SHR肾脏组织肌球蛋白轻链磷酸酶水平的研究

通过比较12周龄的自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）及其对照组Wistar Kyoto（WKY）肾脏组织的MLCP的130、38、21kD三个亚单位含量差异,探讨肾脏组织MLCP与SHR高血压病理机制之间的关系。在4℃的环境下,取SHR与WKY大鼠各10只断头处死,迅速取其肾脏,称重速冻后将血管磨成匀浆,置于缓冲液中并通过离心提取蛋白质,校正两组总蛋白的浓度后,分别应用SDS-PAGE、Western印迹杂交和化学发光的方法测定SHR与WKY肾脏组织MLCP的130、38、21kD三个亚单位的含量,对显影结果进一步进行吸光度扫描分析。进行两组间,t检验。发现SHR和WKY大鼠肾脏组织MLCP的130、38和21kD三个亚单位的含量有着明显的差异,SHR的MLCP38和21kD亚单位的含量明显低于WKY大鼠（p〈0·01）,SHR的MLCP130kD亚单位含量则高于WKY大鼠（p〈0·05）。提示肾脏组织MLCP结构或功能的异常可能与SHR高血压的病理机制有关。     

四种啮齿类实验动物模型品系的介绍

摘要: 为预防和治疗高血压等心血管疾病,许多实验动物模型被研究和开发。本文介绍了与高血压症相关的4 个 大鼠模型品系,即自发性高血压大鼠( SHR) 、魏－ 凯二氏大鼠( WKY) 、Dahl 盐敏感性大鼠( DSS) 和SS-13BN大鼠。     

SHR血压升高前后心肾脑VEGF的变化

运用免疫组化SP法及计算机图像分析技术,对SHR大鼠幼年(6周,n=15)、成年(12月,n=15),以及正常血压对照组大鼠京都Wistar(Wistar-Kyoto,WKY)幼年(6周,n=10)、成年(12月,n=10),4组大鼠心肌、肾脏、大脑切片VEF蛋白的表达水平进行了定量分析;探讨了自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensiverat,SHR)血压升高前后心肌、肾脏、脑内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的变化及其意义;发现在4组大鼠心脏各部、肾小球内、大脑皮质等处均观察到散在分布的VEGF免疫反应阳性细胞,阳性反应物呈棕色颗粒状,位于胞浆中。12月龄SHR组表达水平较其它三组均高(P<0.05),阳性细胞数多且灰度值低(P<0.05);而6周龄、12月龄WKY及6周龄SHR三组间表达水平差异无显著性(P>0.05)。结果表明随着成年SHR大鼠血压的升高,心肌、肾脏、脑内VEGF蛋白的表达水平上调,可能是对高血压所致的靶器官缺血缺氧的一种代偿反应,对微血管的新生和存活有积极意义。     

瑞芬太尼激活BK_(Ca)通道对大鼠离体脑基底动脉起舒张作用

本文为观察瑞芬太尼对自发性高血压大鼠及Wistar-Kyoto大鼠离体脑基底动脉的作用,并探讨其作用机制。在急性分离的大鼠脑基底动脉上,应用压力肌动图技术,观察不同浓度RMF(10-10-10-5mol/L)对内皮非依赖的血管收缩剂苯肾上腺素预收缩的血管直径的变化,并作出比较。结果显示,RMF呈浓度依赖性舒张SHR及WKY大鼠脑基底动脉P0.05,n=5);在相同浓度下,与WKY大鼠相比,RMF对SHR脑基底动脉舒张作用较弱(P0.05,n=5);预灌流10-3mol/L的BKCa通道阻断剂四乙胺后,不同浓度的RMF对SHR及WKY大鼠脑基底动脉的舒张幅度减小,拟合曲线下移,且具有统计学差异(P0.05,n=6-7)。由此可知:RMF可能是通过激活BKCa通道呈浓度依赖性舒张大鼠脑基底动脉,且RMF对SHR脑基底动脉的舒张反应弱于WKY大鼠。     

芦丁在大鼠体内的代谢产物鉴定与代谢途径分析

分析大鼠口服芦丁后血浆、尿液和粪便中的代谢产物并评价芦丁在大鼠体内的代谢途径。大鼠灌胃给予250 mg/kg芦丁后，采集血浆、尿液和粪便，以固相萃取法处理生物样品，利用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱质谱，以0.05%甲酸水(A)-0.05%甲酸乙腈(B)为流动相梯度洗脱，分别在正、负离子模式下采集各样品数据，通过高分辨提取离子流图和平行反应监测模式，结合色谱保留时间、质量测量、诊断离子等确定芦丁的代谢物并探究芦丁在大鼠体内的代谢途径。在正、负离子模式下共检测和鉴定了29种芦丁代谢产物，其主要代谢途径为甲基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化及其复合反应等。建立了芦丁的整体代谢图谱，为其进一步的药效学评价及开发利用提供了参考依据，同时也为药物代谢鉴定研究提供了一种综合研究方法。     

游泳运动改善幼年自发性高血压大鼠腓肠肌微血管稀少的作用及机制

通过构建长期有氧运动模型,明确游泳运动对幼年自发性高血压大鼠腓肠肌微血管稀少的作用并探讨其机制。采用4周龄雄性大鼠,分为3组:对照组(WKY)、自发性高血压组(SHR)及高血压运动组(SE)。HE染色观察腓肠肌微血管密度、微血管数目与肌细胞数目的比值及肌纤维横截面积的变化,运用免疫组化方法和Western Blot方法检测各组大鼠腓肠肌中VEGF、eNOS、PI3K、Akt的蛋白表达。实验发现:与WKY组相比,SHR组腓肠肌中微血管密度、微血管数目与骨骼肌细胞数目的比值、肌纤维横截面积、腓肠肌总蛋白含量明显减少(P0.01);8周游泳训练之后,SE组与SHR组相比,各项指标明显增加(P0.01)。免疫组化和Western Blot实验结果显示:与WKY组相比,SHR腓肠肌中的VEGF、PI3K、Akt、eNOS表达明显下降,SE组腓肠肌中VEGF、PI3K、Akt、eNOS蛋白表达与SHR相比均有明显增加;游泳运动增加了SHR腓肠肌中VEGF、PI3K、Akt、eNOS的蛋白表达。有氧运动可以改善幼年自发性高血压大鼠腓肠肌中微细血管稀少的现象,其机制与运动增加VEGF及eNOS的表达及上调PI3K/Akt信号通路有关。     

代谢组学方法鉴定大黄对高脂血症大鼠的治疗作用尿液生物标示物

基于超高压液相色谱-高清质谱联用(UHPLC-HDMS)的代谢组学方法鉴定大黄对高脂食料诱导的高脂血症大鼠尿液生物标示物。UHPLC-HDMS方法测定正常对照组、高脂血症组和高脂血症+大黄组尿液,采用Marker Lynx软件处理质谱数据,偏最小二乘判别分析法分析3组之间的代谢物谱差异,并通过载荷图选择生物标示物,通过精确分子量、MSE信息和同位素分布,再利用HMDB等数据库对潜在的生物标示物进行鉴定。鉴定了10个生物标示物,高脂血症显示上调的硬脂酸酰胺、3-甲基尿苷、油酸酰胺和吲哚-3-甲酸,同时下调的3-氧-甲基多巴、甲基十三烷酸、S-半胱氨酸琥珀酸、脯氨酸、苯丙氨酸和植物鞘氨醇。高脂食料诱导的高脂血症干扰了脂肪酸和氨基酸的代谢。大黄逆转了上调和下调的高脂血症大鼠内源性代谢产物并改善了脂肪酸和氨基酸的代谢异常。基于UPLC-HDMS的代谢组学法能够应用于高脂血症及大黄对其的治疗作用研究。     

化瘀清利合剂对自发性高血压大鼠血液流变学的影响

目的观察化瘀清利合剂对自发性高血压大鼠(SHR)血液流变学的影响。方法选用自发性高血压大鼠，测定给药后模型动物血液流变学。结果化瘀清利合剂治疗大、中剂量组均有降低全血粘度和血浆粘度的作用，在降低低切变率血粘度时呈量效关系；治疗大、中剂量组可改善红细胞的变形能力、降低红细胞刚性指数和聚集指数。结论化瘀清利合剂可改善SHR血液流变学，对高血压大鼠有一定的保护作用。     

阿尔茨海默病异常黑胆质病证结合大鼠模型血清代谢组学研究

为研究阿尔茨海默病(AD)异常黑胆质病证结合大鼠模型血清代谢物的变化,利用代谢组学核磁共振(NMR)技术,根据维吾尔医学理论,采用多因素复合作用建立异常黑胆质证载体动物模型后再予以聚集态Aβ1-40双海马定向注射制备AD异常黑胆质病证结合大鼠模型,收集各组大鼠血清,利用核磁共振波谱(1H-NMR)技术测定核磁共振氢谱,建立模型大鼠血清的代谢指纹谱,运用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)法和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法分析研究各组大鼠血清中代谢产物差异。OPLS-DA分析结果显示,各组血清多种代谢组份有显著性差异,单纯痴呆组大鼠血浆中乳酸、糖蛋白、丙酮、极低密度脂蛋白(VLDL)、甲酸和不饱和脂类的含量增加,丙二酸的含量降低;异常黑胆质证组大鼠血清中糖蛋白和β-葡萄糖的含量增多,缬氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸和1-甲基组氨酸的含量降低;AD异常黑胆质病证结合组大鼠血浆中的不饱和脂类含量增加,甘氨酸、苯丙氨酸、1-甲基组氨酸、蛋氨酸、丙二酸及β-葡萄糖的含量降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.05);与单纯痴呆组大鼠组比较,异常黑胆质证组大鼠血浆中的亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、酪氨酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、肉碱、柠檬酸和不饱和脂类的含量降低。AD异常黑胆质病证结合组大鼠血浆中丙氨酸和丙酮的含量降低,β-葡萄糖和肌酸的含量增加,差异有统计学意义(P0.05);与异常黑胆质证组比较,AD异常黑胆质病证结合组大鼠血浆中α-葡萄糖、β-葡萄糖、肉碱和柠檬酸的含量增加,差异有统计学意义(P0.05)。由此得出,异常黑胆质证与AD的发生、发展有一定的关联性和协同促进作用,AD异常黑胆质病证结合大鼠模型体内糖代谢紊乱和能量代谢障碍,与单纯痴呆模型及异常黑胆质证模型比较,代谢产物及代谢途径在病变过程中发生了演变,AD异常黑胆质病证结合大鼠模型的代谢变化更为复杂。     

健心颗粒对慢性心衰大鼠循环RAAS系统的影响

目的:主要探讨健心颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)慢性心力衰竭(HF)时循环肾素一血管紧张素系统(RAAS)系统的作用及机理。方法:观察健心颗粒对15周龄SHR大鼠血浆醛固酮(ALD)及紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。结果:健心颗粒能显著降低各剂量组的循环ALD、AngⅡ水平。结论:健心颗粒作用于循环RAAS系统,改善SHR大鼠的ALD、AngⅡ水平,进而抑制心肌肥大,逆转心室重构。     

自发性高血压大鼠血清脂联素水平与左室舒张功能的关系

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)血清脂联素水平与左室舒张功能的关系.方法:6月龄雄性SHR和Wistar大鼠各10只.采用酶联免疫吸附方法测定血清脂联素水平,小动物高频超声检测仪通过二尖瓣血流频谱多普勒和组织多普勒技术测定左室舒张功能各项指标.结果:血清脂联素水平SHR显著低于Wistar大鼠[(11.18±0.37)、(13.43±0.58);P0.01];E/A和E'/A'SHR显著低于Wistar大鼠[E/A:(2.21±0.23)、(2.77±0.24);P0.01和E'/A':(0.56±0.13)、(1.46±0.11);P0.01];E/E'SHR显著高于Wistar大鼠[(30.17±1.78)、(21.15±1.44);P0.01];DT和IVRT两组比较无统计学差异.SHR血清脂联素水平与E/A、E'/A'呈显著正相关(r=0.828,P=0.003;r=0.720,P=0.019),与E/E'呈显著负相关(r=-0.845,P=0.002).多元逐步回归分析表明血清脂联素水平能分别进入以E/A、E'/A'和E/E'为应变量的回归方程中.结论:血清脂联素水平与左室舒张功能超声指标显著相关,其水平降低可能是导致高血压左室舒张功能不全的危险因素之一.     

鞘氨醇单胞菌对微囊藻毒素-RR的降解作用与影响因素分析

为探索微囊藻毒素微生物降解机制,研究了鞘氨醇单胞菌对微囊藻毒素-RR(MC-RR)的降解作用与影响因素.通过色谱及质谱方法阐明了鞘氨醇单胞菌对MC-RR的降解能力及途径,结合实时荧光定量聚合酶链式反应技术和酶活性分析探究了反应温度、营养基质及同类毒素(微囊藻毒素-LR,MC-LR)的影响及机制.结果 表明:鞘氨醇单胞菌对MC-RR的最高降解速率达0.29 mg/(L·h),降解产物分别为C49 H77 N13 O13 C32 H47 N4 O8、C12H19N3O6和C20 H29 NO3;温度影响酶MlrA活性,在20～40℃范围内最适温度为30℃;提高磷质量浓度(100 mg/L K2 HPO4)可刺激mlrA基因表达,使降解速率增加27.59％;提高碳质量浓度(100 mg/L葡萄糖)将抑制mlrA表达,使降解速率下降86.71％;MC-LR和MC-RR竞争性结合MlrA,使MC-RR降解速率下降4.44％.鞘氨醇单胞菌对MC-RR的降解能力较强,并受到温度、营养基质及MC-LR浓度的影响.     

大鼠口服灌胃腰痛宁粉的药物代谢动力学

采用高效液相色谱(HPLC)技术检测大鼠血浆中马钱子碱和士的宁的血药浓度,并研究了大鼠口服灌胃腰痛宁粉悬浊液后的药物代谢动力学行为。结果显示:不同质控浓度马钱子碱和士的宁的回收率均高于60%,日内及日间精密度相对标准偏差(RSD)均低于15%,稳定性及线性关系良好,满足生物样品定量分析要求;大鼠单剂量(800mg/kg)灌胃给予(intragastric administration)腰痛宁后,马钱子碱和士的宁的代谢均符合二室开放模型;与士的宁相比,马钱子碱吸收较慢,消除较快,生物利用度较低。本法简便快捷、专属性强、结果准确,适于腰痛宁的药物代谢动力学行为研究。     

糖尿病动物模型研究进展(一)自发高血压——NIH肥胖大鼠

<正> 一、引言自发高血压——NIH肥胖大鼠品系(SHR/N—cp)是新培育的一个用于肥胖症和糖尿病研究的遗传动物模型。肥胖大鼠表现出的代谢和组织病理学特征与人的非胰岛素依赖性糖尿病(Ⅱ型)相似。这是唯一的雌雄性都显示不耐葡萄糖的啮齿动物模型。 SHR/N-cp品系是美国国家健康动物遗传资源研究所培育的用于肥胖症研究的两     

2-APB对自发性高血压大鼠脑微动脉平滑肌细胞缝隙连接的影响

为探讨正常血压Wistar大鼠(Wistar rat,WR)和自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive rat,SHR)脑微动脉段平滑肌细胞电生理学及偶联力的异同,并观察2-氨基乙基二苯硼酸酯(2-Aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)对脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接的影响。应用全细胞膜片钳技术方法,观察2-APB对WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞膜电容(Cinput)、膜电导(Ginput)和膜电阻(Rinput)的影响。结果显示,(1)SHR收缩压明显高于正常WR,差异有统计学意义(P0.01)。(2)SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput高于WR,差异有统计学意义(P0.05)。(3)2-APB可以浓度依赖性的降低脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput和Ginput(或者增加Rinput)。(4)2-APB抑制WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞Ginput的IC50分别为0.21μmol/L和0.83μmol/L,差异有统计学意义(P0.05)。(5)2-APB浓度≥100μmol/L时,WR和SHR脑微动脉段上平滑肌细胞的Cinput、Ginput或Rinput与单个平滑肌细胞十分接近。由此可知,SHR较WR脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接耦联力增强,2-APB可以浓度依赖地抑制WR和SHR脑微动脉平滑肌细胞间缝隙连接,且对SHR的抑制效力较强。     

中国软珊瑚化学成分的研究(二十一)——戚氏豆荚软珊瑚(Lobophytum chevalieri Tixie Duriult)的化学成分

从软珊瑚戚氏豆荚(Lobophyium chevalieri)分离得15种结晶性物质。本文报道2个神经酰胺类化合物,其中Δ~(4’5)(E),Δ~(11’12)(Z)-鞘氨醇-正十六碳酸酰胺(Lobophyta-mide L_8)为一新化合物,另一个为Δ~(11’12)(E)-鞘氨醇-正二十四碳酸酰胺(Lobophytami-de L_5),经IR、MS、~1H和~(13)C NMR谱分析、元素分析以及其他方法确定了它们的结构。     

海绵Steletatenuis（Lindgren）的化学成分研究

报道从中国南海星骨海绵Ｓｔｅｌｅｔａｔｅｎｕｉｓ（Ｌｉｎｄｇｒｅｎ）中分离得到的两个次级代谢产物１和２．经光谱数据分析鉴定１为一种新的Ｎ－酰基神经鞘氨醇；２为一饱和的酰胺     

芒果苷对自发性高血压大鼠心脑肾组织形态学的影响

观察芒果苷对自发性高血压模型大鼠心、脑、肾等组织形态学特别是炎症损伤的影响,以自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,随机分为模型组、芒果苷高剂量组、芒果苷中剂量组、芒果苷低剂量组和苯那普利组,再以同龄的WKY大鼠作为正常对照。利用光镜、透射电镜观察各组大鼠的心、脑、肾等组织的形态结构。光镜结果显示:脑组织形态学未见明显改变,芒果苷高、中、低剂量组可以改善心肌炎细胞浸润及肾小球萎缩,坏死等。电镜结果显示:芒果苷可以抑制心肌细胞凋亡,改善肌原纤维排列,消除线粒体肿胀,降低系膜细胞及基底膜厚度。说明芒果苷对自发性高血压大鼠心、肾组织形态学具有改善作用,包括对炎症损伤的保护。     

生物酶洗毛鞘氨醇杆菌Sphingobacteium sp.的筛选与表征

 羊毛纤维材料初加工普遍采用表面活性剂和无机盐作用的化学方法,此方法需要在较高温度和较强机械作用下进行,耗水耗能大,同时洗毛废水排放到自然界中造成环境污染严重,且纤维材料表面存在化学残留,影响洗净毛纤维的品质,易造成纤维损伤。为解决化学洗毛方法造成的环境污染和化学物质残留,本文研究了生物酶洗毛技术,在原毛表层污物中分离得到一株适于生物酶洗毛的高产脂肪酶菌株,经形态鉴定、16S rDNA菌种鉴定和生理生化指标鉴证,确定为脂肪酶产生鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium sp.)。通过Rhodamine B显色培养基的荧光实验得出H/C值(荧光圈直径H与菌落直径C之比)为2。经酶活力测定,在30℃条件下鞘氨醇杆菌在11h达到产酶高峰(101.67U/mL)。经脂肪酶洗毛实验验证,洗净毛含脂率为1.031%,鞘氨醇杆菌对羊毛生物脱脂有较好的适用性。     

苦木注射液对阿奇霉素在肺炎模型大鼠体内组织分布的影响

本研究旨在探讨苦木注射液(KM)对阿奇霉素(AZM)在肺炎模型大鼠体内组织分布的影响。将肺炎模型大鼠随机分为对照组和实验组,分别经尾静脉注射AZM和/或KM,剂量均为75 mg/m L,每日1次,连续给药1周。LC-MS/MS法测定末次给药24 h后大鼠血浆和组织中AZM浓度,比较对照组与实验组AZM组织分布差异。结果显示,建立的LC-MS/MS方法经考察符合生物样品分析要求,适用于AZM浓度测定。与对照组相比,实验组血浆、脾、肺和肾组织中AZM浓度没有显著性差异,心和肝中的AZM浓度显著降低(P 0.05)。研究表明KM对AZM在大鼠心和肝中的分布具有显著影响,这可能是通过KM促进AZM在体内代谢而降低其组织蓄积,有利于避免产生肝损伤。