菌-藻体系中无机碳源对小球衣藻生长和聚集的影响研究

为了提高微藻生长速率、实现低成本高效收集,文章以小球衣藻(Chlamydomonas microsphaera)为研究对象,探究无机碳源对菌-藻体系中微藻生长和聚集的影响。结果表明：无机碳源能够显著提高菌-藻体系中微藻生物量,当初始菌藻数量比为15∶1时,在低碳源(37.6 mg/L)水平下,经过6 d培养后微藻生物量可达1.255×10⁶个/mL,较纯藻培养体系增加30%;当碳源质量浓度升高至188.0 mg/L时,微藻数量较纯藻培养体系增加68%,可达1.681×10⁶个/mL;菌-藻体系也有助于微藻自聚集,随着无机碳源质量浓度增加,其聚集效果变得更明显,聚集率最高可达66%,远高于纯培养体系中的27%。研究结果可为微藻综合利用研究提供参考。     

抗菌素对海洋微藻静置培养生长和保存的影响

分别用不同的抗菌素处理常用的海洋微藻,观察对海洋微藻生长和保存的影响。结果表明：青霉素在开始2d内对三角褐指藻有抑制作用,在5d之后抑制作用不明显,青霉素有利于湛江等鞭藻、等鞭藻和亚心形扁藻的生长。硫酸链霉素在开始5d内对三角褐指藻、扁藻、湛江等鞭藻、等鞭藻在不同程度上有抑制作用。硫酸庆大霉素在一定程度上有利于湛江等鞭藻、等鞭藻生长。氯霉素在较高浓度时能抑制湛江等鞭藻、等鞭藻生长。青霉素、硫酸链霉素在湛江等鞭藻、等鞭藻的保存中有一定的作用。以青霉素和硫酸链霉素共同处理的效果最好。     

藻菌共生体系的建立及其对造纸废水的处理效果

对棕鞭藻(Ochromonas sp.)培养体系中的共栖细菌进行分离纯化,拟通过藻菌共生体系的建立提高微藻生物量积累能力,并探究藻菌共生体系对造纸废水的处理效果.经16S rDNA基因测序比对,分离获得的5株微藻共栖细菌分别为Por-phyrobacter sp.、Hyphomonas sp.、Aquimonas sp.、Agrobacterium sp.和Hydrogenophaga sp..通过向微藻培养体系添加不同的共栖细菌以验证其对微藻生长效率的影响效果,结果表明,5株微藻共栖细菌中,Aquimonas sp.(水单胞菌)可显著促进棕鞭藻的生长,当藻菌比为1:3时,水单胞菌对微藻的促生效果最佳,共培养10 d后,体系中微藻干重达到最大值0.78 g/L.利用藻菌共生体系处理造纸废水8 d,废水中化学需氧量(chemical oxygen demand,COD)、总氮量(total nitrogen,TN)、总磷量(total phos-phorus,TP)、色度分别从154.13 mg/L、22.42 mg/L、4.90 mg/L、275降至37.5 mg/L、14.53 mg/L、0.48 mg/L、18,去除率分别为75.67％、35.19％、90.2％和93.45％;同时微藻干重可达1.073 g/L.藻菌共生体系对造纸废水深度处理的效果与芬顿法相当,可达到《制浆造纸工业水污染排放标准》(GB 3544—2008),同时可显著降低处理成本,具有良好的应用前景.     

杜氏盐藻无菌纯化研究

首先通过杜氏盐藻及藻液内优势菌对抗生素的敏感性实验确定了氨苄青霉素、庆大霉素、头孢霉素和链霉素为该盐藻的除菌工具.采用联合加入的方法,即上述4种抗生素终浓度均为800μg/mL,相同浓度连续混合处理3次,每次处理间隔2d,再结合平板稀释分离法,获得无菌盐藻.带菌盐藻的生长稍快于无菌盐藻,但会较早出现老化现象;分别回加分离到带菌盐藻中的5种优势菌会促进无菌盐藻的生长.本实验为进一步的盐藻转基因以及藻菌关系等研究奠定了基础.     

海洋胶体中的氮、磷和铁对微藻脂肪酸组成和含量的影响

以海洋微藻(海水小球藻、亚心形扁藻和球等鞭金藻)为对象,利用错流超滤技术提取海洋胶体,分别以胶体为唯一的氮、磷和铁源,研究胶体及其有机碳(COC)浓度对微藻脂肪酸组成和含量的影响.结果表明:以胶体为唯一氮源的体系,小球藻和金藻的脂肪酸与COC浓度之间无相关关系;低COC浓度下脂肪酸组分和含量多于高COC浓度下脂肪酸组分和含量.以胶体为唯一磷源的体系,3种微藻的脂肪酸各组分含量与COC浓度呈线性正相关;ccoc=0时脂肪酸组分最多,ccoc=238.4μmol/L时脂肪酸含量最高.以胶体为唯一铁源的体系,在COC浓度范围内(0～238.4μmol/L),各微藻脂肪酸含量与COC浓度呈线性正相关;ccoc=119.2～238.4μmol/L时,脂肪酸组分最多,含量最高.以胶体为唯一氮源体系培养的3种微藻的总不饱合脂肪酸含量最高,以胶体为唯一铁源体系培养的含量最小.     

原油水溶性组分对2种微藻的毒性效应及微藻对石油烃的降解研究初探

为探索石油水溶性成分(WAF)对海洋微藻的毒性效应及海洋微藻对其的降解,研究了96 h内不同浓度WAF暴露下2种海洋微藻的细胞密度、生长率及抑制率,并在实验完成时测定微藻培养液中WAF的剩余量。实验结果表明低浓度的WAF能促进2种微藻的生长,当WAF浓度大于2.90 mg/L时,小球藻的生长受到抑制,当WAF浓度大于6.97 mg/L时,三角褐指藻的生长受到抑制,且呈现明显的剂量-时间效应。相对于小球藻,三角褐指藻对高浓度WAF的耐受性较强,受到的抑制较轻。96 h时,2种微藻培养液中的WAF浓度均有显著降低,但三角褐指藻实验组中WAF浓度降幅较大,其可能的原因是三角褐指藻对WAF的耐受性较强,藻细胞密度较高,从而对WAF有较高的降解效率,因此可用于降解含有WAF的污染海水。     

藻菌固定化用于市政污水深度脱氮除磷及藻体产油研究

 污水再生利用是解决水资源与能源危机的重要途径,采用微藻深度处理污水并生产生物质能源是一大热点。针对市政污水深度处理,以活性污泥为固定化细菌,采用小球藻和栅藻,分别比较了固定化藻菌、固定化微藻,以及悬浮态微藻在藻体生长、污水脱氮除磷和微藻产油方面的差异,拟实现对市政污水深度脱氮除磷的同时实现微藻油脂的诱导富集。结果表明,固定化藻菌对氮磷的去除效果优于固定化微藻和悬浮态微藻,且固定化藻菌中微藻油脂质量分数最高。当市政污水NH₄⁺-N 和PO₄^3--P 的初始质量浓度分别为25 和3 mg/L 时,固定化栅藻菌培养4 d 后能够完全去除水体中的氮磷,而固定化藻菌中小球藻的油脂质量分数可达到16.5%。     

海洋微藻分类生态及生物活性物质研究

海洋微藻是海洋中的主要初级生产者,它们的盛衰直接或间接地影响着整个海洋生态系的生产力,因此,与渔业资源、水产养殖、环保、地质等密切相关;海洋微藻的分类和生态研究是海洋生态系统结构和功能研究的基础。另一方面,近年来,随着陆地资源的衰竭和环境问题的日益突出,海洋微藻资源成了人们关注的热点,尤其是利用现代生物技术开发利用微藻资源及微藻与环境的关系问题等方面研究得到了科学家和各国政府的高度重视。我国海洋微灌资源丰富,过去对海洋微藻的分类学和生态学研究已取得一定成果,这些成果的应用和开拓新的研究课题是目前海洋微藻研究的2个重要方向。厦门大学在海洋硅藻研究方面的成果一直处于国内领先水平。近年来,在分类生态基础上,不断开展新的研究,在海洋微藻分类学和生态学、微型硅藻和微型浮植物生态、海洋微藻生物活性物质、微藻生物分子标记物、微藻胞外产物、及有害赤潮微藻的分离培养和生物学特性等方面研究取得了较好的进展。     

L型菌所致肺部感染性疾病的研究

目的:探讨提高培养L型菌检出率的方法,了解L型菌对常用抗生素的耐药谱,为防治L型菌所致的肺部感染提供检测依据.方法:对200例肺部感染患者痰标本进行常规与L型菌培养的检测,对分离培养出的细菌进行药敏试验.结果:分离出细菌39株,其中L型菌21株,占53.8%,普通细菌18株,占46.2%;L型菌以克雷伯茵和大肠埃希氏菌最多,各占42.8%.药敏试验对丁胺卡那霉素、庆大霉素、左氧氟沙星及部分头孢类抗生素较为敏感,对氨苄青霉素耐药.结论:L型菌在肺部感染性疾病中比例较高,应将L型菌检测作为常规实验开展,以减少漏诊.同时,临床合理使用抗生素能减少L型菌的产生及提高治疗效果.     

链霉素对海洋微藻的毒物刺激效应

实验选用链霉对六种海洋微藻进行实验,发现六种海洋微东普遍对链霉素具有抗性,其中只有角毛藻和三角褐指藻在实验范围内（0－500mg/L)测到了72h的半抑制浓度,EC50分别为346mg/L和445mg/L,春它四种均未测到,而且当链霉素浓度为30mg/L时,对六种海洋微藻普遍具有生长刺激效应,即毒物刺激效应。     

广西北海凡纳滨对虾养殖池塘叶绿素a和微藻的变化研究

于不同养殖时间,采集广西北海市3口凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）养殖池塘水样,调查养殖水中叶绿素a浓度和微藻组成。叶绿素a浓度用分光光度三波长法测定,微藻分类计数用镜检法进行,微藻多样性分析用Shannon-Wiener多样性指数、Pielou种类均匀度指数和种类优势度指数进行。结果表明,3口池塘叶绿素a的浓度养殖前期低,在10.0μg/L以内,养殖中期增长迅速,养殖后期达到150.0μg/L;微藻细胞密度在养殖前期低于20×106cells/L,养殖后期高于100×106cells/L;微藻多样性指数和均匀度指数皆为养殖前期高,养殖中后期逐渐降低,多样性指数0.98～3.15,均匀度指数0.28～0.82;在养殖前期,微藻的种类较多,优势种是硅藻和绿藻,养殖中后期种类减少,优势种是绿藻、蓝藻和甲藻。     

莜麦组织培养及再生植株

以莜麦（Ａｖｅｎａｎｕｄａ）成熟种子为材料，研究了培养基成分对愈伤组织的诱导、分化和继代保持的影响。通过对ＭＳ为基本培养基附加２，４－Ｄ、６－ＢＡ、ＫＴ、ＺＴ等成分的各种培养基上诱导产生的愈伤组织观察比较，发现在２，４－Ｄ浓度为２ｍｇ／Ｌ时，诱导产生的愈伤组织量最多，随着２，４－Ｄ浓度降低，愈伤组织形成的量也减少；在２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、ＫＴ０．２５ｍｇ／Ｌ的培养基中愈伤组织能分化出芽，产生大量苗，进而再生植株。实验结果表明，在继代培养基中加入一定量的ＡＢＡ和ＺＴ，能有效地促使褐化的愈伤组织恢复正常，使之保持良好的生长状态和分化能力。     

一品红愈伤组织的诱导与分化

以一品红的茎段、叶片、苞片及叶柄作外植体接种于Ms附加不同激素的培养基中,研究愈伤组织的诱导效果以及不同激素组合对愈伤组织分化出芽的影响。结果表明,在起始培养中以Ms BA 0．1 mg／L NAA0．1mg／L 2,4-D 2 mg／L的效果最好,最易诱导出愈伤组织,其中苞片的诱导效果优于其它外植体。在BA与NAA不同浓度组合中,茎段的诱导效果最好,其次是叶柄和苞片,叶片的诱导效果较差。愈伤组织分化产生芽的频率较低,继代培养中易出现各种颜色的次生代谢物。     

过碳酸钠和微波对食用菌种植常见3种杂菌消毒试验

试验选用在食用菌培养基中最常见的、不易被杀死的3种菌(大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉菌)作为消毒灭菌试验对象,对过碳酸钠和微波的消毒灭菌效果进行测试。过碳酸钠采用20 000、10 000、1 000、100、50、10mg/L 6种浓度梯度进行试验。试验表明随着过碳酸钠浓度升高3种菌的数量均在减少。大肠埃希菌与黑曲霉菌在浓度为10 000 mg/L时全部被杀死,枯草芽孢杆菌在浓度为20 000 mg/L时全部被杀死。随着微波时间的增加菌的数量逐渐减少,在微波时间为210 s时黑曲霉菌全部被杀死,240 s时大肠埃希菌全部被杀死,300 s时枯草芽孢杆菌全部被杀死,达到了彻底灭菌的效果。     

Factors influencing the purification efficiency of photosynthetic bacteria

One strain of photosynthetic bacteria (PSB) was isolated from substrate sludge offresh-water fishpond. Influence of the use level of PSB culture solution, illumination condition,temperature, salinity, the use level of copper sulfate and dipterex on the purification efficiency was investigated. The results showed that the optimum use level of PSB culture solution was 10 mg/L,and the purification efficiency at illumination was higher than that at black, and if the temperature was lower than 15℃, or the use level of sodium chloride, copper sulfate and dipterex were higherthan 10 000 mg/L, 0.4 mg/L and 2.0 mg/L, respectively, the purification efficiency dropped distinctly.     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

共振散射光谱分析方法测定痕量庆大霉素

在pH值为3.2-6.2 NaOAc-HOAc缓冲介质中,十二烷基苯磺酸钠分别与硫酸庆大霉素(GEN)、硫酸妥布霉素(TOB)、硫酸卡那霉素(KANA)、硫酸新霉素(NEO)等氨基糖苷类抗生素相互作用形成缔合物,在320,340,420 和470 nm有4个散射峰.GEN,TOB,KANA和NEO的浓度分别在0.072 0-5.04,0.128-7.04,0.240-4.80,0.076 0-6.84 mg/L与共振散射强度成正比,检出限分别为0.010,0.031,0.090,0.070 mg/L.该法有好的选择性和灵敏度,用于市售庆大霉素注射液、片剂和胶囊的测定,结果比较满意.     

大花君子兰单细胞培养再生绿色植株

以大花君子兰（ｃｌｉｖｉａ ｍｉｎｉａｔａ） 瘤状结构的胚性愈伤组织为单细胞培养来源,在附加２ ｍｇ／ＬＫＴ、１ｍｇ／Ｌ２ ,４ —Ｄ 及３ ％ 蔗糖的ＭＳ基本培养基上培养,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后形成幼苗,将较大的幼苗转入状苗生根培养基（ 附加０－５ ｍｇ／ＬＫＴ 和０－１ｍｇ／ＬＮＡＡ的１／２ ＭＳ培养基） 上继代培养形成再生绿色植株。绿苗再生频率随继代时间的延长而提高。     

几种草坪草组织培养和植株再生的研究

以6种草坪草种子和2种草坪草愈伤组织为材料,研究了基本培养基种类和2,4-D浓度对愈伤组织诱导以及不同的细胞分裂素对分化的影响.试验结果表明,N6培养基较MS、NB培养基适合草坪草组织培养,诱导愈伤的2,4-D浓度宜采用6 mg/L,有机添加物对愈伤组织的生长有利,特别是肌醇对草坪草愈伤组织的生长有明显的促进作用.在分化培养中,不同材料所需的细胞分裂素适宜种类需要通过试验来确定.