含黄油的高脂饲料诱导高脂血症小鼠模型特征的研究

目的 建立富含牛奶制品黄油饮食诱导小鼠高脂模型,观察和分析其高脂血症的特征。方法 选择同窝雄性C57BL/6小鼠20 只,随机分成2组,每组各10 只。一组小鼠喂养普通饲粮(不含黄油),设为对照组,另一组小鼠喂养添加黄油的高脂饲粮,设为高脂组。实验期为120 d,动态检测小鼠体质量、血脂及体脂的变化,观察肝脏组织病理学变化。结果 1)造模120 d,与对照组小鼠相比,高脂组小鼠体质量及血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)量明显增加(P<0.001),而血清总甘油三酯(TG)量无明显差异;(2)与对照组小鼠相比,高脂组小鼠腹部脂肪及肝脏质量系数显著增加(P<0.001);(3)高脂组小鼠肝脏出现严重的脂肪变性及炎性细胞浸润。结论 含有黄油饲料喂养形成的小鼠高脂模型出现血中总胆固醇明显改变,而总甘油三酯无明显变化的特征,提示牛奶制品黄油在饮食诱导的单纯高胆固醇血症动物模型中起着重要的作用。     

ApoE基因敲除小鼠和C57BL/6J小鼠血脂及主动脉组织病理学的对比观察

目的高脂饲养的雄性载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化模型的建立。方法选取8周龄雄性ApoE-/-小鼠,以C57BL/6J小鼠为对照组,高脂饲养8周后测定血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度胆固醇脂蛋白、低密度胆固醇脂蛋白含量;小鼠心脏主动脉根部石蜡切片,常规HE染色,观察和测量动脉粥样硬化斑块的组织学特点及病变面积。结果ApoE-/-小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量显著高于同年龄同性别C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL/6J小鼠;高脂饲养下16周龄ApoE-/-小鼠主动脉根部切面可见明显的脂质斑块。结论在该浓度的高脂饲料饲养条件下,ApoE-/-小鼠在16周龄已形成脂质斑块,是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。     

木犀草素改善高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝

木犀草素是一种大量存在于蔬菜、水果以及天然药草中的天然黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、改善胰岛素抵抗和免疫调节等作用。肥胖常伴随非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发生,因此研究木犀草素改善NAFLD具有极其重要的意义。文章用高脂饮食(high fat diet,HFD)喂养C57BL/6小鼠20周来建立非酒精性脂肪肝小鼠模型,同时设立低脂饮食(low fat diet,LFD)作为正常对照组,高脂添加0.01%木犀草素(HFD+Lut)作为实验组。用苏木精伊红染色和油红染色检测肝脏中脂质积累,用实时定量荧光聚合链式反应(real-time polymerase chain reaction,Real-Time PCR)检测脂质合成基因及其转录因子相关基因的表达。结果表明,木犀草素能够减少小鼠肝脏中脂质积累,并且能抑制小鼠肝脏内脂质合成的基因以及转录因子的表达,探明了木犀草素能改善HFD导致的NAFLD及其作用机制。     

长期高脂饮食对C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的影响

笔者运用基因芯片技术研究长期高脂饮食对C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的影响,探究长期高脂饮食导致小鼠冠心病发生的分子机制.选用12只4周龄C57BL/6雄性小鼠,随机分为正常饮食组(C)和高脂饮食组(H)各6只,分别喂饲标准饲料和高脂饲料16周.随后提取每组小鼠骨骼肌组织进行基因芯片分析并对数据进行统计.C与H组共708个差异表达基因,其中表达上调基因417个,表达下调基因289个.疾病(Disease)分析结果显示4个与心血管疾病密切相关的基因分别为APOC3,APOD,ADM,PTGIS.2个与冠心病密切相关基因分别为MGP,APOC3.长期高脂饮食可以引起C57BL/6小鼠冠心病相关基因表达的显著变化.     

高强度间歇训练和中等强度持续训练对高脂膳食雌性小鼠肝脏巨噬细胞浸润的影响

为比较高强度间歇训练和中等强度持续训练对高脂膳食雌性小鼠肝脏巨噬细胞浸润的差别.采用3周龄雌性C57BL/6J小鼠分组进行高脂或普通膳食喂养，15周后从高脂膳食组筛选出超重小鼠，随机分为高脂对照组（HFD）,中等强度持续训练组（MICT）和高强度间歇训练组（HIIT）,继续高脂喂养.其中MICT和HIIT组小鼠进行12周跑台干预，坡度25°,5次/周.运动方案：MICT组采用50%～70%V_O2peak的运动强度，持续45 min; HIIT组进行1 min高强(90%～100%V_O2peak)+2 min低强(50%～70%V_O2peak),每次跑动距离与MICT组相等.与HFD组相比，MICT和HIIT均能降低高脂膳食雌性小鼠肝组织TG含量，减少肝组织内空泡和脂滴，改善肝组织损伤，抑制肝组织内M1型巨噬细胞相关基因和蛋白表达，促进M2型巨噬细胞相关基因和蛋白表达，但HIIT组优于MICT组.运动距离相同情况下，HIIT比MICT更能改善高脂膳食雌性小鼠肝细胞脂肪变性，降低肝组织炎症状态，这可能与肝内巨噬细胞从M1极化...     

动脉粥样硬化模型小鼠血脂与血清胆红素关系的探讨

目的探讨动脉粥样硬化小鼠血脂与血清胆红素之间的关系。方法选取12月龄雄性动脉粥样硬化小鼠及同龄同性别正常对照C57BL/6J小鼠,分别测定血清甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B水平、血清总胆红素、直接胆红素。结果动脉粥样硬化小鼠胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、载脂蛋白B水平与同龄同性别的C57BL/6J小鼠相比极显著升高(P<0.01);动脉粥样硬化小鼠直接胆红素水平与C57BL/6J小鼠相比极显著降低(P<0.01)。结论动脉粥样硬化小鼠血脂与血清胆红素相关。     

基于肠道菌群分析探讨黄芪多糖调节高脂饮食小鼠血糖的可能机制

为探讨黄芪多糖在改善高脂饮食的小鼠空腹血糖和空腹胰岛素水平显著升高的作用机制及与肠道菌群的关系,选用30只C57小鼠,随机分为3组(n=10),分别为对照组(C,正常饮食)、模型组(M,高脂饮食)、黄芪多糖组(D,高脂饮食和20g/L浓度APS溶液)。喂养11周后收集空腹血液样品和粪便样本,利用基于细菌 16S rDNA 测序的元基因组学方法,分析APS 对高脂喂养小鼠肠道菌的影响;同时检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)和血清炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果发现高脂饮食使小鼠空腹血糖和空腹胰岛素水平显著升高,明显改变了小鼠肠道菌群结构, IL-6和TNF-α水平也显著升高。而服用APS的高脂饮食的小鼠,空腹血糖和空腹胰岛素水平也显著下降,恢复了单纯高脂饮食引起的肠道菌群结构改变,IL-6和TNF-α水平也有所下降(但无统计学意义)。推测黄芪多糖显著降低小鼠血糖水平可能是通过改变高脂饮食小鼠肠道菌群结构及调节炎性因子IL-6和TNF-α水平而实现的。     

黑枸杞花青素对C57BL/6小鼠血糖、血脂及脂肪细胞形态的影响

为研究黑枸杞花青素对小鼠血糖、血脂及脂肪细胞形态的影响,本试验将8周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组、花青素组和吡格列酮组,灌胃给药8周后,对小鼠的体质量、肝脏系数、Lee's指数、血糖、血脂和脂肪细胞形态进行测定。结果表明:黑枸杞花青素能有效地降低小鼠体质量、肝脏系数及Lee's指数,改善血糖及胰岛素耐受,降低小鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白的含量,提高血清中高密度脂蛋白含量,同时黑枸杞花青素能够减少小鼠腹股沟白色脂肪细胞中脂滴的大小。因此,通过分析可以得出黑枸杞花青素能够降低C57BL/6小鼠血糖、血脂水平,减少脂质积累。     

海糖平改善小鼠脂质代谢紊乱作用研究

研究射干茎叶提取物-海糖平（HTP）对高脂饲料诱导的小鼠脂代谢紊乱的改善作用. ICR小鼠连续12周高脂饲料喂养诱发脂质代谢紊乱. 造模成功后分别灌胃给予海糖平50,100,200 mg/kg BW,治疗4周,并以吉非罗齐胶囊（100 mg/kg BW）作为阳性对照药. 治疗结束后检测肝脏和血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）含量,附睾脂肪组织重量等指标,同时做肝脏组织病理检查. 结果显示海糖平能够降低肝脏中TG、TC水平及血清中TG水平,减轻附睾脂肪组织重量,减少肝细胞中脂滴的蓄积. 证实海糖平具有改善高脂饲料喂养小鼠的血清和肝脏中脂质代谢紊乱的作用.      

长期游泳运动对高脂饲料喂养大鼠肝脏中CYP7A1及D-双功能蛋白表达的影响

探讨长期耐力运动对高脂饲料喂养的大鼠胆汁酸生成关键酶CYP7A1和D-双功能蛋白(DBP)表达的影响.30只大鼠随机分为高脂组(HC)、高脂运动组(HE)、正常组(C).高脂组和高脂运动组采用高脂饲料喂养.高脂运动组喂养4周后,进行16周的游泳运动.20周后,测定三组大鼠肝脏中CYP7A1和DBP的表达,血清中生化指标的变化以及粪便中的胆汁酸,并取肝脏作病理切片分析.测定结果显示,高脂运动组较高脂组肝脏的脂肪变性明显好转,血清中chol、TG、LDL、CP均趋向正常;高脂运动组肝脏中CYP7A1、DBP的表达明显增加.长期耐力运动能够使高脂喂养大鼠肝脏中CYP7A1、DBP表达显著增加,增加大鼠胆汁酸的产生和排泄,减轻高脂饲料喂养导致的脂类代谢失调.     

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。     

肥胖,高脂血症性脂肪性肝炎模型的建立

为建立大鼠肥胖、高脂血症性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）的动物模型。取雄性ＳＤ大鼠１９只,随机人分为模型组（ｎ＝１０）和正常组（ｎ＝９）。模型组喂高脂饮食,即普通饲料基础上加１０％猪油,２％胆固醇。正常组喂普通饲料。观察一般情况血清肝功能、血脂,并行病理学检查。模型组体重、肝指数、血清总胆固醇、游高脂肪酸及转氨酶均显著高于正常组;病理学均出现弥漫性肝细胞脂肪变性,且１００％存在小叶内炎症,８０％出现汇管区     

茶多酚EGCG对小鼠棕色脂肪代谢的影响

 随着对棕色脂肪组织（BAT）在成人体内具有生物学功能的肯定,棕色脂肪已经成为当今医学研究的热点。采用动物实验、病理组织学方法及免疫组化,观察了表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对棕色脂肪代谢的影响。结果表明,在体重和鼠龄相近时,不同种属小鼠肩甲间棕色脂肪组织HE 染色后的形态不同,C57BL/6 脂肪细胞中的空泡大,胞浆含量少,BALB/c 小鼠脂肪细胞中的空泡小,胞浆含量多,昆明小鼠居中。给昆明小鼠口服不同剂量EGCG 后,150 mg/kg EGCG 能降低小鼠体重的增长,降低附睾周围白色脂肪组织的重量,但没有统计学意义。同时,EGCG 能降低棕色脂肪细胞内脂肪含量,增加胞浆含量,具有统计学意义（P<0.001）。免疫组化结果表明,EGCG 能增加棕色脂肪细胞内脱偶联蛋白1（UCP1）的表达,增加能量代谢。因此,不同种属小鼠的BAT 具有不同的组织形态学特点,这为研究BAT 小鼠的选择提供了依据;EGCG 能够调节小鼠棕色脂肪的代谢功能,这为进一步研究作用机制打下了基础,同时为茶叶在脂肪代谢方面的调节提供了一种新的思路和依据。     

保肝Ⅰ号抗CCl4联合高脂饲料所致大鼠肝纤维化研究

研究保肝Ⅰ号（BGYH）对四氯化碳（CCl₄）和高脂饮食联合诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用. 40% CCl₄-大豆油灌胃联合高脂饲料建立肝纤维化模型. 建模结束后模型组重新分组后用BGYH高、中、低剂量灌胃连续治疗17 d,进行肝脏病理和血清学检测. 检测结果表明BGYH能够减轻肝纤维化大鼠的脂肪变性和组织增生,降低肝纤维化模型大鼠血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）含量,增加血清白蛋白（ALB）,降低血清中透明质酸（HA）,肝脏中羟脯氨酸（Hyp）和Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）的. BGYH能够降低肝纤维化大鼠肝脏中的转氨酶水平,保护肝功能,减轻肝脏脂肪变性和纤维组织增生,具有显著抗肝纤维化的作用.      

高脂血症大鼠肾脏Angptl4变化及辛伐他汀的保护作用

为探讨高脂血症大鼠（Rattus norregicus）肾脏中Angptl4的变化及辛伐他汀的保护作用,将45只雄性SD大鼠随机平均分为3组：正常对照组（NG）给予普通饲料喂养;高脂饮食组（HG）给予高脂饲料喂养;辛伐他汀组（SG）在高脂饲料喂养的基础上给予辛伐他汀10mg·kg^-1·d^-1水溶液灌胃。分别于第4、6、lO周时各组随机选取5只大鼠,检测大鼠24h尿蛋白及血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,石蜡切片HE染色观察大鼠肾小球的损害,免疫组化及Western blot检测大鼠肾脏Angptl4蛋白分布及表达。结果显示,于第4周开始,HG组和sG组大鼠血清TC和LDL-C水平升高。实验第10周时,HG组和SG组大鼠24h尿蛋白定量升高;大鼠肾组织HE染色光镜下观察显示：肾小球呈轻微分叶状,系膜区增宽和基质增多不明显,但肾小球内有较明显的空泡变性,SG组大鼠的病变明显轻于HG组;免疫组化和免疫印迹检查发现,大鼠肾脏Angptl4明显增多,SG组的表达较HG组有减少。研究认为,高脂血症可引起肾脏肾小球明显病变,可能是肾小球内的足细胞分泌Angptl4的增多引起;而辛伐他汀则可能使高脂饮食时足细胞分泌Angptl4减少,从而减轻高脂血症时肾小球受到的损害。     

Spexin转基因小鼠的构建及表型初步分析

Spexin是一种具有多种生物学功能的神经肽,在代谢疾病及神经系统疾病中发挥重要作用.为了深入研究spexin的生理功能和相关机制,构建了spexin转基因小鼠,通过检测血液中spexin含量以及糖耐受实验,对模型小鼠进行了初步的表型分析.利用piggyBac(PB)转座子技术培育spexin转基因小鼠,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别在基因层面和蛋白层面验证了模型动物是否构建成功.之后用饲喂高脂饲料的雄性小鼠进行糖耐受实验,对转基因模型小鼠进行表型分析.PCR结果显示,以靶向spexin的两对引物扩增,转基因型小鼠基因组DNA中能分别扩增出300 bp和301 bp的片段,而野生型小鼠则不能.ELISA结果中,转基因型小鼠血清中spexin含量较野生型小鼠显著升高;同一表型中,雌雄小鼠间血清中spexin水平无明显差异.饲喂高脂饲料85 d内,转基因型小鼠和野生型小鼠体重变化未观察到显著差异;糖耐受结果显示,转基因型小鼠每个时间点血糖浓度均低于野生型小鼠,且在15 min时具有显著性差异.结果显示成功构建了过表达spexin基因的小鼠模型.spexin表达水平的升高在一定程度上提高了C57BL/6小鼠的糖耐受能力.该模型为进一步研究spexin基因在动物体内的功能以及在代谢疾病发病机制中的作用奠定了基础.     

两种乳杆菌对高脂小鼠降血脂作用的研究

高血脂与心血管疾病密切相关,研究发现补充具有胆盐水解酶活力的益生菌可以有效改善脂质代谢,因此对实验室现有的水解胆盐能力较强的植物乳杆菌AR113和水解胆盐能力较差的干酪乳杆菌LC2W进行体内降血脂试验,探讨其对高脂饮食小鼠血脂的影响。以ICR小鼠为实验动物,随机分成4组:对照组、高脂模型组、高脂模型+菌株AR113组、高脂模型+菌株LC2W组。4周造模成功后开始连续灌胃菌液4周,研究其对小鼠体重、脏器指数、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肝脏TC和甘油三酯(TG)的影响。结果显示菌株AR113比LC2W降低血清血脂和肝脏血脂效果更好,菌株AR113对高脂血症小鼠具有显著的降胆固醇作用。     

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

目的 对 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢 冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。 方法 采用 DAP213 方法冷冻保存了 C57BL / 6 J 及 SCARB2、PSGL1、IGB3S 三 个遗传工程小鼠 10 日龄幼鼠的卵巢,将四个品系 10 日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到 4 周龄 C57BL / 6 J 及 C57BL / 6 J( Cg) —Tyrc- 2 J / J( B6 albino)受体雌鼠,术后饲养 5 周与 10 周龄性成熟 C57BL / 6 J 雄鼠交 配,观察移植出生幼仔。 结果 C57BL / 6 J 新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino 受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。 结论 采用 DAP213 方法冻存 C57BL / 6 J 及以 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方 式是小鼠资源库保存的一个重要补充。     

不同配方高脂饲料构建高血脂症大鼠模型的比较及评价

摘要：目的 在大鼠高脂饲料中添加膨润土以提高高脂饲料的硬度及可食性,探讨其与传统高脂饲料配方相比,对建立高血脂大鼠模型的作用。方法 雄性SD大鼠50只,按体重随机分成对照组10只、普通高脂饲料组和膨润土高脂饲料组各20只。动物自由摄食饮水,每周称量大鼠体重,实验前后检测大鼠血清中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量,喂养8W后测量每只大鼠的体长、脂肪重量（肾周脂肪和附睾脂肪）,计算其脂体比和Lee’s 指数。结果 1、膨润土高脂饲料组体重显著高于对照组（P＜0.01）,与高脂饲料组相比增高不明显。2、与对照组比较,高脂饲料组和膨润土高脂饲料组血清TC、TG和LDL-C的水平均显著增加（P＜0.01）。高脂饲料组和膨润土高脂饲料组血清中HDL-C有降低的趋势,膨润土高脂饲料组降低的趋势更明显,但差异均无统计学意义。与高脂饲料组比较,膨润土高脂饲料组TC水平显著增高（P＜0.05）。3、与对照组相比,高脂饲料组和膨润土高脂饲料组大鼠身长、肾周脂肪重量、附睾脂肪重量、脂体比和Lee’s指数显著增加（P＜0.05）。同时与高脂饲料组相比,膨润土高脂饲料组附睾脂肪重量显著增加（P＜0.05）。结论 高脂饲料组和膨润土高脂饲料组饲料喂养SD大鼠8周后,均能够诱导大鼠高脂血症模型,但膨润土高脂饲料组诱导高脂血症大鼠模型优于普通高脂饲料组。