α-淀粉酶/糖苷酶抑制剂产生菌株PW638的分类地位及其产物的发酵、性质与应用研究(英文)

从土壤中分离得到了一株α-糖苷酶抑制剂产生菌株PW638.通过多相分类学研究将菌株PW638初步确定为白浅灰链霉菌(Streptomyces albogriseolus).该菌经10 L发酵罐水平发酵,发酵液中可积累一定量的A-糖苷酶抑制剂.它们能够显著地抑制重组人源A-淀粉酶和糖苷酶,并能有效降低小鼠餐后高血糖.因此,对于白浅灰链霉菌PW638的进一步研究有助于新型天然A-糖苷酶抑制剂药物的研发。     

灰色链霉菌的一个新亚种

在研究敦煌壁壁画微生物生态学的过程中，分离得到株编号为４１２８的链霉菌。经对该菌株形态、培养特征、生理特性、碳源利用，抗菌性能等方面进行研究后，发现它与灰色链霉菌比较相似，但又有明显区别，认为是一个新亚种，命名为灰色链霉菌敦煌亚种。     

一株纤维素降解菌的分离、鉴定及降解特性初步研究

从长沙宁乡灰汤温泉附近的水样中分离获得1株具有较强纤维素降解能力的菌株,命名为NX1-1,该菌株最适生长温度为40℃,最适生长pH5.0~8.0.菌株形态学以及ITS rDNA和28S rDNA D1/D2序列分析的鉴定结果表明,该菌株属于Aspergillus fumigatus这个种.对该菌株产酶特性进行了初步研究,最适产酶条件为:氮源(NH4)2SO4,接种量10%,40℃,初始pH6.0,培养60~96 h.     

纤维素产生菌汉氏葡糖醋杆菌HDM1-3全基因组测序分析

为全面了解汉氏葡糖醋杆菌(Komagataeibacter hansenii,K.hansenii)HDM1-3的发酵特性，为提高纤维素产量提供基因组信息，对其基因组数据进行测序分析。采用PacBio RSⅡ平台对该菌株进行全基因组测序，基因组由1个3 659 612 bp染色体和2个质粒组成，编码3 820个蛋白质，含有7个纤维素合成酶基因。基于16S rRNA的系统发育分析表明了K.hansenii HDM1-3相对于醋酸杆菌科菌株的进化地位。在基因组中，共注释到碳水化合物活性酶88个。通过KEGG注释到代谢通路相关基因共3 132个，其中碳水化合物代谢相关基因287个。通过基因组测序获得了K.hansenii HDM1-3完整的基因组信息，为改造该菌株提供了基因组学基础。     

小白链霉菌(Streptomyces albulus)的原生质体制备研究

广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质体的最佳菌龄为稳定期初期即培养40h;S发酵液中添加2·0%甘氨酸可使原生质体形成率最高;以破坏链霉菌细胞壁效果最好的溶菌酶进行酶解,确定最佳酶解温度为为35℃、最佳酶解时间为180min、最佳溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1;在以上最佳原生质体制备条件下可获得纯净且量多的S.albulus原生质体,形成量达1.74×108cfu·mL-1,为S.albulus原生质体的进一步遗传育种奠定了良好的基础。     

神农架地区土壤链霉菌所产抗生素类型的研究

用综合纸层层析法分析了72株从神农架林区和自然保护区土壤分离出来的,并经过鉴定的链霉菌产生的抗生素类型,将其与已知抗生素的纸层层析图谱进行比较。结果表明,供试的链霉菌能产生出多种不同的抗生素,有的层析谱型易于归类;有的层析谱型则缺乏规律性,不能确定其所属类型。分析结果还表明抗生素的产生具有菌株特异性。     

长链烷烃降解菌生长条件优化及降解特性研究

采用微生物学方法,从俄国生物制剂Ленойл中筛选出一株可降解长链烷烃的优势菌株,该菌株可利用柴蜡碳源为唯一碳源和能源.通过对该菌株在不同温度、pH,以及不同柴蜡碳源初始浓度下的生长量和柴蜡碳源降解率的研究,确定该菌株的最适生长温度为10℃,最适pH为7.6,可在柴蜡碳源初始浓度可达2000 mg/L的培养基中生长并有较强的柴蜡碳源降解能力.在10℃、pH为7.6、培养基体积25 mL、接种量为10％ （v/v）、摇床转速在170rpm的条件下,培养6d后可使400 mg/L的柴蜡碳源降解率达87％以上,可用作长链烷烃污染的微生物修复领域.     

具有生防能力的木霉菌(Trichoderma spp.)与两株大豆根腐病病原菌(Fusarium oxysporum、Rhizoctonia solani)对碳、磷、铁的竞争研究

通过室内试验研究比较了具有生物防治能力的5株木霉菌株与2株大豆根腐病病原菌(Fusarium oxysporum、Rhizoctonia solani)对C、P、Fe等营养元素的竞争。试验结果表明病原菌F.oxysporum利用葡萄糖的速度显著的高于所测试的木霉菌株(菌株MM9除外),而木霉菌株MM9、S7、SH7、S2利用葡萄糖的速率显著的高于病原菌R.solani。木霉菌株S7、S2利用可溶性磷的速率显著的高于病原菌F.oxysporum。木霉菌株MM35利用可利用铁的速率显著的高于病原菌(F.oxysporum、R.solani)。木霉菌与大豆根腐病病原菌(F.oxysporum、R.solani)对C、P、Fe营养的竞争呈现多样性。     

传统发酵豆酱制品中霉菌菌群的动态分析

以黑龙江省齐齐哈尔市拜泉县农家自然发酵黄豆酱为研究对象,通过传统微生物学方法对发酵不同时期的发酵豆酱制品中的霉菌进行分离、培养、计数和初步鉴定,共检测到犁头霉属(Absidia),曲霉属(Aspergillus),米曲霉(Aspergilleas oryzae),毛霉属总状枝毛霉组(Mucor racemosus),雅致放射毛霉属(Actinomucorelegans),毛霉属大毛霉组(Mucedo)六种霉菌,其中米曲霉(Aspergillusoryzae)在整个发酵过程占绝对优势,分析了豆酱发酵过程中微生物种群的数量关系、种群动态变化规律,为筛选优良的豆酱发酵菌株和功能菌株,实现工业化生产豆酱提供理论依据。     

金属热变形应力-应变曲线数学模型的研究与应用

该文较全面地分析了国内外关于金属热变形应力-应变曲线的各种数学模型,对两种类型的热变形应力-应变曲线,即动态回复型和动态再结晶型曲线进行了讨论.通过对35CrNi3MoVA钢的热变形过程的详细研究,首次提出了一种新的适合于工程应用的真实应力-应变曲线的数学模型:σ=Aε^aε^bexp[-(cT+dε)],该模型为计算变形力和进一步实现控制锻造提供了很有价值的参考依据.     

PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响

为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。     

紫外光谱法测定紫罗兰酮异构体

本文采用紫外分光光度法,对紫罗兰酮混合物中的α-紫罗兰酮和β-紫罗兰酮两种异构体同时进行测定。α-异构体的乙醇溶液的最大吸收波长为231nm(摩尔吸光系数ε=1.5×10~4)。而β-异构体的乙醇溶液的最大吸收波长为301nm(摩尔吸光系数ε=1.2×10~4),用浓度范围为0-10uglml的紫罗兰酮乙醇溶液制得标准曲线符合比耳定律。该法应用于紫罗兰酮系列产品的分折,也可用于合成香料的理论研究工作方面。该法简便、精确、快速,分折结果令人满意。     

白色链霉菌(Streptomyces albus)HS1产豆豉纤溶酶发酵条件优化

从豆豉中筛选的白色链霉(Streptomyces albus)HS1,产生的豆豉纤溶酶具有较好的体外溶栓效果.利用单因子和正交试验得到该菌株产酶的最佳发酵条件:大豆粉0.3,蔗糖8%,MgSO40.15%,KH2PO40.2%,NaC10.9%,生豆浆6.67%;150 mL三角瓶装量为30 mL;接种量2%;接种龄36h,初始pH 6.5,摇床转速150 r/min,28 oC振荡培养60 h;其发酵上清纤溶活性可达207.92 IU/mL.与优化前99.28 IU/mL相比,提高了1.09倍.该菌株产DFE的模式为滞后合成型.     

3种促生菌对豌豆和大豆种子萌发及幼根生长的影响

以链霉菌Streptomyces sp. FXP04、侧孢短芽孢杆菌Brevibacillus laterosporus Y、皮尔瑞俄类芽孢杆菌Paenibacillus peoriae NT 3种促生菌为研究对象，调查它们对豌豆和大豆种子萌发及幼根生长的影响．结果表明，3种促生菌在不同浓度下(OD₆₀₀=0.5,OD₆₀₀=1)对豌豆和大豆种子的萌发都没有显著促进作用．菌株Brevibacillus laterosporus Y和菌株Paenibacillus peoriae NT能够促进豌豆和大豆幼根伸长，菌株Streptomyces sp. FXP04可以促进大豆幼根伸长，对豌豆幼根伸长无显著促进作用．3种促生菌都能够促进豌豆和大豆侧根的数量增多．     

以[Mo8O26]4-阴离子为构筑块的有机-无机化合物的合成及结构

利用水热合成法,采用刚性小尺寸咪唑为桥链配体与乙酸铜和钼酸铵反应,得到了一种新型八钼酸盐[Cu_4(imi)_(10)Mo_8O_(26)]·H_2O.使用红外光谱、元素分析、热重分析、ICP以及单晶X-射线衍射对化合物进行了详细的表征.单晶分析结果显示:化合物1中4个Cu~(2+)与8个咪唑分子中的氮原子连接且同β-[Mo_8O_(26)]~(4-)中的端氧连接,另两个咪唑中的氮原子取代β-[Mo_8O_(26)]~(4-)中的氧原子,形成"波浪型"的一维链.     

鳜鱼肌球蛋白重链基因的原核表达及多克隆抗体的制备

肌球蛋白重链(MyHC)是肌肉中的主要结构和功能蛋白,在肌肉收缩过程中起关键作用.根据鳜鱼肌球蛋白重链基因中高亲水性区域DNA设计一对特异性引物,将该基因片段亚克隆到pET-32a质粒,构建重组表达载体并转化入大肠杆菌BL21中.诱导条件优化实验结果显示,该菌株经0.8 mmol/L IPTG诱导3 h可大量表达融合蛋白.将经亲和层析纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.ELISA和免疫组化测试结果表明:此抗体有较好的特异性和抗原性.鳜鱼MyHC基因表达的研究为深入研究肌球蛋白重链的功能特性及其对肉质性状的影响奠定基础,为提高鱼类肉质提供理论基础和技术支持.     

跨界基因沉默菌株的快速构建及对靶标基因干扰能力的检测

"跨界基因沉默"是一种利用大肠杆菌在哺乳动物细胞中传递小干扰RNA并引起基因沉默的新颖技术,具有实用、稳定和低成本等优点.该技术通过构建一种能转录出短发夹RNA(shRNA)的大肠杆菌,而这种大肠杆菌产生的shRNA能靶向哺乳动物细胞中的特定基因,从而引发RNA干扰(RNAi).本文用RecA同源重组的方法将跨界基因沉默质粒的工作元件快速地整合到大肠杆菌的染色体DNA上,构建了跨界基因沉默菌株.通过吖啶橙染色实验证明了跨界基因沉默菌株能够入侵哺乳动物细胞,最后Western blot结果表明跨界基因沉默菌株可以对靶标基因产生干扰作用.该技术的完善将进一步促进工程菌的研发和利用.     

低能离子注入L－酸生产菌生物学效应的研究

乳酸是目前世界上公认的3大有机酸之一,其广泛应用于食品、医药、化工、制革、纺织、环保和农业等诸多领域.目前随着白色泡沫污染日益严重,可生物降解的聚乳酸产品作为有可能取代造成环境污染的白色热塑产品也越来越受到人们的关注.目前,化学合成法生产乳酸均为DL型,无法达到聚L-乳酸的要求.而用微生物发酵法生产L-乳酸可以得到较高的纯度要求.本研究以低能氮离子注入L-乳酸菌,筛选到一株产量比出发菌株提高lO%的高产株RSl2-6c.     

三羟基长链酰胺（S—Ⅲ）的分离和结构确定

从中国南海西沙群岛永胜岛附近海域采集到的一种海绵(种属未定)中分离到一种新的三羟基多分支长链酰胺(S-Ⅲ),熔点92～93℃,分子式C_(46)H_(93)NO_4(M=723),通过对它的IR,MS,~1HNMR,(13)CNMR及~(13)CNMR DEPT实验等波谱数据分析,确定了S-Ⅲ的结构为N-(1-羟甲基-2-乙基-4-甲基-3,18-二羟基)十九烷基-二十三脂肪酸酰胺。     

金霉素生物合成基因ctcK的研究

为检测ctcK基因的功能,利用基因工程技术在金色链霉菌J13(Streptomyces aureofaciens J13)上构建ctcK基因缺失工程菌SK12(ΔctcK),并分析了其次级代谢产物的变化.经质谱分析显示,工程菌SK12代谢物中检测到去甲基金霉素m/z=465.10[M+H]~+的分子离子峰,但未检测到金霉素m/z=479.12[M+H]~+的分子离子峰,这与出发菌J13代谢物的检测结果相反.结果表明,ctcK基因的失活阻断了金霉素的生物合成代谢流,使工程菌SK12主要积累去甲基金霉素,显示ctcK基因参与金霉素C-6位甲基化.本研究初步阐明了ctcK基因的功能,同时获得了一株主产去甲基金霉素的工程菌.