球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞胞内同功酶和代谢水平的影响

用吸附法从球孢白僵菌（Beauveriabassiana）的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾（Spodopterafrugiperda）体外培养细胞，以研究球孢白僵菌的昆虫致病机理．同功酶特异性染色结果表明，细胞中毒后，细胞内的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、酯酶等同功酶在种类和含量上都有所减少．并发现其细胞代谢紊乱，当毒素质量浓度在0～500mg·L(－1)时，培养液中的葡萄糖和蛋白的质量浓度均随细胞中毒加深而升高．     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞的超微结构和细？…

用吸附法从球孢白僵菌的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾体外培养细胞Ｓｆ－２１细胞株，以研究球孢白僵菌毒素的昆虫致病机理，扫描和透射电镜观察结果表明，在毒素作用下，培养细胞的细胞膜，细胞核，线粒体和核糖体均有很大程度的损伤。     

球孢白僵菌几丁质酶的定位研究

采用酶解球孢白僵菌菌丝细胞壁以获得原生质体,用超声破碎器破碎细胞,并用差速离心等方法,对此丝状病原真菌细胞中几丁质酶的定位进行了研究.采用球孢白僵菌 Eu-120株,分别用几丁质酶、蜗牛酶和纤维素酶,以不同比例混合进行脱壁处理.通过测定培养物上清液及原生质体溶解物的几丁质酶活性,发现此培养物上清液中的酶活性占其总酶活性的81.46%,而原生质体溶解物中酶活性极少.研究表明,球孢白僵菌几丁质酶主要存在于细胞的周质空间,并在菌生长过程中通过细胞壁分泌至细胞外.     

球孢白僵菌对棉铃虫细胞防御反应的影响

研究了球孢白僵菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｂａｓｓｉａｎａ）对棉铃虫（Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓｚｅａ）细胞防御反应的作用发现五龄棉铃虫幼虫对球孢白僵有强烈的细胞防御能力，表明为吞噬作用和细胞集结作用，但伴随基结球孢白僵菌的细胞防御反应过程，棉铃虫的全血细胞，粒血细胞和浆血细胞的数量均下降，有吞噬能力的血细胞数量和比例也急剧减少，而球孢白僵菌却具有克服棉铃虫细胞吞噬和细胞集结的能力，能在虫体血腔中萌发和生长繁殖     

家蚕病原的超微结构及其致病机制

七、白僵菌白僵菌属于白僵菌属(Beauvaria),孢梗密聚成丛,基部膨大,顶端细弱聚伞状小柄,分生孢子顶生于成丛的孢梗上,无色球形,直径1.8～2.5微米。当分生孢子附着在蚕体以后,如有一定的温度和湿度,孢子即发芽,分泌几丁酶、解朊酶、脂酶,溶解蚕体表皮的所有组成分,然后形成菌丝,穿入体内各细胞间。菌丝在体内大量形成,绒毛状成簇,从寄主躯体的节间穿出,逐渐覆盖寄主的全部躯体,后变成白色粉末状,干后逐渐变为乳黄色。     

电子束诱变球孢白僵菌高产几丁质酶的研究

本文利用电子束诱变球孢白僵菌分生孢子．比较不同诱变剂量对白僵菌产几丁质酶的影响。实验结果，在诱变剂量为０．０４×１０６ｒａｄ时，发生正变的机率较高，部分菌株几丁质酶活力比出发菌株提高１．２８倍。     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞的超微结构和细胞内总蛋白的影响

用吸附法从球抱白鹰菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ）的代谢产物中提取毒素,并将毒素作用于草地夜蛾（Ｓｐａｏｄｏｐｔｅｒａ　ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）体外培养细胞Ｓｆ－２１细胞株,以研究球抱白僵菌毒素的昆虫致病机理．扫描和透射电镜观察结果表明,在毒素作用下,培养细胞的细胞膜、细胞核、线粒体和核糖体均有很大程度的损伤．聚丙烯酸胺凝胶电泳结果表明,其细胞内总蛋白的种类和含量均有所改变,进一步证明,细胞完整结构的破坏导致了细胞内物质环境稳定性的破坏．     

拟柱孢藻毒素生物合成的分子基础与进化特征

拟柱孢藻毒素是由尖头藻等水华蓝藻产生的一种生物碱类蓝藻毒素.毒理学研究表明该毒素进入动物体内后能够对多种器官产生毒性效应，且以肝毒性较为明显.拟柱孢藻毒素的毒性虽不及微囊藻毒素，但由于其结构的稳定性和水溶性，能够在水体中积累到较高浓度，增大了饮用水健康风险，且容易通过食物链富集造成更为严重的中毒事件.随着尖头藻水华在世界范围内的蔓延，拟柱孢藻毒素也引起了研究者和水体管理部门的广泛关注.作为一种次级代谢产物，拟柱孢藻毒素的生物合成是从甘氨酸、精氨酸和丙二酰CoA开始，由特定的多种酶依次催化完成的.这些酶的编码基因在基因组上形成簇状结构，不同种的产毒藻具有相似的毒素合成基因簇，主要差别在于基因序列的变异和排列方式的不同.对毒素合成基因及其功能的探究不但有助于建立可靠的分子检测方法，用于预测水华发生过程中的毒素风险，还可以加深对蓝藻次级代谢产物合成与进化的认识，为利用和改造这些天然代谢途径合成新的活性化合物提供参考.通过对拟柱孢藻毒素生物合成的分子基础及其进化特征的系统性总结，以期从分子水平为相关领域的研究者提供有关拟柱孢藻毒素的全面认识.     

病原真菌细胞壁对棉花β-1,3-葡聚糖酶的诱导

从引起棉花红腐病的病原真菌——串珠镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ）的菌丝中制备了细胞壁水解产物,测定了其对棉花叶片和棉花组培细胞的β－１,３－葡聚糖酶的诱导能力．结果表明,串珠镰孢菌菌丝细胞壁水解产物可以诱导棉花细胞的β－１,３－葡聚糖酶的活性增加．诱导过程需要钙离子．用水杨酸预先作用棉花组培细胞可以提高细胞对病原菌菌丝细胞壁水解产物的诱导敏感性,使β－１,３－葡聚糖酶和另一类与植物抗病反应有关的酶（过氧化物酶）达到最大活性的时间提前．     

外界条件对球孢白僵菌几丁质酶的影响

本文研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)的培养条件——温度、初始pH值、接种量、培养时间等对产几丁质酶的影响;探讨了几丁质酶活性与几丁质浓度、粒子大小、酶解温度、pH值的关系;从而获得了高活性几丁质酶的培养条件及生物转化几丁质废物的适宜环境.     

病原真菌细胞壁对棉花β—1,3—葡聚糖酶的诱导

从引起棉花红腐病的病原真菌－串珠镰孢菌的菌丝中制备了细胞壁水解产物，测定了其对棉花叶片和棉花组培细胞的β－１，３－葡聚糖酶的诱导能力。     

串珠镰孢菌诱导的棉花细胞的反应性氧迸发

串珠镰孢菌的孢子和细胞壁水解物可诱导棉花悬浮培养细胞产生反应性氧迸发。来自抗性品种豫棉８号的培养细胞表现为二次反应性摒迸发。培养细胞的生长状态，激发子浓度、反应介质中Ｃａ＾２＋和Ｋ＾＋等金属离子含量、Ｈ＾＋－ＡＴＰ酶的抑制剂（钒酸盐），ＮＡＤＰＨ氧化酶抑制剂和人工电子受体Ｆｅ（ＣＮ）６＾３－均影响细胞的反应性氧迸发水平。     

串珠镰孢菌诱导的棉花细胞的反应性氧迸发

串珠镰孢菌的孢子和细胞壁水解物可诱导棉花悬浮培养细胞产生反应性氧迸发．来自抗性品种豫棉８ 号的培养细胞表现为二次反应性氧迸发．培养细胞的生长状态、激发子浓度、反应介质中Ｃａ２＋ 和Ｋ＋ 等金属离子含量、Ｈ＋ －ＡＴＰ酶的抑制剂（钒酸盐）、ＮＡＤＰＨ 氧化酶抑制剂 （α－萘酚和８－羟基喹啉） 和人工电子受体Ｆｅ（ＣＮ）３－６ 均影响细胞的反应性氧迸发水平．     

海藻酸钠复合载体固定化细胞拆分D,L－泛解酸内酯的研究

研究了海藻酸钠及其与聚丙烯酰胺(PAM)和聚乙烯醇(PVA)的复合载体对镰孢霉菌(Fusarium oxysporum BU-11)细胞的固定，该固定化细胞被用于手性拆分D,L-泛解酸内酯的反应体系。实验表明，海藻酸钠固定化细胞具有较好的扩散性和强度，在水解试验中与游离细胞相比，酶活收率可达到80%以上，而且具有较好的温度和批次反应稳定性，在底物质量浓度为200 g/L的3L搅拌式反应器中6h水解反应20批,水解率可以保持在初始的80%左右。PVA和PAM的加入可增强固定化细胞的强度，前者对酶活影响不大，后者使酶活略有增加。     

球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建

本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1。PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列。并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中。因此,该重组质粒可以直接用于tps1基因的酵母表达。     

微囊藻毒素对Hela细胞和Vero细胞的毒性效应

ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＭＣＹＳＴ－ＲＲ,ＭＣＹＳＴ－ＹＲ稀释后的毒素溶液处理Ｈｅｌａ细胞和Ｖｅｒｏ细胞后得到如下结果：１．３种毒素溶液对培养的Ｈｅｌａ细胞均有明显的抑制作用和毒性作用,其毒性作用与浓度成正比,致死细胞边缘不整齐不规则,细胞呈脱水状态。倒置显微镜下可见细胞变黑无折光性。高浓度毒素溶液（包括ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＲＲ和ＹＲ３个样品）作用细胞２４ｈ后,细胞完全致死脱落,３个样品间无明显差别;２．     

赤潮藻毒素检测研究进展(综述)

有害赤潮及含赤潮毒素生物对海洋水产养殖业和海洋食品进而对海洋生物、人、畜等构成极大的威胁和危害，甚至造成人类中毒死亡。所以，建立特异、灵敏的检测方法对于减少危害是十分必要的。赤潮藻毒素的检测常规方法－－生物法和化学法；新的方法有神经受体结合检测技术、细胞毒性检测技术、免疫学检测技术等。免疫学检测技术是利用抗原抗体反应的特异性来检测毒素，其优点是经济、快速、高效、特异，常用竞争法免疫检测、“三明治”法检测等。     

Cr6+对厌氧微生物的毒性作用研究

通过对取自ASBR中的厌氧污泥Cr^6 中毒的产甲烷活性恢复试验，研究了不同Cr^6 质量浓度对产甲烷微生物的抑制程度及抑制作用的分子机理，得出结论：当Cr^6 质量浓度小于30mg/L时，是生理毒素；当Cr^6 质量浓度大于110mg/L时，是杀菌性毒素以及当Cr^6 质量浓度小于10mg/L时，其抑制作用发生在反应后期，当Cr^6 质量浓度大于30mg/L时，其抑制作用发生在反应初期，通过对不同Cr^6 质量浓度下的厌氧微生物群落及产甲烷菌形态的照片分析，发现Cr^6 对厌氧微生物群落的组成和厌氧微生物的形态没有影响，但是高质量浓度Cr^6 强烈抑制了产甲烷菌的活性。     

球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建

本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1.PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列.并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中.因此,该重组质粒可以直接用于tps1基因的酵母表达.     

Lat52介导的特异性表达载体的构建及其鉴定

利用含花粉特异性启动子Lat52的质粒pLat52－7、含细胞毒素A链基因的质粒pGA968以及表达质粒载体pGA987，构建了含有Lat52特异性启动子和细胞毒素A链基因的表达载体，经酶切和PCR进行鉴定，证明所构建的重组载体即为实验所需的载体质粒，从而为下一步的转化模式植物拟南芥菜打下了基础。