遵义市习水县虫草属药用真菌的菌株分离与鉴定

目的:对遵义习水县虫草属药用真菌的菌株进行分离与鉴定，为进一步开发利用虫草奠定基础。方法:以遵义习水县所采集到的虫草属子实体为研究对象，采用组织分离法分离虫草菌株并纯化，ITS基因序列鉴定结合子实体标本鉴定分离的纯培养物。结果:从遵义习水共得到6株虫草属药用真菌菌株，编号56b-1、SW57b两株菌株为高雄山虫草(Cordyceps takaomontana Yakush.&Kumaz);编号67、CZ270、SL215三株菌株为蝉花(Cordyceps cicadae(Miq.)Massee);编号SL219为爪哇虫草(Cordyceps javanica(Bally)Kepler, B.Shrestha&Spatafora)。结论:遵义习水县野生虫草属药用真菌资源丰富。     

高效液相和红外光谱法分析检测培养基残基中的虫草素

用高效液相HPLC和红外线光谱法IR鉴定蛹虫草培养基残基中的虫草素,结果表明,HPLC检测波长为259 nm,梯度洗脱程序:0～20 min,2%～100%甲醇,流速为1 mL/min,进样量20μL,线性关系良好,保留时间为9.1 min。用红外光谱仪在4 000～450 cm~(-1)范围内扫描虫草素结晶体,所测晶体具备的官能团与虫草素的相一致,实验所得出的结晶物结构与虫草素结构相符。结论:本检测方法能确保虫草素分离提取的质量。     

虫草中两种核苷类活性成分的毛细管电泳研究

虫草素和腺苷是虫草属药用真菌的主要核苷类活性成分，以往多用薄层扫描和高压液相法进行分离。本文建立了毛细管区带电泳分离测定虫草素和腺苷的分析方法，并测定了四种不同的虫草中虫草素和腺苷的含量及不同提取时间对虫草素和腺苷含量的影响。首次报道了九州虫草中虫草素的存在。采用0.025mol/L的硼砂（pH9.4）作为缓冲液，在电压为20kV和检测波长为258nm的条件下，4种虫草水提液是的虫草素和腺苷获得了基线分离，并具有良好的精密度和重现性。同时发现蒙山九州虫草中虫草素的含量甚高，具有良好的药用前景。     

北虫草培养残基中虫草素的提取纯化及抗肿瘤活性

以北虫草固体培养残基为实验材料,比较闪式提取、超声波提取和超高压提取培养残基中虫草素的效果,用陶瓷膜过滤提取液,获得虫草素粗提液,利用高速逆流色谱分离制备虫草素,通过LC-MS/MS对产物结构进行鉴定,并验证了虫草素对小鼠S180肉瘤的抑制作用。结果显示,超高压提取培养基中虫草素较好,高速逆流色谱分离纯化条件是以V(乙酸乙酯)∶V(正丁醇)∶V(水)=2∶3∶5的两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速3.0mL/min,主机转速900r/min,分离温度28℃,以此分离条件经一步洗脱,高速逆流色谱收集馏分,其中峰Ⅲ产物经HPLC检测纯度达97.6%,结构经LC-MS/MS鉴定为虫草素。从100g北虫草培养残基中可制备得虫草素181.90mg,并对其活性验证发现剂量为100mg/kg时小鼠S180肉瘤瘤重抑制率为64.48%。     

亚香棒虫草菌的纯培养分离和鉴定

亚香棒虫草(Cordyceps hawkesii Gray)的活体材料采自湖南省桃江县。用虫草的虫体、菌柄、子座、及子囊孢子进行了纯培养分离,结果获得了分生孢子阶段的真菌的纯培养物。经鉴定分离到的菌体为亚香棒虫草的无性阶段。亚香棒虫草的寄主昆虫为蝙蝠蛾科的湖南棒蝠蛾(Napialus hunanensis)。     

虫草属真菌经植物环节"宿主跳跃"的初步研究

从酿酒葡萄(Vitis vinifera L.)和番荔枝(Annona squamosa L.)中分离并鉴定两株植物内生来源的虫草属真菌和一株拟青霉,并就已知昆虫、块菌来源的虫草属真菌ITS分子序列建立了在不同宿主体内的虫草属真菌系统发育树,重现了其物种在协同进化历程中在不同宿主体内发育的现象.发现虫草属真菌在进化过程中除了昆虫与块菌外可能还经由植物的"宿主跳跃"环节.     

蛹虫草虫草素和虫草多糖综合提取工艺的研究

蛹虫草（Cordyceps militaris）在我国本草文献中已有记载。近年来的研究更进一步证实了蛹虫草与冬虫夏草C.sinensis有相同或相似的化学成分和药理作用,是可供开发的新产品,并可以之作为冬虫夏草的替代品。现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值,而且有明显的药用价值。其中尤以虫草素、虫草多糖等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质,对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录 mRNA过程中使mRNA成熟障碍,抑制癌细胞的生长。并有降血糖的作用。虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖,它能促进淋巴细胞转化,提高血清1gG的抗体含量和机体的免疫功能,增强机体自身抗癌抑癌的能力。因此分离纯化虫草素和虫草多糖,对此类抗癌药物的开发具有很大社会价值和意义。本次研究以蛹虫草粉末为原料,研究了蛹虫草中虫草素和虫草多糖的综合提取工艺技术,探讨了采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法,选择虫草素和虫草多糖的最优提取办法。并通过用正交试验方法研究考察了水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素和虫草多糖综合提取效率的影响。建立了从蛹虫草中综合提取虫草素和虫草多糖的最佳工艺。采用正交试验对蛹虫草中虫草素和虫草多糖综合提取工艺进行了研究,为进一步开发利用提供有价值的参考数据,也将会对今后产品开发研究具有重要的意义。     

阳离子交换树脂吸附虫草素的热力学分析

研究了732阳离子交换树脂(001×7)对虫草素的吸附热力学特性.在所考察的温度和浓度范围内,001×7对虫草素吸附平衡数据符合Freundlich吸附等温方程,且为优惠型吸附.测试了虫草素在001×7上的吸附焓、自由能和吸附熵,结果表明吸附是吸热过程;并对虫草素的吸附行为作了合理解释,进一步通过虫草素的穿透曲线验证了虫草素吸附热力学结论.     

甘肃华亭产香棒虫草与冬虫夏草重金属及有害元素比较分析

甘肃香棒虫草是华亭关山古代铜矿周围发现的一种虫草,测定它所含重金属及有害元素。采用电感耦合等离子体质谱法检测香棒虫草中铅、镉、砷、汞、铜等元素,并与冬虫夏草比较。从二种虫草母座虫体所食食物,生长环境进行原因分析,提出开发利用的建议。甘肃华亭产香棒虫草与冬虫夏草所含重金属及有害元素相似。     

蛹虫草发酵产物新纤溶酶的分离纯化

笔者所在项目组的前期研究发现,蛹虫草深层培养可以产生至少两种纤溶酶.基于此,文中对蛹虫草深层培养产生的纤溶酶的分离纯化展开了研究.采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose FF弱阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶色谱对纤溶酶进行分离.最终纯化后的纤溶酶Ⅰ比活力达1467.44U/mg,纯化倍数为36.07,回收率为5.79%.纤溶酶Ⅱ比活力达1681.58U/mg,纯化倍数为41.33,回收率为4.00%.两种纤溶酶经电泳鉴定均达到电泳纯,相对分子质量分别约为28000和32000.     

蛹虫草菌株选育及产业化生产技术:蛹虫草生产的新途径

省微生物所研发的蛹虫草菌株选育及产业化生产技术应用研究项目属于农业技术领域的研究范畴。项目广泛收集蛹虫草出发菌株,进行遗传差异分析和优质高产、抗逆及耐高温型菌株选育;筛选富硒培养基及富硒蛹虫草栽培技术研     

冬虫夏草菌及其茵丝体的研究进展

着重介绍了冬虫夏草茵的分离、液体发酵培养以及药理研究,为今后虫草茵及其发酵菌丝体的研究奠定了良好的基础.     

冬虫夏草菌及其菌丝体的研究进展

着重介绍了冬虫夏草菌的分离、液体发酵培养以及药理研究,为今后虫草菌及其发酵菌丝体的研究奠定了良好的基础。     

虫草菌多糖的部分理化性质研究

固体发酵虫草菌拟青霉(Paecilomycesmilitaris),分离提纯得糖含量为56%的虫草菌多糖,经薄层层析、气相色谱分析组成单糖分别为:阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,物质的量的比为1∶2∶1∶3∶3,与有关文献报道的均有不同.经SephadexG-75凝胶柱分离纯化得糖含量为72%的主峰和一小峰2组分;用Sepharose4B凝胶柱测定分子量分别为57000和40000.     

RP-HPLC定量检测蛹虫草培养基中活性成分

建立一种反向高效液相色谱法定量检测蛹虫草培养基中活性成分腺苷含量和虫草素含量的方法.色谱柱为Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:0.02 mol/L KH2PO4∶甲醇(体积比85∶15)溶液;流速:1.0 mL/min;检测波长:260 nm.腺苷的线性测量范围为0.5~100μg/mL(R=0.999 9),平均回收率为105.3%,标准品RSD=0.76%(n=5),样品RSD=1.87%(n=5);虫草素的线性测量范围为0.5~100μg/mL(R=0.999 9),平均回收率为104.0%,标准品RSD=0.95%,样品RSD=1.23%.本测定方法线性范围宽、分离度好、具有良好精密度,可定量、准确分析不同蛹虫草培养基中活性成分腺苷和虫草素含量.     

甘肃虫草及其人工培养菌丝体的比较研究

就甘肃省甘南藏族自治州所产虫草———甘肃虫草（Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｇａｎｓｕｅｎｓｉｓ）和其人工培养菌丝体的主要化学成分及红外、紫外光谱进行了比较．结果显示,两者的氨基酸、微量元素等主要化学成分相同、含量相近;红外及紫外吸收光谱一致．     

冬虫夏草显微结构再观察和子囊孢子发育研究

经过对冬虫夏草模式标本,来自不同地区包括尼泊尔和不丹的冬虫夏草标本以及类似冬虫夏草的甘肃虫草,阔孢虫草,多虫草和尼泊尔虫草等标本或模式的形态学和子囊孢子发育生理学的研究,证明尼泊尔和多技虫草均为冬虫夏草的同物异名。阔孢虫草和甘肃虫草也可能是冬虫夏草的同物异名。     

冬虫夏草显微结构再观察和子囊孢子发育研究

经过对冬虫夏草模式标本，来自不同地区包括尼泊尔和不丹的冬虫夏草标本以及类似冬虫夏草的甘肃虫草，阔孢虫草，多虫草和尼泊尔虫草等标本或模式的形态学和子囊孢子发育生理学的研究，证明尼泊尔和多技虫草均为冬虫夏草的同物异名。阔孢虫草和甘肃虫草也可能是冬虫夏草的同物异名。     

冬虫夏草显微结构再观察和子囊孢子发育研究

经过对冬虫夏草模式标本,来自不同地区包括尼泊尔和不丹的冬虫夏草标本以及类似冬虫夏草的甘肃虫草,阔孢虫草,多虫草和尼泊尔虫草等标本或模式的形态学和子囊孢子发育生理学的研究,证明尼泊尔和多技虫草均为冬虫夏草的同物异名.阔孢虫草和甘肃虫草也可能是冬虫夏草的同物异名.     

野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基作用的对比研究

采用分光光度法对野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基的作用进行对比 .结果表明培植蛹虫草子座对·OH自由基的清除能力丝毫不弱于野生蛹虫草子座 ,而培植蛹虫草发酵菌丝体对·OH自由基的清除能力要高于野生蛹虫草 .