凡纳滨对虾精子超微结构及遗传失活的研究

本文研究使凡纳滨对虾精子遗传失活的方法,用波长365nm和照射距离10.5cm的不同剂量紫外线照射凡纳滨对虾精液稀释液或精荚,然后进行人工授精。结果表明,新鲜精液稀释液在0~20s照射范围内,受精作用都仍能正常发生,与卵子人工体外授精仍可获得5%的平均受精率,但胚胎在孵化前死亡;新鲜精荚在5~10min照射范围内,采用精液移植授精法可获得20%的平均受精率和3%的平均幼体孵化率。精子在2×105个/cm2的条件下,精液稀释液厚度2cm,经30s以上紫外线照射后,精子染色体可完全失活,而精荚经20min以上紫外照射后,精子染色体亦可完全失活。应用透射电镜对正常和不同时间紫外辐射的凡纳滨对虾精子形态和超微结构进行观察,结果发现,凡纳滨对虾正常精子系单一棘突类型,主要由前端棘突、中间帽状体和后主体部构成,精子无尾部,不主动运动。紫外辐射凡纳滨对虾新鲜精液稀释液10~20s的精子形态和超微结构与正常活精子无明显变化。紫外辐射30s的精子表现为顶体和棘突形态正常,而染色质散乱,后主体部壁变薄;紫外辐射60s时精子就出现明显的受损状态,主要表现为细胞核变形,核区缩小,核膜受损部分破裂,染色质散乱甚至溢出,后主体部或前部胞壁加厚、膜表面皱缩、底部凹陷,顶体部局部受损,细胞质带囊泡化,双层膜肿胀,膜间腔增大。     

不同冷冻方法和解冻液对猪精液冷冻效率的影响

采用三种不同的冷冻方法冷冻猪的新鲜精液,再分别用不同的解冻液在相同条件下同时解冻,对比解冻后精子的活力和顶体完整率,以优化猪精液冷冻方法.实验一:随机选取三头健康的有稳定受精能力的优良种公猪,采集新鲜精液,分别用干冰颗粒、液氮颗粒和液氮细管三种方法冷冻,用同样的方法解冻,对比解冻后精子的活力和顶体完整率;实验二:用不同的解冻液解冻经干冰颗粒法冷冻的精液,对比不同解冻液对精子活力的影响;实验三:以孤雌激活和鲜精受精为对照,验证经实验一和实验二选择出来的最优冷冻方法和解冻液处理后的精子的体外受精能力.实验一显示,干冰颗粒冷冻法冷冻的猪精液解冻后精子活力(0.23)略高于液氮颗粒法的精子活力(0.20),而二者均显著高于细管冻精法的精子活力(0.08)(P<0.05),液氮颗粒法的顶体完整率(54.7%)和细管法的顶体完整率(54.2%)无显著差异,但二者均显著低于干冰颗粒法的顶体完整率(58.0%)(P<0.05).实验二显示,Glucose-EDTA解冻液解冻后,精子活力(0.22)显著高于DPBS-BSA解冻液解冻后的精子活力(0.13)(P<0.05).实验三:经干冰颗粒法冷冻、Glucose-EDTA解冻液解冻的精液,体外受精后的囊胚发育率(17.6%)与鲜精体外受精囊胚率(17.9%)无显著差异,但二者均显著低于孤雌激活对照组的囊胚率(36.6%)(P<0.05).由此可知:干冰颗粒法冷冻结合Glucose-EDTA解冻液解冻是较为理想猪精液冷冻保存方法,经该方法冷冻、解冻的猪精液,体外受精后的胚胎发育率与鲜精没有显著差异.     

洪山公鸡精液冷冻保存方法及效果的研究

研究比较了两种不同类型的冷冻精液在解冻后精子活率、顶体完整率以及受精率方面的差异。实验结果表明,细管型冷冻精液解冻后的活率显著高于颗粒型(n=20,p<0.01)。细管型冷冻精液解冻后的顶体完整率显著高于颗粒型(n=20,p<0.05)。受精实验结果表明,两种类型的冷冻精液的受精率都显著低于以新鲜精液输精的对照组(p<0.01),颗粒型冷冻精液的受精率显著高于细管型冷冻精液(p<0.01)。     

公鸭、公鸡精子对在液氮中低温冷冻保存耐受力的比较研究

比较公鸭和公鸡精子经低温冷冻保存后存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,公鸭冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率都不同程度地高于相同类型的公鸡冷冻精液,但差异均未达到显著水准（P＞0.05）.     

大鲵精子入卵过程的扫描电镜观察

采用扫描电镜观察了大鲵精子的形状,受精过程中卵壳膜的变化,及精子入卵的过程。人工催产的精子头部具有棒状和辣椒状两种形状,卵壳膜随着受精时间的变化而出现皱褶,沟与嵴,受精完毕,皱褶消失。大鲵属于多精入卵,精,卵相遇６０ｓ,精子接触卵膜,受精７５ｓ精子头部一半进入卵内。授精９０ｓ精子头部和颈部完全进入卵内,但精子尾部留在卵外面,授精２ｍｉｎ,,受精完毕。     

冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

抗精卵结合的生育调节工程疫苗研究中抗原多样性的比较

卵透明带是包围在动物卵和早期胚胎外的一层非细胞性糖蛋白类结构，精子受体即位于其中，是精卵识别、结合、防止多精子受精、保护早期胚胎发育直至着床所不可缺少的重要结构。对多种动物的比较研究发现，不同动物卵透明带内精子受体存在着种类特异性，可以特异地与同类精子顶体部的精子受体结合蛋白发生种类特异性结合，从而诱发顶体反应，以及其后的一系列受精反应过程，最后通过皮质颗粒及有关酶反应，导致透明带性质改变，封闭其它精子受体，避免多精子受精的发生。但是，精子受体蛋白结构内也存在部分种间交叉反应，如人与猪的卵透明带…     

维生素E和丁基羟甲苯在绵羊精液深冻过程中对精子的保护作用

近年来,文献报道稀释液中添加维生素 E、丁基羟甲苯或其他抗氧化剂能提高绵羊深冻精液的受胎率。一些实验室就抗氧化剂对精子的作用进行了探讨。我国也有一些单位,将维生素 E 用于绵羊精液深冻技术,但效果都不明显。目前绵羊精液深冻技术尚待改进,探讨抗氧化剂对冻精的作用有一定的意义。因此,我们进行了维生素 E 和丁基羟甲苯对绵羊深冻精子作用的实验,主要测定了谷草转氨酶、透明质酸酶和顶体蛋白酶活性及冻前冻后精子的活力。同时还观察了抗氧化剂对精子中过氧化物生成量的影响。     

冻精顶体异常率与畸形率的测定结果分析

用普通生物显微镜对通辽市家畜繁育指导站10头西门塔尔种公牛的冷冻精液进行了顶体异常率与畸形率的测定。结果表明，精液经冷冻(-196℃)处理后，精子顶体异常率为56．22％，畸形率为10．93％，两项合计为67．15％。     

近江牡蛎受精细胞学研究

用醋酸－地衣红染色的方法对近江牡蛎人工授精的卵子减数分裂和受精过程进行了详细细胞学观察。精子入卵前，卵子处于第一次减数分裂的前期（胚泡期），精子入卵后，胚泡消失，然后进行两次减数分裂，在海水温度为２８．８℃的情况下，授精后３３ｍｉｎ和４５ｍｉｎ，绝大部分受精卵已排出第一极体和第二极体，雄原核可在第一极体排出后及第二极体排出前任何时期内形成，雌雄原核以联合的方式将两组染色体合并，授精后１ｈ，大部分卵     

入卵过程中太平洋牡蛎精子超微结构的变化

本文研究了精子入卵过程中太平洋牡蛎精子超微结构的变化规律。研究表明，精子入卵过程分为4个时期：顶体反应期、穿卵前期、穿卵期和融合期。顶体反应期，精子顶体物质释放，顶体致密部分向外延伸，形成1层保护膜，亚顶体腔开始向顶端突起；穿卵前期，亚顶体腔前突形成顶体锥，并向卵膜释放亚顶体物质，精子外膜后移；穿卵期，精子核及线粒体进入卵膜形成的受精锥，线粒体数量减少，顶体突消失，精子外膜和尾部脱落；融合期，精子核进入卵内与质膜融合，核解体。     

试述鲍类前合子生殖隔离

生殖隔离是一个最重要的生物过程。虽然有许多机理还是未知的,但已研究清楚了物种之间的生殖隔离有两种方式。即通过配子不成熟、不受精的前合子生殖隔离和杂交后代的不育、不成活的后合子生殖隔离。在动物受精过程中,两个配子的质膜在接触融合之前,精子必须穿透包绕在卵细胞外的物质,为完成这一过程,大多数种类的动物都发展了精子结构,使其带有顶体泡,它通过泡吐作用释放具有溶解作用的蛋白质,由它担任穿透卵细胞外被的作用。成熟的鲍精子具有发达的顶体泡,里面含有多种蛋白质,但其中的两种蛋白质－细胞溶素（16kDa）和18kDa蛋白质与生殖有关,是生殖隔离的主要分子结构。当精子粘附到卵黄外膜上时就诱发了顶体反应,释放的16kDa蛋白质利用非酶解反应,在卵黄膜上穿一个小孔,精细胞便从此处穿过卵黄膜与卵细胞融合。鲍类的卵细胞由一层又厚又复杂的细胞外基质包被,并由胶状物、卵黄膜和细胞表面壳等几种成分组成。超微结构研究发现：胶状物位于卵细胞的最外层,由疏松排列的纤维组成,它在鲍类受精中的作用还没有研究不禁。鲍类的ESC层与海胆的卵黄膜十分相似,含有精子结合受体,它是不分支的糖蛋白,同同细胞溶素结合的惟一成分,它具有种属特异性。每个受体大约同60个细胞溶素结合。所以种间受精的抑制因素也许并不只有卵黄膜与溶解蛋白的反应,还可能有精子对ESC层的粘接作用。     

鲍配子识别蛋白的进化

在鲍的繁殖过程中,配子的识别表现出种的特异性,精子顶体泡内的细胞溶素(lysin)可以专一性地在卵黄膜上钻一个孔,精子便从此孔进入与卵细胞相互融合,完成受精.Lysin通过正向选择定律快速进化,而卵膜上的细胞溶素受体(VERL)为lysin的分化提供了选择压力,它是一个自由重复的序列,进行协同进化,这种协同进化可以解释精子lysin的快速适应性进化,并提供了一种可理解的分子机制来解释种特异性的繁殖鲍新种的产生.     

人体精子顶体蛋白酶的研究

用硫酸胺盐析、Sephadex G-100柱层析等方法,从人体精子中提纯得到电泳单点纯的顶体蛋白酶。用SDS-聚丙烯酰铵凝胶电泳法测定了人体精子顶体蛋白酶的相对分子质量(约为10470)。用N-末端分析和氨基酸组成分析等方法研究了这种酶的一些化学特征。实验结果表明,人体精子顶体蛋白酶由85个氨基酸残基组成,它是以亮氨酸为N-末端的单一多肽链。     

17β—雌二醇对冷冻精液授精绵羊繁殖率的影响

用冻精给绵羊授精,引起受胎率下降的一个重要原因,认为是精子运行中活力的下降。由于雌二醇能促进精子运行的启示,给孕酮诱导发情的成年母羊,注射17β—雌二醇,测定其用冷冻精液授精后的效果。据授精后18天所作的孕酮测定:注射17β—雌二醇,50毫克的母羊受胎率为43％;用冷冻精液人工授精而不注射雌二醇的母羊受胎率为52％;和新鲜精液人工授精的母羊为86％。产羔率分别为6,35和69％。对雌二醇处理的母羊来说,受胎率和产羔率之间有明显的差别,提示雌二醇事实上造成早期胚胎死亡的增加与使用冷冻精液有关。     

大熊猫电刺激采精及精液冷冻保存研究

对卧龙自然保护区大熊猫研究中心的９只５．５－１６．５岁的雄性大熊猫进行了１７次电刺激采精,其中３只是能进行自然交配并繁殖了后代的种公兽,比较研究了精液离心、不同稀释液和冷冻方法对大熊猫精液超低温冷冻保存后的活力、运动状态、精子和顶体形态的影响。细冷冻是１种较好的超低温冷冻精液的方法。     

驴精子顶体蛋白酶的提纯及其一些性质的研究

顶体蛋白酶acrosin(EC3、4、21、10)是存在于哺乳动物精子顶体中的一种丝氨酸蛋白酶,生化性质上属于水溶性碱性糖蛋白,专一水解精氨酰键,最适pH为8.0—8.5。首先在兔精子中提取了顶体蛋白酶,发现此酶能分解兔卵透明带,并且被胰蛋白酶抑制剂所抑     

解脲支原体感染与精液质量指标的相关性研究

对 4 1例正常男性和 81例精液质量较差男性患者的精液进行了解脲支原体培养研究 ,结果表明精液质量差的患者解脲支原体阳性率为 54.34% ,而正常男性的阳性率为 2 6 .83% ,二者差异显著 (α <0 .0 1) .同时 ,对 81例患者按少精及无精、成活率低下、活力低下、顶体完整率低以及血清抗精子抗体阳性 5项指标进行了分组 ,并计算了各组中解脲支原体阳性患者所占百分率 .结果表明 :以上各组的阳性率均高于正常组 ,生殖道解脲支原体感染影响了精子各项指标 ,降低精液整体质量 ;解脲支原体对精子活力影响最大 ,其次是精子数、成活率、顶体完整率、血清抗精子抗体 ;解脲支原体感染致使精子活力逐渐下降 ,最终导致精子死亡 ,从而降低精子成活率     

提高母猪受胎率的技术措施

针对规模化养猪场能繁母猪受胎率低的问题，运用了选择易受孕的母猪品种，加强和改善饲养管理，使用品质高的公猪精液，规范使用方法，适时配种，正确掌握操作规程，做好影响母猪受胎率常见病的预防等措施，使规模化养猪场养殖技术水平提高，产生了较好效果。     

大袋蛾雌成虫内部生殖系统的形态学和组织学

描述了大袋蛾（ＣｌａｎｉａｖａｒｉｅｇａｔａＳｎｅｌｌｅｎ）雌成虫内部生殖系统的形态学和组织学。大袋蛾雌成虫内部生殖器官与其它较高等的鳞翅目昆虫相比明显不同：交配囊极度退化，前庭中出现两个瓣膜。试验表明交尾后雌虫体内无精包，而在雌虫受精囊中发现精子束。这说明精子束被直接传输到受精囊中。大袋蛾是鳞翅目中发现的首例．交尾时不产生精包而直接授精的虫种。