转Bt棉不同生长期及不同器官杀虫蛋白表达量的免疫学方法测定

转苏云金杆菌(Bacillus thuringensis)杀虫蛋白基因棉花(下称Bt棉)在不同生长期及不同器官上对棉铃虫杀虫活性存在明显差异。目前国内普遍使用生物测试法检测Bt棉对棉铃虫的杀虫活性,但无法定量检测Bt棉中杀虫蛋白的表达量。本实验室建立的酶联免疫学测定方法(ELISA),可定量检测棉器官内杀虫蛋白的含量。它具有检测周期短,操作简便的优点。用ELISA方法检测Bt棉杀虫蛋白的含量,结果表明,棉叶和花瓣杀虫蛋白含量最高,铃和蕾次之。在棉株生长的后期,各器官杀虫蛋白的含量则有大幅度的下降。     

Bt转基因植物研究进展及其持续利用

Bt基因是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringien-sis,Bt)晶体蛋白基因的简称。它是一种广泛存在于土壤中的革兰氏阳性菌。Bt于1901年由Ishiwata首先在受病害的蚕蛾中发现,但是当时没有保存下来。1909年,Berliner从德国苏云金省的地中海粉螟上又重新分离到Bt,并正式定名为苏云金芽孢杆     

污泥-废糖蜜联合发酵培养Bt生物杀虫剂

考察了城市污泥与废糖蜜联合发酵培养苏云金芽孢杆菌（Bt）生物杀虫剂的可行性。作为污泥发酵的补充碳源,废糖蜜添加比例低于2.0%（质量比）时,对Bt的生长、代谢、晶体蛋白合成以及毒效有良好的促进作用,当添加比例高于2.0%时则表现出抑制作用。通过改变废糖蜜添加比例,获得污泥与废糖蜜的最佳配比：即在含固率为3%的污泥中添加1.5%（质量比）的废糖蜜。此配比对Bt生长代谢最为有利,活菌数与活芽孢数最大值可分别达到4.17×10⁸和3.60×10⁸CFU?mL^-1,发酵48 h后,发酵液中晶体蛋白产量约为1.96 mg?mL^-1,毒效788 IU?μL^-1,高于其他复配培养基。此外,本研究表明,晶体蛋白产量与发酵液生物毒效有显著相关性,晶体蛋白含量可作为一种简单可靠的Bt发酵性能表征指标,在Bt生产中有一定实用价值。     

杀虫微生物的研究应用方兴未艾：记全国第三届杀虫微生物学术研讨会

1990年10月17日在武汉召开了全国杀虫微生物学术研讨会,来自全国21个省市、自治区的大专院校、科研、管理、出版、生产等74个单位,200多位代表,交流了141篇论文,充分地反映了活跃在我国生物防治领域中杀虫微生物的研究和应用的新进展。其中有高层次的基础研究,例如转Bt杀虫基因的植物基因工程研究、昆虫病毒分子生物学的研究、昆虫病原细菌的致病机理的研究以     

福建小菜蛾对多位点生物杀虫毒素BtA的敏感性测定

采集福建省 7个地市的小菜蛾于室内饲养 1代 ,用浸叶法测定其 3龄幼虫对杀虫毒素 Bt A及其单体组分即苏云金芽孢杆菌 (Bt)伴孢晶体和阿维菌素 (Avermectin B1)的敏感性差异。结果表明 ,Bt A对不同来源的小菜蛾处理 4 8h的 L C5 0变化范围是 0 .80 - 4.6 7μg/ m L ,与室内种群的 L C5 0比值是 1.18- 6 .85 ,其中以福州、泉州和厦门的 LC50 比值较高。Bt的 L C50 变化范围是 2 .4 2 - 2 3.82 μg/ m L,与室内种群的 L C50 比值是 1.2 2 - 11.97,其中以福州、莆田和厦门的抗性较高。阿维菌素的 LC50 变化范围是 0 .6 6 - 2 .0 0 μg/ m L,与室内种群的 LC50 比值是 1.5 8- 4.70 ,其中福州、莆田和南平的抗性较高。不同地区小菜蛾的繁殖力则无显著差异 ,均在 2 2 0粒 /雌左右。     

ABAMECTIN与Bt制剂复配的杀虫增效作用

以菜青虫为试虫测定abamectin与Bt8010复配的毒力。结果表明abamectin—Bt8010的5种不同配比均有不同程度的增效作用,其中以5000IUBt8010+0.1％abamectin的增效作用最为显著,其共毒系数为289.4.室内药效测定结果,用该配比制成的可湿性粉剂对花椰菜、白菜、番茄、豌豆、蚕豆、茶树、柑桔、马尾松8种植物上分属鳞翅目、同翅目、鞘翅目、双翅目和蜱螨目的23种害虫有较好的杀灭效果。混配制剂对鳞翅目幼虫仅能提高用药24h后的杀灭率,并不能提高24h内的杀灭速度。     

几种植物有效成分的提取及杀虫活性研究

对10种植物的有效成分进行了提取,通过对提取物的抑菌试验和杀虫活性试验,筛选出3种较好的Bt菌混剂候选复配植物,还对其中最具开发价值的植物砂地柏进行了不同有机溶剂提取物杀虫活性的比较试验,并确定了石油醚为最佳提取溶剂。     

抗虫基因Bt的研究进展

植物抗虫基因为防治农业害虫提供了一条崭新途径。而Bt基因的应用最普遍，对Bt基因的作用机理、分类、应用及可行性改造等方面作了详尽的阐述，着重分析和探讨了目前抗虫基因Bt植物转基因育种中存在的一些问题。并就这些问题及如何合理持续利用Bt基因进行了探讨。     

转基因抗虫是怎么回事?

<正>将一种细菌体内的抗虫基因,通过生物技术的手段转入植物体内表达,就能让植物得到抗虫性状,免受特定害虫的侵扰。这种抗虫基因是哪里来的,如何发挥出作用的?到底对人体有没有害处呢?苏云金芽胞杆菌(又称苏云金杆菌,Bacillus thuringiensis),简称Bt,是一类可产生芽胞的革兰氏阳性细菌。Bt被广泛用于农业,特别是有机农业,以及转基因农业。它们广泛分布于世界各地的土壤、尘埃中,无论在海滩、沙漠还是冻土带,均有它们的活动踪迹。当周围环境中的营养物质缺乏的时候,营养期的Bt就开始形成芽胞,并在体内产生伴胞晶体。这种晶体主要由被称为"Cry内毒素"的蛋白质组成;而Cry内毒素,则得名于英文Crystal(晶体)的字头"Cry"。     

Bt9601防治棉叶螨试验初探

用Bt9601200倍，300倍液对棉叶螨防治试验表明，Bt9601200倍液对棉叶螨防治效果好，防效为95.95％。     

杀虫防菌Bt工程菌的构建

N-乙酰高丝氨酸内酯（N-acyl-homoserine lactones,AHLs）是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,能够调控许多植物病原菌的致病基因的表达,但如果内酯酶将其水解,则会影响病原菌的致病活性,植物就不会染病。苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）,作为生物杀虫剂已有多年使用的历史,本研究通过生物技术手段成功地构建了携带信号分子AHL水解酶基因的穿梭载体pHTss10304,并转入到具有Bt中,构建成工程菌Bt24、工程菌Bt33、工程菌Bt34和工程菌Bt36。通过设计,实现了Bt工程菌的多功能改造,为BT工程菌的应用提供了更为广阔的空间,为生物防治菌的开发现有菌剂提供了新的思路。     

牛奶中苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定

采用醋酸钠．抗生素分离法对超市牛奶样品进行苏云金芽胞杆菌（Bacillus thurgngiensis,Bt）的分离,获得2株Bt菌株,分别命名为BtBRC—LJ1和BtBRC-LJ2。利用PCR方法对Bt BRC-LJ1和BtB RC-LJ2菌株幼皿和nheC肠毒素基因的分布进行检测。结果显示,这2个菌株均含有这两种肠毒素基因。     

细菌（Bt）杀虫剂火箭抛撒剂型生物活性的研究

以微型弹道火箭筒为发射器,将细菌（Bt )杀虫剂装入弹头,然后发射到指定的空间,瞬间破,安全防火,并定向、定点地抛撒到防治目标上,以达到防治害虫的目的。从抛撒前后对Bt的活芽孢进行测试,其结果表明前后芽孢存活率未见变化;对火箭抛撒前后Bt菌粉生物活性的研究证明,细菌（Bt )杀虫剂采用火箭抛撒剂型是可行的,实验证明经改良后的Bt菌粉用火箭抛撒,对其生物活性不但不产生不良影响,而且还具有保护和提高作用的效果。     

Insecticidal activity of residual Bt protein at the second trophic level

Since the first commercial release of transgenic crop expressing genes from Bacillus thuringiensis (Bt), there have been concerns about its potential impact on the environment. Research has focused on the ecological effects from second exposure to Bt prot…     

Inheritance of resistance to Helicoverpa armigera of 3 kinds of transgenic Bt strains available in upland cotton in China

There are 3 kinds of transgenic Bt strains, Shanxi 94-24, Zhongxin 94, and R19, in upland cotton in China. Their transgenic Bt insect-resistance cultivars or hybrids have been developed and grown by farmers. Genetic studies indicate that the resistance of the 3 transgenic Bt cotton strains to Helicoverpa armigera is controlled by one pair of non-allelic dominant genes. Linkage relationship between the resistant genes of R19 and Shanxi 94-24 transgenic Bt strains shows that they may be inserted in the same chromosome. F₁ hybrids crossed among the 3 strains show that high levels of protection from feeding damage are the same as that of their parents. Therefore, there is no co-suppression phenomenon in many transgenic plants. The results presented here afford a fundamental reliance in developing transgenic Bt insect-resistant cultivars and exploiting the heterosis of hybrids in upland cotton.     

添加剂对苏云金杆菌杀虫效果的影响

定了碱性、酸性和中性化合物及蛋白质助溶剂和芳香族化合物等 5类物质对 Bt杀虫效果影响 ,结果表明有 30种物质能促进 Bt杀小菜蛾的效果 ,其中碱性物质 11种 ,酸性物质 3种 ,中性盐 8种 ,蛋白质助溶剂5种 ,芳香族化合物 3种。在各类不同的化合物中以硼酸和 K2 CO3 对 Bt杀虫效果的促进作用较强。     

种植转Bt水稻对固氦细菌多样性和固氮酶铁蛋白基因nifH的水平转移的影响

通过对具有不同种植年限和不同种植强度的转Bt基因水稻与非转Bt基因水稻土壤中的细菌以及固氮细菌群落结构进行研究,发现转Bt水稻的种植可能会影响土壤中微生物群落的多样性,但是这种影响的可能只是暂时的,通过对测量种植水稻的芽长实验也得出相似的结论．另外,根据16SrDNA基因构建的系统发育进化树揭示了本实验分离的固氮细菌的遗传多样性,发现实验土壤中的固氮细菌主要分为放线菌门（Actinobacteria）（92％）和α-变形菌门（α-Pro—teobacteria）两大类．分离出的8株典型的固氮菌株,其16SrDNA基因和固氮基因nifH的序列两者的分布不一致,nifH的分布更为紧凑,为固氮基因可能发生了原位水平基因转移提供了证据．     

苏云金杆菌菌体保护剂和增效剂的筛选

生物测定结果表明，Ｂｔ菌液添加苋菜红染料抗紫外线能力最强，蚕蛹粉、苏丹黑染料次之。苋菜红染料的保护作用极显著地强于蚕蛹粉以及苏丹黑。ｗ＝０．０２５％敌百虫对Ｂｔ菌液有明显的增效作用，两者混合后的杀虫率比单剂提高３０％。乙酰甲胺磷对Ｂｔ无增效作用。