瓢虫DNA的提取研究

对鞘翅目瓢虫科昆虫的基因组ＤＮＡ进行了提取，经紫外透射分析仪检测，ＤＮＡ带子整齐；又经蛋白质核酸分析仪测定，ＯＤ值在１．６～１．８的样品占６２．５％，其余均接近这种纯度．这种ＤＮＡ提取方法对瓢虫的新鲜标本、酒精浸泡标本及干制标本均有较好的效果．     

瓢虫干标本基因组DNA的提取及RAPD分析

实验对保存多年的瓢虫干标本进行了基因组 ＤＮＡ提取和 ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增。结果显示 ＤＮＡ分子的提取与保存年代长短无直接关系;ＲＡＰＤ－ＰＣＲ增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,分子量大小约为 １９８４ｂｐ～６３０ｂｐ;不同种瓢虫的 ＤＮＡ用同一引物,扩增片段是多态表现,同一种瓢虫的干标本保存时间虽不同,但扩增产物中均具有相同的ＤＮＡ片段。     

固定标本的DNA提取及PCR扩增

报道富尔马林、酒精固定的日本绒螯蟹标本的ＤＮＡ提取及ＰＣＲ扩增，并与冷冻、煮沸标本进行了比较。结果表明，福尔马林固定标本与酒精固定标本一样可以撮加入的蛋白酶Ｋ量越多，ＤＮＡ的回收率越高。以提取的ＤＮＡ为模板，进行了线粒体ＤＮＡ１２ＳrＲＮＡ和Ｄ－１ooＰ基因片段的ＰＣＲ扩增，经琼脂糖产电泳ＰＣＲ扩增产物后均得到了与期待的碱基长度相一致的清晰谱带。     

稻蝗属基因组DNA提取方法

运用一种改进的方法对稻蝗属新鲜标本、酒精浸泡标本及干标本进行基因组ＤＮＡ提取,样品经检测,谱带基本呈线形,无拖尾,ＯＤ（２６０／２８０ｎｍ）值６６．７％在１．６～１．８之间。     

牛α—s1酪蛋白基因3‘端DNA的PCR扩增,克隆及鉴定

本研究以牛血总ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ技术扩增牛α－ｓ１酪蛋白基因的５＇端３．６ｋｂＤＮＡ片段和３＇端１．５ｋｂＤＮＡ片段的调控区序列，得到了相应的特异性扩增片段．用Ｋｌｅｎｏｗ处理后，将两个扩增片段分别与经Ｓｍａｌ酶切的ｐＵＣ１８质粒载体用Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化大肠杆菌ＪＭ１０９．在含有Ｘ－ｇａｌ，ＩＰＴＧ和Ａｍｐ的选择培养基上培养．从白色菌落中提取质粒ＤＮＡ，进行限制酶切鉴定．结果得到一个插入有１．３ｋｂＤＮＡ片段的阳性克隆．对其进行部分序列分析表明，该片段为５＇端缺失约１７０ｂｐ的牛α－ｓ１酪蛋白基因３＇端及下游区序列．     

用PCR法检测人巨细胞病毒DNA

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法检测患者尿液中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ．结果表明，自行设计合成的引物位于ＨＣＭＶ基因组早期蛋白基因区，经ＰＣＲ仪扩增一段长４３０ｂｐ的特异序列片段，对正常人基因组ＤＮＡ或其它疱疹病毒ＤＮＡ无交叉反应．此法可检测出少至１０－１６ｇ（０．１ｆｇ）的病毒ＤＮＡ．通过对３５份尿液标本的检测，比较ＰＣＲ法和组织培养法的检测结果完全一致     

花生根瘤菌基因组文库的构建

以具有高吸Ｈ２活性的花生根瘤菌Ｌ８－３为出发菌株提取总ＤＮＡ，经ＢａｍＨＩ不完全酶切后，获得２０ｋｂ左右的ＤＮＡ片段，按Ｉｓｈ－Ｈｏｒｏｗｉｃｚ和Ｂｕｒｋｅ方法，与具有多克隆位点的ＣｏｓｍｉｄｐＬＡＦＲ３克隆载体连接，经体外包装、转导Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１，在选择培养基平板上获得１万多个重组克隆子．随机挑选２２个克隆子进行分析，其中１９个克隆子携带外源ＤＮＡ片段，平均长度为２１．４ｋｂ，文库有效克隆子数和插入ＤＮＡ片段均达到建库要求．ＰＣＲ筛选和生物素探针杂交初步结果显示，重组质粒中所携带的外源ＤＮＡ可能含有我们所需的吸Ｈ２基因．     

瓢虫的16SrDNA序列扩增

提取酒精浸泡六斑月瓢虫标本的DNA,探讨酒精浸泡鞘翅目瓢虫科昆虫标本的核酸的提取方法,对提取得到的核酸进行PCR扩增,得到500bp大小的16SrDNA片段,确定这一方法提取的核酸进行PCR反应时的循环参数。     

南充市郊瓢虫科昆虫的初步研究

2003年3月-2004年4月，在南充市郊区共采得瓢虫标本700余头，经鉴定隶属7亚科19属，共32种，26个变型并首次发现了中国境内龟纹瓢虫的一个新变型-盔斑变型Propylea japonica ab．helmet．     

应用PCR技术检测结核菌的临床研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２４４例呼吸疾病患者临床标本进行结核菌ＤＮＡ检测，并同时与涂片抗酸染色结果进行比较。结果显示：１１２例结核标本涂片和ＰＣＲ检测阳性率分别为１６．１％和５２．７％，两者差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。９４例涂阴结核标本ＰＣＲ阳性达４５．７％。结果表明应用ＰＣＲ技术检测结核杆菌ＤＮＡ具有快速敏感、特异性较高等优点，尤其对涂阴病人具有较大诊断价值     

瓢虫跳小蜂属二新种(膜翅目:跳小蜂科)

描述瓢虫跳小蜂属２个新种，即云南瓢虫跳小蜂，Ｈｏｍａｌｏｔｙｌｕｓｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓｓｐ．ｎｏｖ．，和黄盾瓢虫跳小蜂，Ｈｏｍａｌｏｔｙｌｕｓｓｃｕｔｅｌａｒｉｓｓｐ．ｎｏｖ．．标本采自云南省     

瓢虫跳小蜂属二新种

描述瓢虫跳小蜂属２个新种，即云南瓢虫跳小蜂，Ｈｏｍａｌｏｔｙｌｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ。，和黄盾瓢虫跳小蜂，Ｈｏｍａｌｏｔｙｌｕｓ ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ．标本采自云南省。     

RAPD技术在龙须菜遗传多样性研究中的应用：Ⅰ.总DNA的提？…

比较两种从龙须菜中提取总ＤＮＡ的方法,这两种方法得到的染色体ＤＮＡ具有较好的完整性,从ＤＮＡ的产量、蛋白质含量等指标可以看出,ＣＴＡＢ法优于蛋白酶Ｋ法。实验对龙须菜ＲＡＰＤ反应条件进行了优化：在２５μＬ反应体系中,含有Ｍｇ＾２＋２．５ｍｍｏｌ／Ｌ,ｄＮＴＰ１００μｍｏｌ／Ｌ,总ＤＮＡ２５ｎｇ,引物０．２μｍｏｌ／Ｌ和Ｔａｑ酶１Ｕ,经９４℃变性１ｍｉｎ,３５℃退火１ｍｉｎ,７２℃延伸２ｍｉｎ,３５个     

杉木DNA提取方法的研究

在杉木新鲜针叶和干叶ＤＮＡ提取过程中，应用ｐＨ值较低，无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质，其中加入２％的β－羟基乙醇可有效地防止酚类物质使变色，提出２出的ＤＮＡ样品产率在６０～２００ｎｍ／ｍｇ．ＦＷ，ＤＡＮ质量和纯度较高，２６０ｎｍ／２８０ｎｍ光密度比值在１．８～１．９，所得ＤＮＡ可直接用于限制性内切酶酶切，并可用于随机引物ＰＣＲ扩增，该方法为杉木分子生物学研究提供基础。     

海刀豆,红树DNA的提取

本文介绍了两种简便、快速的ＤＮＡ提取方法，它们不需要特殊试剂、液氮和柱层析系统、超速离心机等贵重仪器。我们以海刀豆和红树两种盐生植物为实验材料，所制得的ＤＮＡ样品经紫外分光光度计检测：其最大吸收波长均为２５８ｎｍ；Ａ＿（２５８）／Ａ＿（２８０）均为１．８２；与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析分离结果相近；用琼脂糖凝胶电泳检测为均一的谱带。     

酵母菌呼吸缺陷型和野生型线粒体DNA比较

以酒精酵母，ＩＦＦＩ１３００ 材料，建立了以”蜗牛酶＋机械振荡“复俣自理破碎细胞的方法；先提取并纯化线粒体，后从线粒体中提取线粒体ＤＮＡ的方法，得到了紫外吸收Ａ２６０／２８０为１．８２３，琼脂糖电泳为一条带且分子量大λＤＮＡ的线粒体ＤＮＡ。     

用PCR产物制备探讨针检测EB病毒

目的：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物制备地主辛标记探针，通过斑中杂交检测鼻咽癌患咽拭子、活检组织及血标本中ＥＢ病毒ＤＮＡ。方法：按献「４」的方法，以Ｂ９５－８ＤＮ为模权进行ＣＰＲ，用ＰＣＲ产物进行地主辛标记反应获得探针。将梯度稀释的变性探针制成ＮＣ膜，与对照标记的ＤＮＡ进行比较，以测试探针的灵敏度。结果：表明标记探针的检测灵敏度可达０．１ｐｇ，有地对９例患的一（均经ＰＣＲ检测，证实ＥＢ病毒Ｄ     

拟步甲昆虫基因组DNA提取的比较研究

对拟步甲科8种昆虫的新鲜标本及无水乙醇浸泡标本，分别用SDS-蛋白酶K消化法和乙酸钾抽提法进行基因组总DNA的提取．经5次重复实验，结果表明，用两种方法均能从新鲜标本中获得较完整的DNA，且DNA得率较高；而对于无水乙醇保存的标本，提取出的DNA用琼脂糖凝胶电泳检测不出DNA条带，说明标本在保存过程中DNA可能发生了变化，致使提取出的DNA量太少或未分离出DNA．通过对比实验，分析原因，阐明了两种方法的优缺点，并提出了该类昆虫用于DNA提取的标本的保存方法．     

日本松干蚧捕食天敌数量变化的研究

在日本松干蚧显露若虫、雌成虫和卵囊发生期，树枝上捕食天敌是数量是树干上捕食天敌 １．１８倍。在１龄若虫发生期，树干上天敌的数量是树上的１．１０倍。树上同时有日本松干蚧和松大蚜发生时，蚧虫天敌增加了２．９８倍，主要是捕食蚧虫的贤惠义增多了。异色标虫是两种昆虫的主要捕食者，但较多造反蚜虫刻瓢虫、蒙古光瓢虫、华鹿瓢虫主要捕食蚧虫，崦隐斑瓢虫主要捕食蚜主。     

临安大明山异色瓢虫及龟纹瓢虫鞘翅色斑多样性分析

该调查分析了6月底7月初临安大明山异色瓢虫及龟纹瓢虫鞘翅色斑多样性．调查发现,临安大明山共有14个异色瓢虫色斑分布,其中黄底型11个,黑底型3个,黄底型占统计标本64．86％,黑底型占统计标本35．14％,其中黄底型以19斑型所占比例最多,占黄底型标本25．00％;临安大明山共有6个龟纹瓢虫色斑分布,分别为锚斑变型、鼎斑变型、盔斑变型、双二变型、肩斑变型和黄缘变型,占龟纹瓢虫统计标本的比例依次为：39．86％、9．79％、3．50％、26．57％、5．59％、14．69％．对比以往研究数据,由于调查的时间和地理位置有所不同,调查结果也有较大的差异,表明异色瓢虫及龟纹瓢虫的鞘翅色斑多样性受地理和季节等因素的影响．