Bt和球孢白僵菌混配对酒曲害虫黑菌虫的毒杀效果研究

利用苏云金芽孢杆菌与球孢白僵菌混配杀灭酒曲害虫黑菌虫．研究结果表明：在温度40℃、相对湿度73％～75％条件下,苏云金芽孢杆菌杀虫剂与球孢白僵菌杀虫剂以5：4混配时能有效杀死酒曲害虫黑菌虫,杀虫至第15天可以使黑菌虫的校正死亡率达93．33％．     

防治甜菜夜蛾的双菌株混合发酵研究

研究了蜡状芽孢杆菌Ym2102与苏云金芽孢杆菌DL5789的混合发酵.结果发现其3000倍稀释液对甜菜夜蛾的致死率为94.2%,摇瓶发酵最终菌数为2.8×109,pH变化趋缓.     

苏云金杆菌对主要大曲害虫的毒杀效果研究

苏云金杆菌是一种广泛应用的生物农药,苏云金杆菌在形成芽孢的同时,产生具有毒杀性的伴孢晶体.研究表明:利用液体发酵方法培养苏云金杆菌,最佳的发酵周期为2天;最佳毒杀剂量为日照条件下2.0×109个芽孢/克,非日照条件下3.2×109个芽孢/克;最佳毒杀温度为30℃,其毒杀效果在日照条件下为46%,非日照条件下为86%.     

牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分离和cry基因鉴定

对牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分布与基因多样性进行研究.采集91份土壤样品,利用温度筛选法从中分离出40株苏云金芽胞杆菌并对其进行光学显微观察,晶体形态为球形和菱形.PCR-RFLP鉴定结果表明:该地区的苏云金芽胞杆菌含有cry1,cry2,cry4,cry8,cry9,cry18,cry26,cry28,cry35基因,含cry8基因的菌株最丰富;苏云金芽孢杆菌在火山口原始森林的分布具有良好的多样性.     

新疆棉铃虫病原微生物分离及其高效杀虫微生物的筛选

从新疆不同生态区自然死亡的980头棉铃虫上分离到360株细菌和12株病毒,经鉴定,其中气杆菌344株,球孢芽孢杆菌8株,粘质赛氏杆菌6株,苏云金芽孢杆菌2株,HaNPV病毒12株,依次占分离物的92.5%、2.2%、1.6%、0.5%和3.2%。从中选出19株细菌、1株HaNPV进行生物测定,结果在供试菌株中以35号和360号菌株及HaNPV毒力最强,其感染棉铃虫后的死亡率分别为80.0%、70.0%、70.0%,对其进行不同浓度的试验,经回归分析,2株苏云金芽孢杆菌35号、360号和1株HaNPV对棉铃虫3龄幼虫的毒力与浓度有高度相关性(r>0.900)。     

苏云金芽孢杆菌杀虫剂的研究进展

综述了苏云金芽孢杆菌的毒性作用,它的杀虫晶体蛋白基因及基因产物的特性,将杀虫晶体蛋白基因转移到植物上获得抗虫植物以及如何防止昆虫对该杀虫剂产生抗性的问题.     

VC二步发酵伴生菌苏云金芽孢杆菌的选育

苏云金芽孢杆菌经紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)及两者的复合诱变,获得1株高效伴生菌株UN-366.在pH 6.5~6.8的发酵培养基中与氧化葡萄糖酸杆菌混合发酵,UN-366的平均糖酸转化率提高了6.32%,古龙酸的质量浓度达到了83.7 g/L,经连续5代转接发酵实验,性状稳定.     

几丁质酶在苏云金芽孢杆菌中的分布及抑小麦赤霉菌菌株的筛选

利用几丁质平板法和几丁质酶基因特异引物PCR两种方法,对本室保藏的995株苏云金芽孢杆菌的几丁质酶及其基因进行了检测.结果显示所有被检测的菌株都可以在几丁质为唯一碳源的平板上生长.其中93.0%的菌株PCR检测阳性,54.1%的菌株可产生明显的水解圈.证明苏云金芽孢杆菌中几丁质酶普遍存在.通过研究发现Bt几丁质酶活力高低与其血清型及杀虫晶体蛋白基因的类型无相关性.同时对286个菌株进行了抑小麦赤霉菌实验,筛选出19株抑真菌效果较好的苏云金芽孢杆菌.     

两株芽孢杆菌对萘、菲、芘的降解特性研究

目的:研究枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌在不同pH、温度和盐度条件下对多环芳烃萘、菲、芘的降解.方法:将多环芳烃萘、菲、芘做为惟一碳源,以活性炭为吸附载体,通过实验测定菌株对萘、菲、芘的降解能力和脱氢酶活性大小,为进一步研究多环芳烃的降解提供理论依据.结果:两株芽孢杆菌在不同的温度、pH、盐度下培养48 h后,得到各单因素的最适降解条件为温度在35℃(pH=7.0、盐度为80 mmol/L)时,枯草芽孢杆菌对萘、菲、芘的降解率和脱氢酶活性达到最高.在温度为30℃(pH=7.0、盐度为40 mmol/L)时,苏云金芽孢杆菌对萘、菲、芘的降解率和脱氢酶活性达到最高.结论:枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌在不同的温度、酸度和盐度条件下对萘、菲、芘的降解能力和脱氢酶活性各不相同,其中,酸度对枯草芽孢杆菌的影响最大,温度对苏云金芽孢杆菌的影响最大.而在相同条件下,两种菌株对萘、菲的降解能力和脱氢酶活性均大于对芘的降解能力和脱氢酶活性,可见萘和菲的降解效果比芘的降解效果好.     

苏云金杆菌NU-1之6种培养基发酵的对比

目的提高苏云金杆菌NU-1制剂的毒力。方法通过苏云金杆菌NU-1在6种培养基中发酵,研究其菌体生长、pH值变化、芽孢形成、伴孢晶体率、发酵周期等。并对其晶体蛋白进行了提纯和测定。结果5号培养基产量最高,30℃发酵40h时菌数可达80.4×108个/mL,伴孢晶体率大于90%,晶体蛋白浓度达6.312mg/mL。结论用5号培养基作的制剂毒力最强。     

苏云金芽孢杆菌cyt1Aa基因在拟步甲亚种菌株中的表达及重组菌株杀虫活性研究

将含苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis,简称Bti)cyt1Aa基因的质粒电激转化至对鞘翅目害虫有专一活性的Bt拟步甲亚种(Bacillus thuringiensis subsp.tenebrionis,简称Btt)菌株中进行表达,获得重组菌株Btt-WF45。对表达产物进行SDS-PAGE分析,显示Cyt1Aa蛋白获得了大量表达。生物测定结果表明,Btt-WF45对鞘翅目小圆叶甲(Plagiodera Redtenbacher)幼虫没有毒力,对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)的毒力比对照菌株4Q7-WF45高0.33倍,对白纹伊蚊(Aedes albopictus)的毒力比4Q7-WF45高0.63倍。由于在重组菌株Btt-WF45中Cry3A蛋白的表达量太低,所以在该结果中未能显示Cyt1Aa蛋白与Cry3A蛋白是否存在协同增效作用。     

应用Bt控制鞘翅目害虫的研究现状

本文主要针对苏云金杆菌对鞘翅目害虫的研究历史过程和应用方面进展进行阐述 ,提出其增效途径和抗性对策。     

Genome sequence of Bacillus cereus and comparative analysis with Bacillus anthracis

Bacillus cereus is an opportunistic pathogen causing food poisoning manifested by diarrhoeal or emetic syndromes. It is closely related to the animal and human pathogen Bacillus anthracis and the insect pathogen Bacillus thuringiensis, the former being used as a biological weapon and the latter as a pesticide. B. anthracis and B. thuringiensis are readily distinguished from B. cereus by the presence of plasmid-borne specific toxins (B. anthracis and B. thuringiensis) and capsule (B. anthracis). But phylogenetic studies based on the analysis of chromosomal genes bring controversial results, and it is unclear whether B. cereus, B. anthracis and B. thuringiensis are varieties of the same species or different species. Here we report the sequencing and analysis of the type strain B. cereus ATCC 14579. The complete genome sequence of B. cereus ATCC 14579 together with the gapped genome of B. anthracis A2012 enables us to perform comparative analysis, and hence to identify the genes that are conserved between B. cereus and B. anthracis, and the genes that are unique for each species. We use the former to clarify the phylogeny of the cereus group, and the latter to determine plasmid-independent species-specific markers.     

苏云金芽孢杆菌资源的收集与鉴定

苏云金芽孢杆菌是一种在芽孢形成的同时能形成杀虫晶体蛋白的细菌。自石渡从家蚕中分离出第一株Bt以后，人们发现它广泛存在于土壤、昆虫、贮藏物、仓库尘埃、植被等昆虫接触物上，并从中分离出大量菌株。本文就Bt资源收集的研究情况进行阐述。     

一株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的分离与鉴定

利用醋酸盐对苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的选择性抑制特性，采用选择性培养基从土壤中分离苏云金芽孢杆菌，对分离菌株的个体形态，生理生化特点进行了分类研究，确定该菌株即为苏云金杆菌，采用改进的培养基培养伴胞晶体，证明该培养基可在48h内产生大量的伴胞晶体。     

酶法生产鸟氨酸菌株的筛选与培养

从土壤中筛选到一株可以利用胞内精氨酸酶生产鸟氨酸的菌株XT-025,通过形态特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列分析,初步鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),这是首次发现该种微生物可用以生产鸟氨酸。通过对其培养条件和转化条件的优化,确定了最佳的培养时间为24h,最合适的转化液成分为0.3mol/L的碳酸盐缓冲液,V(Na₂CO₃)∶V(NaHCO₃)为8∶2。同时发现Mn²⁺对精氨酸酶有很强激活作用,在添加适量Mn²⁺的条件下,鸟氨酸的产量能够达到50g/L,精氨酸摩尔转化率达到100%,而Sn⁴⁺和Cu²⁺则会使酶完全失活。     

田基黄提取物抑菌作用的研究

该实验以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、酿酒酵母菌、苏云金芽孢杆菌和变形杆菌为供试菌种,采用采用滤纸片扩散法对田基黄水提取液进行抑菌实验研究,并测定其最低抑菌浓度（MIC）,其结果表明：田基黄水提取物对供试菌种普遍有抑制作用,黑曲霉除外;MIC也因菌种不同而不同,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和青黄链霉菌为0.25g/mL,酿酒酵母菌为0.5g/mL,苏云金芽孢杆菌和变形杆菌均为0.125g/mL.实验还采用不同有机溶剂的提取物对选取的五种供试菌种进行抑菌作用研究,其结果表明：田基黄有机溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌均有抑制作用,且抑菌效果均比水提取物的抑菌效果明显.     

纤维素降解菌的分离及单菌株与菌群纤维素酶活性质

从实验室保存的5号菌群中，分离筛选出四株具有纤维素酶活力的细菌F1、F2、F3和F4．经形态学观察并进行16SrDNA序列分析，鉴定F1、F2、F3、F4分别是苏云金芽孢杆菌、生淀粉糖化酶产生菌、粪产碱菌和蜡样芽孢杆菌．通过分别测定四株细菌、5号菌群以及四株菌混合菌群的CMC酶活．进行比较分析，说明分离筛选单菌株，了解了菌群主要成分，同时有利于克服5号菌群活性不稳定，无法保存等缺点．混合单菌株形成新的菌群，利于后续对菌群内部各组分之间相互作用的研究．