检测证明hALR已整合入河套蜜瓜再生植株基因组中.     

甜瓜果实特异性表达黄瓜素基因启动子区的克隆和序列分析

黄瓜素(cucum is in)是甜瓜类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶,其表达具有果实特异性.应用PCR方法从甜瓜基因组DNA中扩增出该基因自转录起始位点至上游一段长310 bp片段,并将其克隆到pUC 19载体中,序列分析表明该序列与已报道的相应序列完全相同,且具有TATA-box、CAAT-box、G-box、I-box-like和增强子元件TGTCACA等功能域,具有典型的果实特异性启动子特征.成功获得甜瓜果实特异性表达基因的启动子,为下一步实现外源基因在甜瓜果实中特异表达奠定基础.     

花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用

为建立甜瓜(Cucumis melo L.)简便易行转化频率高的转基因技术,以甜瓜品种河套蜜瓜为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体,进行了花粉管通道法转基因研究.自交授粉后分别于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h,切去柱头上端1/3部分,立即滴加质粒DNA溶液,果实成熟后收获转化种子.对T0代植株进行PCR检测,结果表明不同时间处理所得到的T0代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后7 h滴加DNA溶液所获得的转化率为28.3%.对一部分PCR阳性的T0代植株基因组DNA进行Southern杂交分析,结果表明所有样品均出现特异性杂交条带,证明外源基因已整合到受体植物基因组中.     

建立小鼠学习记忆损伤模型的方法学研究

目的 通过避暗和Morris水迷宫实验研究建立小鼠学习记忆损伤模型的有效方法。方法 分别在小鼠避暗电击训练之前20 min腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg体质量,电击训练结束之后立即皮下注射亚硝酸钠90 mg/kg和下次电击测试之前15 min给小鼠灌服35%乙醇0.1 mL/10 g,建立记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,测定各组小鼠在电击训练后6 h、24 h、30 h、48 h后的避暗潜伏期、错误次数和探头次数等多项指标,评价三种记忆障碍模型方法各指标的敏感性和最适测试时间。小鼠分别腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg和灌服35%乙醇0.1 mL/10 g造成学习记忆损伤,通过Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,建立空间学习记忆障碍小鼠模型的评价方法。结果 避暗实验显示：和空白组比较,东莨菪碱造成记忆获得障碍模型小鼠在电击训练之后6 h、24 h避暗潜伏期明显缩短,错误次数也明显增多(P0.05)。结论 避暗实验中使用东莨菪碱、亚硝酸钠构建小鼠记忆获得障碍和记忆巩固模型时应在造模后24 h和30 h检测相应指标;乙醇造成的记忆再现障碍模型,应在电击训练24 h后,在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇后检测,指标以避暗潜伏期、错误次数和探头次数为宜。Morris水迷宫实验提示东莨菪碱能够损害小鼠空间学习记忆,可以作为构建小鼠空间学习记忆障碍模型的药物,乙醇并不能建立小鼠的空间记忆障碍模型。     

转基因工程稻大米对小鼠的急性毒性与致突变研究

以转cry1Ac/sck双价抗虫基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与II-32A/MSB大米为材料,进行了小鼠急性毒性试验、精子畸形试验与骨髓细胞微核试验研究,检测转基因稻大米对小鼠表观体症行为、脏器系数、血常规、精子畸形与微核率等的影响,以进一步评价转基因工程稻大米的食品安全性.小鼠急性毒性试验结果显示:转基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与I-I-32A/MSB大米各剂量组灌喂小鼠,小鼠的行为、姿势、呼吸、毛色均正常;解剖观察其肝、脾、肾、心脏、胃、肠、生殖腺等主要脏器的外形、颜色、大小比例等无异常;血常规分析也显示受试鼠与对照材料组小鼠没有显著差异.小鼠精子畸形试验与骨髓细胞微核试验结果均显示转基因工程稻没有明显诱发小鼠精子畸变与骨髓细胞产生微核.其结果是:转基因工程稻MSA4、KF6-304、21S/MSB与II-32A/MSB大米未引起小鼠明显的急性毒性反应,对小鼠无明显的致畸与致突变作用.     

Spexin转基因小鼠的构建及表型初步分析

Spexin是一种具有多种生物学功能的神经肽,在代谢疾病及神经系统疾病中发挥重要作用.为了深入研究spexin的生理功能和相关机制,构建了spexin转基因小鼠,通过检测血液中spexin含量以及糖耐受实验,对模型小鼠进行了初步的表型分析.利用piggyBac(PB)转座子技术培育spexin转基因小鼠,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别在基因层面和蛋白层面验证了模型动物是否构建成功.之后用饲喂高脂饲料的雄性小鼠进行糖耐受实验,对转基因模型小鼠进行表型分析.PCR结果显示,以靶向spexin的两对引物扩增,转基因型小鼠基因组DNA中能分别扩增出300 bp和301 bp的片段,而野生型小鼠则不能.ELISA结果中,转基因型小鼠血清中spexin含量较野生型小鼠显著升高;同一表型中,雌雄小鼠间血清中spexin水平无明显差异.饲喂高脂饲料85 d内,转基因型小鼠和野生型小鼠体重变化未观察到显著差异;糖耐受结果显示,转基因型小鼠每个时间点血糖浓度均低于野生型小鼠,且在15 min时具有显著性差异.结果显示成功构建了过表达spexin基因的小鼠模型.spexin表达水平的升高在一定程度上提高了C57BL/6小鼠的糖耐受能力.该模型为进一步研究spexin基因在动物体内的功能以及在代谢疾病发病机制中的作用奠定了基础.     

转基因工程抗虫杂交稻大米的食品安全性评价

为评价转基因工程抗虫杂交稻大米的食品安全性,以转crylAc/sck双价基因抗虫杂交稻Ⅱ-32A/MSB,KF6-304大米为材料,进行了大鼠30 d喂养试验,检测转基因杂交稻大米对大鼠表观体症、脏器系数、血常规与血生化指标值的影响.结果显示:转基因抗虫杂交稻Ⅱ-32A/MSB,KF6-304大米各剂量组喂养大鼠,大鼠的行为、呼吸、毛色均正常.以Ⅱ-32A/MSB饲喂大鼠,除雌鼠低剂量组的胃体比、血清总蛋白与中剂量组的球蛋白明显高于对照组,雌鼠低剂量组的萄葡糖与中剂量组的白球比例、雄鼠低剂量组与高剂量组的嗜中性粒细胞百分比显著低于对照组外,其余重要检测指标值均与对照无显著差异.以KF6-304饲喂大鼠,除低剂量组雌鼠的甘油三酯与中剂量组雄鼠的萄葡糖显著低于对照组,其余重要检测指标值则与对照均无显著差异.以上结果提示转基因工程抗虫杂交稻Ⅱ-32A/MSB,KF6-304大米的30 d喂养试验对大鼠表现体症及生理生化无明显不良影响.表5,参12.     

小鼠视神经再生研究动物模型的建立

目的总结制作小鼠视神经完全截断性动物模型作为视神经再生研究的经验和体会。方法将雄性Bcl-2高表达转基因小鼠(Bcl-2 transgenic mice)和受GFAP启动子控制表达疱疹病毒-胸苷激酶转基因雌性小鼠(GFAP-TK)交配产生的4只8~12周成年小鼠(20~30g),Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠作为实验组,同周龄4只Bcl-2转基因小鼠作为对照组。其中Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠皮下植入缓释泵,连续7d释放更昔洛韦(GCV)100mg.kg-1.d-1以选择性地去除视神经损伤后激活的星形胶质细胞。更昔洛韦缓释泵植入术后2d在两组动物中制作右侧单眼标准完全性视神经钳夹损伤模型,视神经钳夹10d后获取组织标本。采用免疫荧光染色特异性检测再生轴突纤维并进行定量分析;结合罗丹明的霍乱毒素B亚单位(CTB-R)或增强表达绿色荧光蛋白的复制缺陷型腺相关病毒(AAV-EGFP)用作顺行性标记物以显示再生轴突是否到达大脑靶器官。结果在Bcl-2/GFAP-TK双转基因小鼠中存在免疫荧光阳性的再生视神经轴突,再生轴突计数为71.99±24.04,并可见生长锥(growth cone)样结构,但是再生轴突纤维未能延伸达到大脑靶器官。在对照组Bcl-2转基因小鼠中未见明显再生迹象。结论小鼠视神经完全截断性动物模型可用于视神经病变的再生研究。