高压电脉冲处理对小鼠精子超微结构及体外受精的影响

用电脉冲法处理小鼠精子后进行体外受业有、体外受精贸的卵裂率和桑椹胚发育率都有所降低,以1．0kv/cm,30μs的最佳处理条件处理过的组其卵裂和桑椹胚发育率分别为63．5％和50．9％,与对照组的84．1％和80．0％相比,有显差异（P＜0．01）,说明电脉冲处理对精子受精率和胚胎的体外早期发育有影响。将1．0kv/cm,30μs和4．8kv/cm,90μs电脉冲处理后的精子与正常对照组（离心后重悬于电脉冲缓冲液）的精子分别离心固定后制作电镜切片,观察结果发现,电脉冲处理组的顶体外细胞膜膨胀了膨胀,覆盖顶体的细胞膜隐入,在顶体后区有细胞膜的断裂现象,其变化率分别是：1．0kv/cm,30μs处理组为36．3％;4．8kv/cm,90μs处理组为46．7％,较低电压脉冲处理组精子顶体部分发生了类似顶体反应的变化恩赐 高压电脉冲处理组的线粒体发现了空泡化和线粒体的大小不均一性变化。     

新型高频方波电脉冲对人胰腺癌PANC-1细胞的损伤效应

目的:探讨不同脉冲场强的新型高频方波电脉冲对人胰腺癌PANC-1细胞Caspase-3、Bcl-2、Ki-67表达的影响及损伤效应。方法:将不同强度的脉冲电场分为11组，对人胰腺癌PANC-1细胞模型进行脉冲放电处理，电场强度由低到高分别为0、500、750、1 000、1 250、1 500、1 750、2 000、2 250、2 500、2 750 V/cm。红外线测温仪检测实验前后细胞悬液温度，CCK-8法检测细胞增殖活力，TUNEL法检测细胞凋亡率，qPCR法测定Caspase-3、Bcl-2和Ki-67的mRNA表达变化，Western blot检测Caspase-3活化蛋白(Cleaved-caspase-3)、Bcl-2和Ki-67的蛋白表达变化。结果:实验前后各组PANC-1细胞悬液的温度差异无统计学意义(P>0.05)。高频方波电脉冲抑制细胞增殖能力与脉冲电场强度呈正相关，当场强处于2 500～2 750 V/cm时细胞增殖活力降至最低(P>0.05)。高频方波电脉冲对PANC-1细胞的损伤效应主要为诱导细胞凋亡，细胞凋亡率在1 250～1 500 V/c...     

电场参数对长白猪精子电穿孔效率影响的研究

用假阴道法采集长白猪精液，经电击缓冲液清洗、适当稀释后，用天津理工学院生产的基因脉冲导入仪。选择14组不同的电场参数对其进行电击处理，电击后的精子经扫描电子显微镜观察和光学显微镜观察；在扫描电镜下观察到电穿孔，在光镜下观察到台盼蓝进入精子的头部内．结果显示：弱电场能使精子电穿孔，不同电场参数处理的精子电穿孔效率不同，最佳的电穿孔条件为电压700V，电容6μF，脉冲个数6个，穿孔几率达到18．6％．     

脉冲电场作用下Hela细胞穿孔率研究

以宫颈癌Hela细胞为实验对象，利用自制脉冲电源和台盼蓝染色法计数，针对不同的电脉冲参数作用于Hela细胞上，研究了细胞可逆和不可逆电穿孔的场强阈值范围，重点研究了脉冲个数、脉冲宽度和电场强度对细胞不可逆穿孔率的影响，并选择了优化的参数组合。实验发现，在固定脉冲宽度50 μs和20个脉冲个数不变的情况下，Hela细胞出现可逆电穿孔（存活）的场强阈值范围分别为500～750 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}，出现不可逆电穿孔（死亡）的场强阈值范围为750～1 000 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}。在对电脉冲参数优化组合的实验中，Hela细胞的不可逆穿孔率随着脉冲个数、脉冲宽度和脉冲场强的增加而增加，最终趋于饱和。宜选择场强1 500 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}、脉宽60 μs和70个脉冲的参数组合，不可逆穿孔率为93.42%。     

用电穿孔法将外源基因高效导入水稻胚盾片细胞

利用电穿孔法将外源基因导入未经前处理的水稻成熟胚盾惩细胞，质粒为ｐＡＣＴ１－Ｆ，其上带有受水稻肌动蛋白基因ａｃｔｉｎ１启动控制的ＧＵＳ（ｕｉｄＡ）报告基因，电穿孔实验的条件为１００μｇＤＮＡ／ｍｌ缓冲液，３１０Ｖ／ｃｍ场强及９００μＦ电容，通过ＧＵＳ基因瞬时表达实验室证明只需一次脉冲处理便可在一个胚上获得几十个数百个转化细胞，并且发现盾片细胞较胚上其它部位的细胞更易于转化。     

相控线阵声波测井辐射器驱动信号源的设计与测试

介绍了相控线阵声波测井辐射器的工作原理，根据辐射器各个阵元的性能参数设计了两种供实验使用的激励信号源，即5通道Burst信号源和4通道脉冲信号源。Burst信号源输出电压峰值连续可调（6～30V），相邻通道之间的延迟时间可调（0～22μs），步长为1μs，输出频率可根据换能器的频带在10-250kHz选择。脉冲信号源输出电压幅度连续可调（50～150V），延迟时间为0～7vs可调，步长为0.25μs,脉冲宽度为1～4μs。利用这两种信号源可以对相控线阵声波辐射器进行相位和幅度加权控制。在实验室内对这两种信号源进行了性能测试，结果表明，两个信号源均能满足实验要求。     

电化学疗法治疗荷卵巢癌裸鼠的实验研究与机理分析

采用电脉冲结合低剂量顺铂的电化学疗法(ECT)治疗裸鼠SKOV3细胞异种种植瘤.6个疗程后，电化疗组的抑瘤率、肿瘤减小比例均高于仅用电场组的各数值，与药物组和对照组的统计学差异显著（P＜0.05）.剥离肿瘤比较发现：电化疗组和电场组肿瘤表面几乎没有血管分布，对照组的血管则非常丰富.采用免疫组化法检测肿瘤病理切片中血管内皮生长因子（VEGF）的受体KDR，结果表明，经过电场处理的肿瘤的VEGF受体KDR明显下降，肿瘤血管的生长受到明显的抑制.     

一种低频压电俘能器准静态分析与能量收集试验

针对环境中的低频振动能量,基于低频悬臂梁压电结构,建立了压电俘能器的准静态振动模型,并通过数值仿真与试验对其进行了验证.结果显示,数学模型与数值仿真及试验结果相吻合.当该结构在一阶谐振（58.9 Hz）状态,且激励加速度10 m/s2时,结构开路输出电压可达86.3 V,最大输出功率为27.5 mW.另外,针对压电俘能器的能量存储问题,采用LTC3588-1芯片,设计了相应的能量采集电路,并进行了超级电容充电试验.结果显示,对0.22F 5 V超级电容充电6 000 s可达到3.6 V电压.      

一种具有长复位延时的上电复位电路的设计

为满足大规模So C系统对长复位延时的需求,提出了一种带有掉电检测功能的低功耗新型上电复位(POR)电路.该POR电路采用Charted 0.35μm CMOS工艺,电源电压为3.3 V,稳态工作电流仅为10μA,版图面积为130μm×110μm.仅用一个p F级的片上电容,就可以实现100 ms以上的复位延时,并且使用基准电流源,使得复位延时随温度变化不明显,当温度从-40℃变化到90℃时,复位延时从108.32 ms变到98.95ms,变化小于10%.     

Al2O3颗粒增强铝基复合材料储能焊接头微观组织及性能

对0.3 mm厚Al2O3颗粒增强铝基复合材料薄板进行了储能点焊连接研究试验。发现其微型点焊接头由熔核区、热影响区和熔核向热影响区过渡的熔合区（线）组成。由于储能焊极短的焊接时间,大的冷却速率达到106 K/s,使得熔核组织显著细化,具有快速凝固特征。熔核中增强相Al2O3颗粒发生偏聚现象,在熔核边缘区域出现了气孔缺陷。当焊接电容C=6600μF、电压U=80 V、电极压力F=18 N时,获得较高力学性能的焊接接头。     

脐带血T淋巴细胞集落培养和亚群的关系

应用细胞培养和间接免疫荧光法测定脐带血，成人外周血，成人骨髓的Ｔ淋巴细胞集落形成情况及培养前后淋巴细胞亚群的变化。结果表明：脐带血的ＣＦＵ－ＴＬ显低于成人外周血（Ｐ〈０．０１），略低地成人骨髓（Ｐ〈０．０５）；培养前脐带因的ＣＯ３、Ｃ含量均显低于成人外周血（Ｐ〈０．０１），成成人骨髓相近似。脐带血的ＣＤ８细胞含量与成人外周血和成人骨髓相似（Ｐ〈０．０５）；培养后的ＣＦＵ－ＴＬ中的ＣＴ３细胞含量     

Imaging of apoptotic HeLa cells by using scanning near-field optical microscopy

By using scanning near-field optical microscopy (SNOM), HeLa cells in apoptosis process are imaged with a higher optical resolution beyond the diffraction limit. Since SNOM provides both topographic and transmitted light intensity information of a cell, it can correlate the structural characteristics and optical properties with the spatial position of the apoptotic cells. Wavelength imaging by using near-field spectroscopy shows that there is a great difference in light propagation and absorption in the cell. This unique technique can be applied to the super high resolution imaging of different components in the cell. The observations by near-field optical imaging and near-field spectroscopy indicate an inhomogeneous aggregation of the inner structure in the apoptotic HeLa cells and the change of transmission intensity of light with the apoptosis status.     

功能化介孔二氧化硅微球的药物输送行为分析

介孔二氧化硅(MSNs)作为一类新型的药物载体在药物缓控释领域的应用方兴未艾。采用模板诱导和自组装方法合成MCM-41型介孔二氧化硅纳米颗粒,并通过聚乙二醇(PEG)的表面修饰,制备出一类具有高亲水性、高孔隙率、高比表面积的MSNs修饰微球。采用氮吸附(BET)、扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、粒径分析等手段表征并对比了聚乙二醇(PEG)修饰前后的MSNs基础理化性能。在此基础上,选用阿霉素作为模型药物,包埋于介孔材料中,对比了PEG修饰前后MSNs中阿霉素的装载量、包封率及释放行为。选用乳腺癌细胞MCF-7为模型癌细胞,选用人血清蛋白(HAS)作为模型蛋白,考察了两种材料对细胞的生物安全性及对蛋白的吸附情况,并将两种材料所对应的载药微球与MCF-7进行共培养,探究两种载药系统对癌细胞的灭杀情况。     

自体肝癌细胞裂解物致敏的树突状细胞诱导抗肝癌免疫的体外研究

从术后肝癌病人的外周血中诱导树突状细胞（DC），并经自体肝癌细胞裂解物致敏DC，用流式细胞仪、^3H-TdR掺入法及MTT法检测了DC表面分子的表达、DC刺激T细胞的增殖效应及DC诱导的T细胞对肝癌细胞的杀伤作用，进而比较经自体肝癌细胞裂解物致敏的DC与其它条件下的DC功能的差异．结果显示：肝癌细胞裂解物致敏DC的功能较未致敏DC显著提高，其可诱导自体混合淋巴细胞强的增殖效应，同时诱导的T细胞对自体肝癌细胞有较强的杀伤率．     

脐血干/祖细胞分离、冷冻和复苏技术

胎儿脐血作为富含ＣＤ３４＋细胞等造血干／祖细胞一个新来源,具有细胞增殖速度快,来源充足,收集安全等特点;脐血移植同样具有安全性好,效率高,费用低等优点。随着脐血干细胞移植临床应用的成功,欧美许多发达国家已经着手建立大规模脐血库以满足临床需求。建立脐血库技术上要求改善细胞冷冻保护剂组成,控制降温速率和细胞复苏方法,以获得理想的脐血干／祖细胞收率。同时由于脐血库液氮保存设备费用昂贵,需要预先分离脐血单个核细胞以减少样本冻存体积,以满足建库实际需求。     

生物细胞在极低频电磁场中的效应

探讨极低频电磁场对洋葱根尖细胞及人肺成纤维细胞生物学特性的影响.对生长发育过程中洋葱根和体外培养的人肺成纤维细胞进行50 Hz,3 mT极低频电磁场(ELFMFS)处理,对洋葱根的外部形态及细胞有丝分裂指数、染色体形态等进行观察分析,对人肺成纤维细胞进行增殖量比较及凋亡分析.结果表明:50 Hz,3 mT ELFMFS在20 ℃时对洋葱根的生长量无明显影响,但在30 ℃下对洋葱根的生长起抑制作用且可导致根生长异常;正常培养条件下,ELFMFS照射组人肺成纤维细胞生长受到抑制,有细胞凋亡发生.ELFMFS与温度的叠加效应(50 Hz,3 mT,30 ℃)可对洋葱根的生长及根尖细胞的增殖产生重要作用,ELFMFS对人肺成纤维细胞的生长起抑制作用并可引起细胞凋亡.     

消失场荧光测量的理论和应用研究

消失场荧光技术已被广泛应用在工业、生物和医学等领域的研究工作中．本文给出各种分层结构中消失场分布的严密电磁理论．在生物和医学上，利用受激荧光强度正比于局部电场能量的规律，可根据测得的相对荧光强度算出细胞和基板的间距．文中还给出一些消失场荧光测量的应用．     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞获取及鉴定的研究进展

从孕妇外周血中获取胎儿有核红细胞是安全、方便,易于被孕妇接受的无创性产前诊断。提取孕妇外周血中胎儿有核红细胞最理想的方法是首先富集孕妇外周血,用胚胎或者胎儿血红蛋白抗体进行标记、识别,应用显微操作技术得到单个有核红细胞,继而扩增单个有核红细胞的基因组DNA,并进一步应用STR连锁分析验证为胎源性,进行遗传病诊断。     

矿井瞬变电磁场的倍数现象

为了准确计算矿井瞬变电磁场的磁场参数基于瞬变电磁场全空间和半空间研究理论研究矿井瞬变电磁场磁场强度与半空间瞬变电磁场磁场强度的关系提出矿井瞬变电磁场的倍数现象并在矿井中进行探测应用。研究结果表明全空间瞬变电磁场磁场强度与半空间瞬变电磁场磁场强度存在倍数现象即早期存在2倍的关系晚期存在2.5倍的关系延伸矿井瞬变电磁场磁场强度、电场强度、视电阻率计算也存在一定的倍数关系倍数现象的提出对研究矿井瞬变电磁场在理论和实践上具有重要的参考价值。     

电磁辐射敏感度混响室量化测试方法

针对混响室环境电磁辐射敏感度定量测试的技术需求,分析了现有测试方法的局限性,指出了存在的问题.从混响室电磁场统计分布规律和电磁辐射效应机理出发,建立了受试设备（EUT）临界干扰场强与混响室测试环境电场强度有效均值、EUT受扰概率和等效天线方向性系数最大值之间的关系.统筹考虑效应类型、等效天线耦合效率等因素,从用频设备干扰与损伤效应、强场电磁辐射效应和测控设备扰动效应等3方面,给出了EUT等效天线方向性系数的选取原则和拟合公式.测试过程中使EUT的干扰概率保持在10%~60%、混响室搅拌位置数在30~50时,混响室与均匀场环境中EUT临界干扰场强测试结果之间的误差在3 dB左右.某型军用超短波通信电台带外强场电磁辐射关机-重启效应、电源模块测控扰动效应临界干扰场强测试结果表明:混响室与均匀场环境EUT的电磁辐射临界干扰场强测试值随辐射频率的变化规律一致,二者之间的最大测试误差为5 dB,能够满足工程测试需求.