嗜水气单胞菌AH1全菌灭活疫苗的初步研究

本研究选取嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）AHl为研究对象,利用甲醛制备嗜水气单胞茼AH1全菌灭活疫苗,终浓度为0．06％甲醛可将嗜水气单胞菌AHl完全灭活;该灭活全菌疫苗腹腔注射小白鼠未见不良反应,在第21d免疫组小白鼠的血清凝集效价达2^8,而对照组没有出现凝集反应．在此基础上进行小白鼠免疫保护实验,结果表明该全菌灭活疫苗保护效果达100％．本实验将为我们进一步开发和应用嗜水气单胞茼全菌灭活疫苗奠定良好的理论和实践基础．     

大鲵细菌性感染综合症的病原分离与药敏试验分析

对细菌性感染综合症病鲵的体表、肝脏、肾脏、肠道、四肢、腹水等进行细菌分离培养与纯化,共得到12株细菌.经细菌的形态结构、生理生化特性鉴定和人工感染试验证实,布拉克枸橼酸杆菌(Citrobacter braakii),嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和洛菲不动杆菌(Acinetobacter lwoffi)为主要致病菌.药敏试验结果表明,3种病原菌对很多抗生素均存在不同程度的耐药性,而对美洛培南(Meropenem)高度敏感,其可作为防治该病的首选药物.     

中华鳖“腐皮、疖疮”并发症致病菌的病原分离与药敏试验分析

为了鉴定中华鳖"腐皮、疖疮"并发症的病原菌种类,对已呈明显发病症状且频死的20个、体重在100～1 000 g之间的中华鳖病样进行了病原菌的分离鉴定,经细菌组织涂片、分离培养与纯化、生理生化特性鉴定和人工感染试验证实,主要致病菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和洛菲不动杆菌(Acinetobacter lwoffi).药敏试验结果表明,两种病原菌对很多抗生素均存在不同程度的耐药性,而对美洛培南(Meropenem)、复方新诺明(Trimethoprim/Sulfa)等高度敏感,可作为防治该病的首选药物.     

牛蛙腐皮-红腿病并发症致病菌研究 Ⅰ.嗜水气单胞菌的致病力和生物学特性

从患腐皮－红腿病并发症病蛙腐烂处深层及肝脏分离出两株致病菌，经鉴定为奇异变形杆菌（Ｐｒｏｔｅｕｓｍｉｒａｂｉｌｉｓ）和嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）．人工感染试验结果显示奇异变形杆菌致发牛蛙腐皮病，嗜水气单胞菌致发牛蛙红腿病，且是通过伤口感染．初步认为牛蛙因奇异变形杆菌和嗜水气单胞菌合并感染而致发腐皮－红腿病并发症．     

三江平原大豆根系和水稻根系土壤细菌的分离与鉴定

大豆根系和水稻根系土壤的微生物类群中,细菌数量最多,放线菌数量次之,真菌数量最少,且根系土壤微生物总数明显高于根外土壤微生物总数.对三江平原大豆根系和水稻根系土壤中的细菌进行分离,根据细菌个体特征、菌落形态特征及其生理生化特性进行初步鉴定.结果表明,大豆根系土壤中主要分布着芽孢杆菌属、黄单胞菌属、气单胞菌属、甲基单胞菌属、假单胞菌属、根瘤菌属6个菌属;水稻根系土壤中分布着微球菌属、黄杆菌属、根瘤菌属、奈瑟氏球菌属、葡萄球菌属5个菌属.同时,探讨了土壤部分理化性质对大豆和水稻根系细菌数量的影响,明确了根系细菌数量与土壤含水量、有机质含量、pH等有一定的相关性,对今后大豆和水稻田间施肥,提高粮食产量具有一定的指导意义.     

一株粘细菌Myxococcus sp.STXZ90的分离鉴定及生物活性分析

采用灭活大肠杆菌诱导法分离粘细菌,通过形态观察、生理生化实验、16S rRNA基因序列同源性分析,对其进行鉴定并归类.并通过平板对峙法、肿瘤细胞毒性实验等检测粘细菌代谢产物的抑菌和抗肿瘤活性,RPHPLC分离抗肿瘤活性物质.分离得到一株粘细菌,鉴定结果表明该菌株为黄色粘球菌,将其命名为Myxococcus sp.STXZ90(简写为STXZ90).抑菌试验表明,STXZ90对多种人类病原菌及鱼类致病细菌如产气肠杆菌、嗜水气单胞菌等具有较高的抑制活性;STXZ90发酵上清的甲醇粗提物对多种肿瘤细胞具有广谱高效的抑制肿瘤细胞活性,对Hep-3B,Hela和HUVEC等的最低半抑制浓度(IC_(50))为0.279~1.228 mg/L.对该甲醇粗提物进行RP-HPLC分离,得到2个较纯的单峰物质,体外肿瘤细胞实验结果显示该组分有较强的抑制肿瘤细胞活性.     

荧光法研究抗甲亢药物硫脲嘧啶与蛋白质的相互结合作用

研究了硫脲嘧啶 (TU)对牛血清白蛋白 (BSA)内源荧光的猝灭效应 .在磷酸缓冲溶液 (pH7.2 ,2 0℃ )中 ,F0 F与硫脲嘧啶浓度在 4.0 0× 10 - 6 ～ 6 .0 0× 10 - 5mol L范围内存在线性关系 ,检测下限为 1.81× 10 - 7mol L ,硫脲嘧啶与牛血清白蛋白分子结合比例为 1∶1,结合常数为 1.35× 10 5L mol.它们之间存在能量转移 ,求算出硫脲嘧啶与牛血清白蛋白色氨酸残基之间距离为 0 .95nm .它们之间结合反应的热力学函数分别为 :ΔrHm =5 5 .7kJ mol,ΔrSm =2 88J (mol·K) .     

一种新的四溴荧光素-六氢吡啶磷光自组装环室温磷光标记试剂与人体疾病预报

发现四溴荧光素（HFinBr4）-六氢吡啶（Piperidine,P）在聚酰胺膜（PAM）的憎水性表面上能形成含多个HFinBr4发光分子的自组装环（[HFinBr4）n-P-SOR,其中SOR是＂self-ordered ring＂的缩写）]与（HFinBr4）n-P-SOR的室温磷光（RTP）特性.以（HFinBr4）n-P-SOR标记麦胚凝集素（WGA）的产物（WGA-（HFinBr4）n-P-SOR）能与碱性磷酸酶（ALP）发生特异性的亲和吸附（AA）反应.生成的反应产物（ALP-WGA-（HFinBr4）n-P-SOR）能极大程度地提高生物靶上HFinBr4的分子数目,导致HFinBr4的RTP信号剧烈增强,比无形成（HFinBr4）n-P-SOR时的△I p增大7.8倍,据此建立了（HFinBr4）n-P-SOR亲和吸附固体基质室温磷光法（solid substrate-room temperature phosphorimetry,SS-RTP）测定痕量ALP的新方法（简称为（HFinBr4）n-P-SOR-AA-SS-RTP）.该方法灵敏（LD为64.2 zg spot-1）、选择性好、简便、准确,用于人血清中痕量ALP含量的测定与人体疾病的预报,结果与酶联免疫法（ELISA）相吻合.同时,探讨了（HFinBr4）n-P-SOR-AA-SS-RTP测定ALP的反应机理.     

焦化废水处理中活性污泥的基础研究

从焦化厂处理焦化废水的活性污泥中分离出３６５株细菌,分别属于１０个细菌属,其中Ｇｒａｍ负反应菌占总菌数的５９．４６％。黄杆菌属、产碱菌属和芽胞杆菌属为该活性污泥中的优势种群。从上述菌株中筛选到两株对苯酚有较强去除率的细菌（假单胞菌属Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．４００３和不动杆菌属Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．３００８）,在处理焦化废水时添加５ｍｇ／Ｌ的葡萄糖,可提高该菌对废水中挥发性酚的降解     

罗丹明6G发光分子纳米微球标记凝集素-亲和吸附固体基质室温燐光法测定碱性磷酸酶

在外重原子微扰剂Pb（Ac）2存在下,基于罗丹明6 G（Rhodamine 6G,简写为R）的SiO2纳米微球（简写为R-SiO2）在醋酸纤维素膜（ACM）上于λex/λem=482.38/648.59 nm处能发射强而稳定的室温燐光信号.由该发光微球标记的麦胚凝集素（Triticum vulgare lectin简称WGA）,不仅仍能在ACM上与碱性磷酸酶（AP）发生定量的特异性亲和吸附反应,且亲和吸附反应产物能发射更强的室温燐光（RTP）信号,据此建立了R-SiO2纳米微球标记凝集素（WGA）亲和吸附（AA）固体基质室温燐光法（AA-SS-RTP）测定AP的一种新方法.本法的线性范围为1.00～360.00 ag AP spot^-1（样品体积0.4μL/斑,对应浓度2.50～900.00fg/ml））,工作曲线的回归方程为△Ip=16.24＋0.8856 m AP/ag spot^-1,r=0.9993.检出限为0.14ag spot^-1.分别对1.00和360.00 ag spot^-1 AP重复测定11次,RSD为3.9%和3.1.%.本方法灵敏、准确、精密度好,已成功用于人血清中AP的测定.     

固体基质室温磷光法测定布美他尼与人体疾病预报

本研究根据布美他尼（BMTN）抑制Fe3＋与桑色素（R）生成络合物[Fe-morin]3＋（[FeR]3＋）而导致体系的室温磷光信号显著猝灭进行的.依据抑制[Fe-桑色素]3＋络合物形成效应、BMTN含量与△Ip的线性关系、发展了一种新的测定BMTN的抑制络合反应固体基质室温磷光法（SS-RTP）.本方法的检出限为5.0 ag spot-1（对应浓度1.2×10-14 g ml-1）,线性范围为0.040-4.0 pg ml-1,显示了高的灵敏度与宽的线性范围,用于人体尿液中BMTN的测定,结果与UV相吻合.同时,用摩尔比法、等摩尔比连续变化法和红外光谱确定络合物的组成为[FeR]3＋,并探讨了该方法的反应机理     

亲和吸附固体基质室温燐光法测定痕量糖

在外重原子微扰剂Pb（Ac）2存在下,异硫氰酸荧光素（FITC）的SiO2纳米微球（简写作FITC—SiO2）在醋酸纤维素膜（ACM）上能发射强而稳定的室温燐光（room temperature phosphorescence,简称RTP）信号．由FITC-SiO2标记的麦胚凝集素（Triticum vulgate lectin,简称WGA）产物（FITC-SiO2-WGA）,不仅仍能在ACM上与萄萄糖（glucose,简称G）发生定量的特异性亲和吸附（affinity adsorption,简称AA）反应,且AA反应产物（WGA-G—WGA-FITC-SiO2）能发射更强的RTP信号,其△Ip值与G的含量成线性关系,据此建立了FITC-SiO2标记WGA-AA固体基质室温燐光法（affinity adsorption solid substrate-room temperature phosphorimetry,简称AASSRTP）测定G的一种新方法．按3Sb／k计算,本方法的检出限（LD）为0．47pg spot^-1（对应浓度为1．2×10^-9m L^-1,即5．3×10^-9 mol L^-1）,灵敏度高,用本法和G氧化酶法对比测定了血清试样中G的含量,结果相吻合．同时讨论了AASSRTP测定G的反应机理．     

测定痕量盐酸丙卡特罗新方法

基于盐酸丙卡特罗（Procaterol hydrochloride,Prh）阻抑氯酸钾（KClO3）氧化异硫氰酸荧光素（FITC）生成无磷光化合物而导致FITC的室温磷光（RTP）信号剧烈增强,以及ΔIp值与Prh含量呈线性关系的学术思想,首次建立了阻抑KClO3氧化FITC的固体基质室温磷光法（SSRTP）测定痕量Prh的新方法.该法具有很高的灵敏度（检出限为0.019 fg spot-1）,对应浓度为4.8×10-14 g ml-1）与好的选择性（相对误差为±5%时,共存离子（物）不干扰）,用于实际样品中Prh残留量的测定,结果与HPLC相吻合.同时探讨了阻抑SS-RTP测定痕量Prh的反应机理.     

富勒醇-FITC磷光标记固体基质室温磷光法测定痕量碱性磷酸酶

开发了新的富勒醇、异硫氰酸荧光素和N,N-二甲基苯胺（F-ol-（FITC）n-DMA）标记试剂.基于F-ol的活性-OH与FITC游离的-COOH反应生成含有多个FITC分子的复合物（F-ol-（FITC）n-DMA）,增加WGA-AP-WGA-F-ol FITC-DMA（WGA和AP分别为麦胚凝集素与碱性磷酸酶）生物靶的发光分子数而进一步提高SSRTP（固体基质室温磷光法）的灵敏度.用F-ol-（FITC）n-DMA标记WGA方法的检出限为0.15 ag spot-1（F-ol）与0.097 ag spot-1（（FITC）,比F-ol-DMA、FITC-DEA单发光分子标记WGA方法的检出限（0.20 ag spot-1（F-ol）,0.22 ag spot-1（FITC）低.用于血清试样中AP含量的测定结果与酶联免疫法相吻合.     

异硫氰酸荧光素-酚藏花红双发光磷光探针测定DNA

以Pb2＋为离子微扰剂时,酚藏花红（PF）与异硫氰酸荧光素（FITC）均能在滤纸上分别发射强而稳定的室温磷光（RTP）信号;当两者混合时,发现PF和FITC的RTP信号均显著增强;而1.12 ag DNA spot-1均使PF和FITC的RTP信号剧烈增强,在634与659 nm处PF和FITC的ΔIp与DNA含量成线性关系,据此建立了FITC-PF双发光磷光探针测定蛋白质的新方法.该方法的检出限（LD）分别为14zg DNA spot–1（PF）和18zg DNA spot–1（FITC）,灵敏度高,并成功用于花蜜样品中DNA含量的测定.同时探讨了FITC-PF双发光磷光探针测定痕量DNA的反应机理.     

亲和吸附固体基质室温磷光法测定痕量糖与疾病测报

在外重原子微扰剂LiAc存在下,3．5代树枝状分子-卟啉（3．5G-D-P）分子中3．5代树枝状分子（3．5G-D）与卟啉（P）在聚酰胺膜（PAM）上能发射强而稳定的室温磷光,Tween-80对3．5G-D与P的磷光信号有显著的增敏作用,而且Tween-80-3.5G-D-P标记麦胚凝集素（WGA）的产物（Tween-80-3．5G-D-P-WGA）能与糖（G）发生特异性的亲和吸附（AA）反应,其亲和吸附反应产物保持了3．5G-D与P双发光分子RTP的优良特性,且△Ip值与G的含量呈现线性关系,据此建立了Tween-80-3．5G-D-P双发光分子标记WGA亲和吸附固体基质室温磷光法（AA-SS-RTP）测定痕量G的新方法．本法的检出限为0．13fg spot^-1（1．7×10^-12 moll^-1,3.5G-D）和0．14fg spot^-1（2．2×10^-12 moll^-1,P）．无论用3．5G-D或P的激发／发射波长测定血清中G的含量,结果都与酶联免疫法（ELISA）相吻合．