花生根瘤菌某些菌株在自生条件下的吸氧活力

用气相色谱法和亚甲蓝去色反应检测29个花生根瘤菌菌株的吸氢性能,只有5个菌株能吸氢·吸氢活力最高为689n mol H_2/mg prot.h.选试的四种培养基中以吸氢培养基对根瘤菌株吸氢活力效果最好,在该培养基中菌株不表现固氮酶活力.在不固氮情况下,外源氢是诱导吸氢活力的必需条件.培养基中的碳源浓度对菌株吸氢活力有明显的影响,高浓度的碳源抑制吸氢.一氧化碳和乙炔对菌株L8 3吸氢的抑制程度比菌株35_1小得多.     

Hg^2＋对银合欢和蚕豆根瘤茵生长影响的初步研究

用液体培养，通过测定培养液中的光密度、细菌数量和氨氮，测定了不同浓度Hg^2＋对蚕豆和银合欢两种根瘤菌的生长的影响，结果表明：两种根瘤菌对不同浓度的Hg^2＋表现出不同的耐受性，蚕豆根瘤菌可以耐受10ppm浓度的Hg^2＋，而银合欢根瘤菌只能耐受4ppm以下的Hg^2＋，但蚕豆根瘤菌的延滞期比银合欢根瘤菌相对要长．两种根瘤菌总的生长趋势是：Hg^2＋浓度越高，延滞期越长．蚕豆根瘤菌在10ppm以下的Hg^2＋浓度范围内，表现出较高的固氮活性，而银合欢根瘤菌在Hg^2＋浓度大于4ppm以后，固氮活性呈现较低的水平．     

根瘤菌属生物学特性的研究

作者对不同类型根瘤菌的生物学特性进行了较为系统地研究，结果表明：所有测试菌株的３－酮基乳糖反应，明胶液化，纤维素水解，柠檬酸盐利用，淀粉水解及酪蛋白水解均呈阴性；蛋白胨肉汤中唯有苜蓿根瘤菌和快生型大豆根瘤菌能生长；石蕊牛奶反应中所有慢生型菌株均产碱，不产血清环，快生型菌株产酸，具血清环，唯独苜蓿根瘤菌产碱；快生型菌株能利用１４种以上不同碳源，而慢生型菌株仅能利用７～９种碳源．     

Nitro苜蓿和鹰嘴紫云英根瘤菌的分离与鉴定

采用划线和稀释分离相结合的方法对美国Ｎｉｔｒｏ苜蓿和鹰嘴紫云英根瘤的分离物进行纯化，并对分离的菌株进行了鉴定及理化测试，研究结果表明，这两种根瘤菌株生长速度快，结瘤率高，具有较强的耐盐性，其耐受浓度达到０．６ｍｏｌ／Ｌ和０．７ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ，从鹰嘴紫云英的根瘤中分离的根瘤菌株在ＢＴＢ培养基中培养产酸，在石蕊牛奶培养基中培养产碱。     

金合欢根瘤菌的生物学特性

从金合欢根瘤分离到6株金合欢根瘤菌并鉴定这些菌株为快生型，该菌在酵母浸出物－－甘露醇（YEM）培养基上产酸，代时在4小时以下，金合欢根瘤菌能利用包括双糖在内的大部分，碳源，但其中MXAF4，MXAF5和MXAF6不能利用大部分快生型根瘤菌能利用的蔗糖，事欢要胶 生长PH范围广（PH4．5－9），所有菌株能在37度条件下生长，其中MXAF4，MXAF5和MXAF6在40度仍能生长，而快生型大豆根瘤菌在37度条件下不能生长，金合欢根瘤菌对链霉素，庆大霉素和四环素敏感而对青霉素有抗性，金合欢根瘤菌根据石蕊牛奶反应可分面两群：菌株MXAF1，MXAF2和MXAF3石蕊牛奶反应产酸 乳清环，而菌株MXAF4，MXAF5和MXAF6产碱无乳清环。     

Hg2+对银合欢和蚕豆根瘤菌生长影响的初步研究

用液体培养,通过测定培养液中的光密度、细菌数量和氨氮,测定了不同浓度Hg2 对蚕豆和银合欢两种根瘤菌的生长的影响,结果表明:两种根瘤菌对不同浓度的Hg2 表现出不同的耐受性,蚕豆根瘤菌可以耐受10ppm浓度的Hg2 ,而银合欢根瘤菌只能耐受4ppm以下的Hg2 ,但蚕豆根瘤菌的延滞期比银合欢根瘤菌相对要长.两种根瘤菌总的生长趋势是:Hg2 浓度越高,延滞期越长.蚕豆根瘤菌在10ppm以下的Hg2 浓度范围内,表现出较高的固氮活性,而银合欢根瘤菌在Hg2 浓度大于4ppm以后,固氮活性呈现较低的水平.     

花生根瘤菌诱变株感染大豆结瘤和固氮

花生根瘤菌诱变株感染大豆结瘤和固氮龙敏南，许良树，张凤章，曾定（生物学系）根瘤菌在共生固氮过程中会放Ｈ２，放Ｈ２是种能量浪费．Ｅｖａｎｓ等［１］研究表明：利用具有吸氢酶活性的根瘤菌［ＨＵｐ＋］接种豆科作物能提高固氮效率、增加作物产量．豆科植物根瘤菌的...     

几株花生根瘤菌的内源质粒及其与吸氢酶关联

近年来,根瘤菌吸氢酶基因的研究取得可喜进展,豌豆根瘤菌(Rhizobium lequminosarum)的吸氢基因已证实与结瘤基因连锁共同编码于大质粒上。慢生型大豆根瘤菌(R.japonicum)的吸氢基因则由染色体编码,并进行基因结构和核苷酸序列的分析。花生根瘤菌(R.Trachis)内源质粒的存在情况未见报道。本工作以某些具有吸氢能力(Hup~+)和不具吸氢能力(Hup~-)的菌株为研究对象,采用Hirsch和倒转停顿电场凝胶电泳(FIGE)等方法,检测花生根瘤菌内源     

甘肃黄芪根瘤菌耐盐性及化学试剂和染料的抗性研究

选用67株分离自甘肃兰州地区的黄芪根瘤菌菌株,测定了供试菌对甲基蓝、甲基红、亚甲基蓝、刚果红、孔雀石绿5种染料和脱氧胆酸钠、亚硝酸钠2种化学试剂的抗性反应,及耐盐性测定.测定结果表明:黄芪根瘤菌具有较强的耐盐性,36％的菌株可以耐受5％NaCl,21％的菌株可以耐受6％NaCl;黄芪根瘤菌对两种化学药物脱氧胆酸钠和亚硝酸钠均具有极高的抗性,几乎所有菌株都能在终浓度为0.1％和0.2％的YMA培养基上生长;不同的黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性,同种黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性.     

小冠花_Coronillavaria_根瘤菌生理生化特性和共生效应的研究

小冠花根瘤菌8406、MXCV1、MXCV2.MWCV3,MXCV4等五菌株的生理生化特性研究表明:8406、MXCV1、MXCV2在YEM培养基中生长较快,代时在5小时以下;而MXCV_3;MXCV4生长较慢,代时分别为8.0和8.4小时.所有菌株在YEM培养基中产酸,对单糖、双糖、多糖等多种碳源的利用行为相似,在碳源利用时大多产酸,对抗菌素的抗性特征等都与一般快生型根瘤菌相似.菌株对有机氮源利用较好,而利用无机氮源生长较差.石蕊牛奶反应中均出现血清环、产酸或产碱,菌株在34℃以上高温均不生长,生长pH范围为6.0—8.5,菌株的耐盐能力不超过0.1mol/L NaCl.小冠花——根瘤菌共生效应表明,菌株MXCV_2的接种效果最显著,有作为优良菌株用于生产菌剂的前景.     

里氏木霉诱导合成木聚糖酶的调控

提出了两种不同用途的木聚糖酶的诱导合成方法。以里氏木霉为产酶菌,经适当处理后的玉米芯可诱导产生含纤维素酶（３．４ＩＵ／ｍＬ）的高活力木聚糖酶（５４．４ＩＵ／ｍＬ）。以混有少量纤维素的粗木聚糖作碳源,通过分批补料及对培养条件的限制性控制里氏木霉可选择性合成木聚糖酶;选择性合成程度与碳源浓度有关,当碳源浓度为１０ｇ／Ｌ时木聚糖酶和纤维素酶活力分别为３５．５ＩＵ／ｍＬ、０．２Ｕ／ｍＬ,两种酶活的比值达１７７．５。     

大豆和花生根瘤菌氢酶的研究

根瘤菌在共生固氮过程中因放H2所消耗的能量约占固所氮总能量的40%-6%。吸氢酶则能回收和利用固氮过程所放的H2,养活能量损失,从而提高共生固氮效率。在厌氧条件下,加入防止酶蛋白聚合的试剂,利用DEAE-纤维素和Sephacry S-200柱层析,从自养性大豆根瘤菌和花生根瘤菌类菌体中分离并提纯膜结合态氢酶。纯化的两种氢酶表现相近的分子特征：均含有大（60kD,65kD)、小（30kD,35kD)两个亚基,均为NiFe-氢酶,并且有较高的吸H2活性。大豆根瘤菌氢酶的纯酶组分不含Cyt b599。花生根瘤菌L8-3菌株能进行化能自养生长,诱导出高吸H2活性。根瘤菌的吸H2能明显提高固氮活性。从具有高吸H2活性的花生根瘤菌中分离并克隆吸氢基因,采用PCR和探针杂交技术,获得含有吸氢基因的质粒pZ-55。利用多种限制性内切酶构建了质粒pZ-55的物理图谱。通过三亲本杂交,将含吸氢基因的重组质粒转移到不吸H2的花生和毛豆根瘤菌中,所获得的结合株在自生和共生条件下均表达吸H2活性。以结合株接种大田花生,获得的共生根瘤的吸H2活性比接种受体株提高4倍,花生叶片和种子的含N量、产量分别提高1.7%、8.9%和9.6%。     

花生根瘤菌共生吸氢和固氮的某些特性

用花生根瘤菌某些Hup~+和Hup~-菌株作回接,有接种的植株其根瘤数比对照多。所试菌株在共生条件下表现吸氢和乙炔还原活性。离体根瘤 72 h内其吸氧活性表现起初较低,随后逐渐升高,而后又逐渐下降;但乙炔还原活性则随时间的延长逐渐下降。根瘤吸氢依赖于氧并受CO的抑制。10％外源分子氢可提高乙炔还原活性20～60％。不同生长期的吸氢和乙炔还原活性以盛花期为最高。     

香菇UGPase酶活性及转录表达水平对不同碳氮源的响应

【目的】尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 (UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase)是糖代谢途径中的关键酶,在生物体次生代谢产物合成过程中具有重要的作用,对其进行深入的研究,将有助于阐明糖代谢的分子机制。【方法】本实验以香菇新808为实验材料,设置不同的碳、氮源对香菇菌丝体进行液体发酵培养（25 °C,30天）,烘干菌丝体称取其生物量,利用苯酚-硫酸法测定菌丝体胞内多糖含量,通过荧光实时定量PCR检测不同碳氮源下菌丝体ugp基因的相对表达量,同时测定UGPase酶活性。【结果】结果表明,与普通PDA培养基比较,除以硝酸铵为氮源外,其余碳氮源均能提高香菇菌丝体生物量,其中以麦麸为碳源的生物量最大（0.63g）。以小分子糖（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）为碳源、有机复合物（麦麸和黄豆芽）为氮源时,ugp基因表达量明显上调,UGPase酶活性更高,同时,其香菇菌丝胞内多糖的含量也更高。其中分别以蔗糖为碳源,以麦麸作为氮源时,ugp基因表达量、UGPase酶活性（分别为4043.80U/mg和3873U/mg）和菌丝胞内多糖含量（分别为3.60%和3.86%）最高,ugp基因表达量分别为对照组的8.19倍和6.52倍。【结论】香菇菌丝ugp基因转录表达水平、UGPase酶活性以及菌丝胞内多糖含量三者之间显示出较高的正相关性。小分子碳源（蔗糖、麦芽糖和甘露糖）、有机氮源（麦麸和黄豆芽）有助于香菇菌丝多糖的合成,其中蔗糖和麦麸可作为香菇液体发酵优势碳源和氮源。     

花生根瘤菌转吸氢基因的研究

以ｐＲＫ２０７３为辅助质粒、通过三亲本杂交，将携带豌豆根瘤菌吸氢基因的质粒ｐＡＬ６１８转移到花生根瘤菌ＮＢ２中，通过抗性筛选、质粒检测及吸氢活性测定，获得一系列能稳定遗传的结合株，其中ＮＢ２－７，ＮＢ２－１１在自生条件下其吸氢活性为受体株的１５倍，在共生条件下其吸氢活性为受体株的２～３倍．     

重组Pichia酵母(Muts)发酵过渡阶段关键酶活分析

重组Pichia酵母表达系统的发酵存在从利用甘油为碳源生长到利用甲醇为碳源表达外源蛋白的发酵表达过渡阶段。Pichia酵母过渡阶段碳源代谢途径关键酶酶活分析表明：甲醇诱导3h AOX2酶活为0,4h时突然增加到0．05U,继续诱导,酶活缓慢增加;在过渡阶段甲醛脱氢酶和6-P-葡萄糖脱氢酶分别增加了6．1倍、2．5倍,而丙酮酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶分别下降为原酶活的29．4％及16．4％,表明甲醇诱导后甲醇完全氧化代谢途径得到强化,而糖酵解途径和三羧酸循环途径代谢作用减弱。     

纳豆激酶产生菌的固体发酵参数优化

对影响纳豆激酶产生菌固体发酵时产酶影响因子如碳源/氮源、含水量、温度、pH和培养时间等进行了优化.实验结果表明,菌株1适宜的固体发酵产酶培养基豆粕:麸皮比为3∶1;菌株2适宜的固体发酵产酶培养基豆粕:麸皮比为1∶1时产酶活性最高;菌株1适宜的培养基含水以50%最好,菌株2以70%最好;培养基初始pH均在7.0时酶活最高;发酵温度均以25℃最好,不易超过30℃;两个菌株的适宜发酵时间分别为36 h(菌株1)和72 h(菌株2).在优化发酵条件下,两个菌株单位发酵物中纤溶酶平均酶活力可分别达到1 407.25 U/g(菌株1)和953 U/g(菌株2).     

花生根瘤菌在自生条件下固氮和吸氢相关性

花生根瘤菌x_(-1)菌株在自生条件下和合适的培养基中,可诱导固氮酶及氢酶的活性,固氮酶反应产生的H_2(内源H_2)能直接诱导氢酶,氢酶活性表达的时间进程是在固氮反应之后,在外源H_2的存在下,固氮酶和氢酶则可同时表达,不同有机碳化合物对固氮酶与氢酶的影响不同,丙酮酸明显提高固氮活性,但对氨酶没有促进作用,蔗糖对固氮活性没有促进作用但对吸氢表现促进作用,分子H_2明显提高固氮活性,2.4-二硝基苯酚抑制需H_2的固氮活性,在外源H_2存在下其抑制作用更明显,铵抑制固氮酶的形成、固氮酶受铵抑制时氢酶也相应受到抑制。     

解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶培养基组成的优化

从甜酒曲中分离筛选得到1株解淀粉芽孢杆菌菌株GSBa-1,为了提高该菌株液态发酵产凝乳酶的能力,采用单因素实验和响应面法优化其产酶培养基组成。通过单因素实验分析了碳源、氮源、金属盐、磷源对菌株GSBa-1产凝乳酶的影响,并采用响应面法对产酶培养基中麦芽糖、蛋白胨和酵母浸粉含量3个主要因素的优化组合进行了定量研究,确定解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶的优化培养基组成为:麦芽糖1.93g/L、蛋白胨10.89g/L、酵母浸粉2.15g/L。在此优化培养基培养条件下,该菌株产凝乳酶活力可达(562.57±7.67)Su/mL,接近理论预测值537.10Su/mL,且平均误差为4.53%。优化后解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶活力比基础培养基提高了1.88倍。     

不同培养条件对拮抗酵母菌0732-1产生抑细菌物质的影响

研究不同培养条件对拮抗酵母菌0732-1产生抗菌物质的影响,明确0732-1产生抗菌物质的最适培养条件。以哈密瓜细菌性果斑病菌为指示菌,采用抑菌圈法测定不同培养条件下0732-1发酵液的抑菌活性。结果表明:酵母菌0732-1产生抗细菌物质(ABS)最适碳源为果糖,其次是葡萄糖;以葡萄糖为碳源时,最适氮源为硫酸铵。当酵母菌0732-1接种入PSB培养液中,培养条件为初始pH为9.0;装样量为80 mL(250 mL三角瓶);接种量为10%;培养温度20℃;培养96 h时,发酵液中ABS的抑细菌活性最强,且随着发酵液随发酵液pH值的降低而抑细菌活性增强。