HIV/HCV共感染患者念珠菌检出情况及相关研究

目的通过研究101例HIV/HCV共感染患者念珠菌检出情况,分析其可能的相关因素.方法采集101例HIV/HCV共感染患者口腔、皮肤、指甲标本,采用CHROMagar念珠菌显色培养基培养、45℃生长试验及API-20C-AUX鉴定系统鉴定到种,同时进行单因素和多因素分析.结果 101例HIV/HCV共感染患者中有44例(43.6%)检出念珠菌,所分离到的44株念珠菌中,有19株白念珠菌(43.2%),9株近平滑念珠菌(20.5%),8株季也蒙念珠菌(18.2%),1株为热带念珠菌(2.3%),1株克柔念珠菌(2.3%),5株涎沫假丝酵母菌(11.4%),1株产朊假丝酵母(2.3%).通过单因素和多因素分析发现:该人群念珠菌检出率的CD4计数、病毒载量比较差异具有统计学意义(P0.01).结论 HIV/HCV共感染患者念珠菌主要菌种是白念珠菌、近平滑念珠菌和季也蒙念珠菌;检出率与CD4计数、病毒载量高度相关;检出率可能对HIV/HCV共感染患者判断临床预后有一定参考价值.     

HIV感染者口腔白假丝酵母菌生长曲线及代时分析

目的:了解HIV感染者口腔白假丝酵母菌的群体生长规律,为口腔念珠菌病的发病机理研究、诊断及防治提供基础。方法:将108株经两次激活的分离自HIV感染者和健康人群口腔的白假丝酵母菌接种于YPD液体培养基37℃培养15 h,每间隔1 h取样采用血球计数板活菌计数法计算活菌数,同时用酶标仪测定OD600值,绘制生长曲线并计算代时。结果:绘制了分离自HIV感染者和健康人口腔的白假丝酵母菌的生长曲线,0~3 h为迟缓期,4~10 h为对数生长期,稳定期开始于10 h,两组白假丝酵母菌的生长曲线基本相似。108株白假丝酵母菌的代时为1.568 h,其中HIV感染者白假丝酵母菌代时为1.354 h,健康人群白假丝酵母菌的代时为1.782 h,HIV感染者来源的白假丝酵母菌生长速度比健康人群来源的白假丝酵母菌快0.428 h,但差异无统计学意义。结论:HIV感染者和健康人群口腔白假丝酵母菌的生长曲线各个时期基本一致,HIV感染者口腔白假丝酵母菌生长速率较健康人群稍快,在口腔念珠菌病致病中的作用需要进一步研究。     

海南医学生中口腔假丝酵母菌分布情况的初步调查

目的调查海南医学院内出生本岛和出生内地人群口腔假丝酵母菌的分布情况,为口腔假丝酵母菌的分布、分子生物学的特点及其他方面研究提供基础资料。方法根据分离出的假丝酵母菌经过菌落特征、革兰染色和显色培养基培养试验等,进行初步鉴定,了解医学生中不同地区人群口腔内白色假丝酵母菌的分布情况。结果海南与出生内地人群口腔假丝酵母菌的总分离率为19.63%（53/270）,白假丝酵母菌占24.53%、热带假丝酵母菌占11.32%、光滑假丝酵母菌占41.51%、克柔假丝酵母菌占18.87%、其他假丝酵母菌占3.77%。海南本地与内陆地区人群口腔念珠菌分离率分别为17.54%和21.15%。结论健康人口腔中有多种条件致病酵母菌的寄生。出生于海南本地与内陆地区的健康人群口腔假丝酵母菌的分离率近似相等,分离出的口腔假丝酵母菌类型相等。     

人工神经网络技术用于酵母同化无机硒作用的研究

本文研究了啤酒酵母和假丝酵母对无机硒的同化能力,结果表明假丝酵母对无机硒的耐受力较强;并且假丝酵母对无机硒的同化能力和菌体产率均高于啤酒酵母．另外还研究了金属元素对假丝酵母同化无机硒及生长的影响,运用神经网络技术,以正交试验法构造训练样本,通过预测与优化,得出培养基中的无机金属元素的最佳含量．     

石油酵母菌的分类鉴定

从工厂与研究单位送检的３０株石油发酵酵母菌，经鉴定分别属于３个属６个种：其中７株为皱格假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ），６株为热带假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ），７株为解脂假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ），７株为季也蒙假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｇｕｉｌｔｉｅｒｍｏｎｄｉｉ），２株为脱蜡球拟酵母（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓｄｉｐｏｒａｆｆｉｎ），１株为皮状丝抱酵母（Ｔｉｒｃｈｏｓｐｏｒｏｎｃｕｆａｎｅｕｎ）；其中２７株属假丝酵母属，２株为球拟酵母属，１株为丝抱酵母属。     

肠道真菌过增殖小鼠模型的建立

通过给予头孢曲松造成SPF级BALB/c小鼠(Mus musculus)发生肠道菌群紊乱,进而通过连续灌胃密度为2×107CFU/mL的白假丝酵母(Candida albicans)菌液以建立小鼠肠道真菌过增殖模型;通过镜检、活菌计数、结肠组织病理切片、电镜观察等方法评价白假丝酵母在小鼠体内黏附定植的情况。实验结果显示,大剂量头孢曲松处理后,活菌计数结果显示小鼠肠道菌群出现重度失衡;灌胃真菌后,镜检可见酵母相和菌丝相的白假丝酵母,PAS染色可见小鼠结肠粘膜表面黏附有大量染成红色的圆形真菌孢子;扫描电镜观察发现小鼠结肠表面黏附大量卵圆型白假丝酵母的酵母相细胞。研究认为大剂量抗生素处理结合真菌灌胃,可成功建立小鼠肠道真菌过增殖模型。
     

肠道真菌过增殖小鼠模型的建立

通过给予头孢曲松造成SPF级BALB/c小鼠(Mus musculus)发生肠道菌群紊乱,进而通过连续灌胃密度为2×107CFU/m L的白假丝酵母(Candida albicans)菌液以建立小鼠肠道真菌过增殖模型;通过镜检、活菌计数、结肠组织病理切片、电镜观察等方法评价白假丝酵母在小鼠体内黏附定植的情况。实验结果显示,大剂量头孢曲松处理后,活菌计数结果显示小鼠肠道菌群出现重度失衡;灌胃真菌后,镜检可见酵母相和菌丝相的白假丝酵母,PAS染色可见小鼠结肠粘膜表面黏附有大量染成红色的圆形真菌孢子;扫描电镜观察发现小鼠结肠表面黏附大量卵圆型白假丝酵母的酵母相细胞。研究认为大剂量抗生素处理结合真菌灌胃,可成功建立小鼠肠道真菌过增殖模型。     

假丝酵母类金属硫蛋白的分离、纯化及功能研究

假丝酵母Cu-12(Candida sp．Cu-12)经Cu^2 诱导产生的蛋白进行Sephadex G-100和纤维素DE-52分离纯化及理化性质测定，获得的蛋白具有四个亚型，其主理化性质均与MT的定义相符，因此确定得到了假丝酵母的类金属硫蛋白，同时测定了该Cu—MT清除羟自由基和氧自由基的能力．     

玉米秸杆发酵生产蛋白饲料的研究

利用产生纤维素酶的菌种与不同的酵母菌，使玉米秆转化为具有高蛋白含量和生物活性的蛋白饲料。通过生物糖化、发酵实验，分离出适合玉米秆发酵的菌种，生产出含糖量高的蛋白饲料。结果表明：单株菌种中，用绿色木霉糖化后含糖量可达334．36mg／g，白腐真菌 绿色木霉 黑曲霉等糖化效果最好，糖化后含糖量可达389．56mg／g。从牛胃内含物中分离出的假丝酵母、牛胃白、牛胃红均有较好的产蛋白率，其中以假丝酵母最佳，3种菌有较好的共生性。     

酵母菌的分离及鉴定

从新疆吐鲁番所采的土样中分离出的３株编号为Ｓｙ９５－００１、Ｓｙ９４－００２、Ｓｙ９４－００３的酵母菌株，通过形态和生理生化试验，初步鉴定为：克洛克酵母属（Ｋｌｏｅｃｋｅａｓｐ．）、假丝酵母属（Ｃａｎｄｉｄａ）的热带假丝酵母（Ｔｒｏｐｉｃａｅｉｓ）、类酵母属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｄｅｓ）的中国类酵母（ｓｉｎｅｎｓｉｓ）     

白色念珠菌基因分型方法研究进展

目的：探讨近年来白色念珠菌基因分型方法研究的新进展。方法：查阅相关文献资料，归纳总结。结果：白色念珠菌基因分型是近年来白色念珠菌分子生物学研究中的一个热点和主要方向，其方法很多。常用的分子生物学技术各有千秋，目前倾向于计算机辅助分析，多种分型技术合用。结论：白色念珠菌基因分型方法研究有新进展，对临床念珠菌病的诊断、治疗及分子流行病学研究等具有重要意义，同时，理想的分型技术还有待进一步研究。     

白色念珠菌基因组研究进展

目的:介绍白色念珠菌基因组的最新研究进展.方法:查阅国内外大量关于白色念珠菌基因组研究的文献并进行综合详述.结果:白色念珠菌是第一个完成全基因组测序的致病性真核生物,在基因组序列信息研究上取得了重大进展,在基因功能、转录组、蛋白质组等方面获得了许多重要成果.结论:白色念珠菌的基因组研究成果将对研究白色念珠菌的致病机制、耐药机制以及抗真菌药物开发有重大的意义.     

HIV相关性口腔白色念珠菌rDNA基因型研究

目的:了解HIV感染人群和健康人群口腔白色念珠菌基因型的分布情况。方法:运用CA-INT特异性引物聚合酶链反应方法扩增白色念珠菌包含1类内含子的编码rRNA的25S rDNA区,根据扩增条带大小进行基因分型,并应用χ2检验对54株HIV感染人群和54株健康人群口腔白色念珠菌基因型别进行分析。结果:CA-INT特异性引物PCR法可将108株口腔白色念珠菌分为A、B和C型,以A型最多见,两组人群口腔白色念珠菌基因型分布基本相同,但HIV感染人群口腔白色念珠菌A型所占构成比高于健康人群,差别有统计学意义。结论:HIV感染人群和健康人群口腔白色念珠菌均具有基因多态性,CA-INT特异性引物PCR法是较好的口腔白色念珠菌种内菌株间鉴定的方法。     

10种中草药乙醇提取物抗真菌作用研究

以白色念珠菌为指示菌,测定了黄连等10种中草药的抗真菌作用.实验结果显示,不同的中草药其抗真菌作用不同,其中黄连和黄芩2种药物对白色念珠菌的抑制作用效果最好,其次是五蓓子和知母,而甘草对白色念珠菌抑菌作用较差.在一定质量浓度范围内,黄连提取物的抗真菌作用随药液浓度的增大而增强,呈剂量依赖性.其最低抑菌质量浓度为1mg/mL.将抑菌成分不同的中草药进行两两配伍,考察其对白色念珠菌的协同抑制作用,实验结果显示,除五蓓子和丹参的混合药液对白色念珠菌具有协同抑制作用外,其余3组中草药的配伍,并无协同抑制作用.     

复发性外阴阴道假丝酵母菌病菌种分子分类与药敏的研究

目的探讨临床分离酵母菌分子分类方法和药物敏感性特征.方法临床收集复发性外阴阴道假丝酵母菌病的93株酵母菌,应用法国生物梅里埃酵母菌药敏试剂盒ATBTMFUNGUS3进行体外药物敏感性试验,以核糖体基因26S rDNA D1/D2区的序列分析为依据研究其菌种的分子分类方法.结果 93株酵母菌分为光滑假丝酵母菌（38/93）、白色假丝酵母菌（23/93）、近平滑假丝酵母菌（16/93）、似平滑假丝酵母菌（9/93）等9个种11个基因型.其中有18株为敏感株,3株完全耐药.5种常用抗真菌药物的敏感性是5FC 83.87%,AMB 93.55%,FCA 27.96%,ITR 21.51%,VRC 43.01%.结论基于核糖体基因的分子分类法可以准确鉴定酵母菌临床分离株,复发性外阴阴道假丝酵母菌病菌种呈现以光滑假丝酵母菌为主的非白色假丝酵母菌占75.27%的分布特征.93株酵母菌对AMB,5FC的敏感性高于三唑类药物,三唑类药物中ITR耐药率高于VRC,FCA.药物敏感性与菌种有关.     

壳聚糖碘液抗白色念珠菌活性的研究

采用MTT法等方法研究壳聚糖碘液对白色念珠菌的抑制作用,结果得到壳聚糖碘液的50%抑菌浓度（MIC50）和最小菌浓度（MBC）分别为250 mg/L和600 mg/L。实验结果表明壳聚糖碘液具有良好的杀白色念珠菌效果。     

The glyoxylate cycle is required for fungal virulence.

Candida albicans, a normal component of the mammalian gastrointestinal flora, is responsible for most fungal infections in immunosuppressed patients. Candida is normally phagocytosed by macrophages and neutrophils, which secrete cytokines and induce hyphal development in this fungus. Neutropenic patients, deficient in these immune cells, are particularly susceptible to systemic candidiasis. Here we use genome-wide expression profiles of the related yeast Saccharomyces cerevisiae to obtain a signature of the events that take place in the fungus on ingestion by a mammalian macrophage. Live S. cerevisiae cells isolated from the phagolysosome are induced for genes of the glyoxylate cycle, a metabolic pathway that permits the use of two-carbon compounds as carbon sources. In C. albicans, phagocytosis also upregulates the principal enzymes of the glyoxylate cycle, isocitrate lyase (ICL1) and malate synthase (MLS1). Candida albicans mutants lacking ICL1 are markedly less virulent in mice than the wild type. These findings in fungi, in conjunction with reports that isocitrate lyase is both upregulated and required for the virulence of Mycobacterium tuberculosis, demonstrate the wide-ranging significance of the glyoxylate cycle in microbial pathogenesis.     

Role of Ppt1 in multiple stress responses in Candida albicans

To study the function of CaPptl, we deleted PPT1 gene from the Candida albicans genome by sequentially replacing the entire coding region with the selectable markers ARG4 and HIS1. The results showed that the deletion of Pptl did not affect the hyphal formation of C. albicans under serum induction and caused enhanced sensitivity to DNA damage, Calcofluor white and salt- induced stress. We also found that Pptl was not required for the phenotypic response of cells treated with the genotoxins, methylmethane sulfonate and hydroxyurea. Flow cytometric analyses indicated that pptlA cells and wild-type cells showed similar G2/M arrest profiles when exposed to DNA damage stress. Pptl was not required for the activation of the DNA damage response pathway, as indicated by normal phosphorylation of Rad53 and Rfa2 in pptlA cells under DNA damage stress. We suggest that Pptl plays important roles in response to various stress conditions in C. albicans.     

噬菌体展示的白色念珠菌热休克蛋白90特异表位在小鼠体内诱发的免疫应答

将展示白色念珠菌热休克蛋白(HSP)90特异表位的杂合噬菌体作为抗原免疫C57BL/6J小鼠,以检测该抗原在小鼠体内诱发的体液免疫和细胞免疫.实验结果表明:抗原PA刺激机体产生了较强的抗白色念珠菌HSP90特异性抗体;脾CD4 T和CD8 T淋巴细胞出现率明显增高;脾细胞分泌IL-2的能力有增高趋势.此外,将免疫后的小鼠通过尾静脉进行系统性白色念珠菌感染,采用组织病理学方法观察了抗原对小鼠肾脏白色念珠菌寄居数量的影响,实验结果表明,抗原对系统性白色念珠菌感染具有明显的保护作用.     

阴道念珠菌病患者阴道分泌物念珠菌培养鉴定及药敏分析

目的：了解大理地区妇科女性患者阴道分泌物念珠菌检出状况、菌群分布及对常用抗真菌药物的敏感性。方法：取有自觉阴道症状到妇科门诊就诊患者的阴道分泌物进行念珠菌培养、鉴定和药敏试验。结果：192份标本中念珠菌阳性标本55例,检出率28．6％,汉族和少数民族妇科门诊女性患者阴道分泌物念珠菌检出率分别为32．2％和25．7％,差异无显著性（P=0．324）;56株念珠菌中白色念珠菌32株、光滑念珠菌12株、克柔念珠菌5株、热带念珠菌4株、其它2株。56株念珠菌对KETO、FCZ、5-FC和Amb的耐药率最高的是KETO,达73．2％;最低的是Amb,无耐药株。结论：外阴阴道念珠菌病是妇科门诊的常见疾病,白色念珠菌仍是主要致病菌,光滑念珠菌感染逐渐增多。本地区妇科患者阴道异常分泌物检出念珠菌对常用抗真菌药物酮康唑存在普遍耐药现象,对两性霉素B基本无耐药株产生。