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| Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选 | |
| 引用本文： | 王震,孟宪敏,曹慧青,刘冬青,冯艳,尤昕,王茵,郭莲军,屈伸.Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选[J].科学通报,2004,49(21). |
| 作者姓名： | 王震 孟宪敏 曹慧青 刘冬青 冯艳 尤昕 王茵 郭莲军 屈伸 |
| 作者单位： | 1. 中国医学科学院,中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心,北京,100037;华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉,430030 2. 中国医学科学院,中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心,北京,100037 3. 华中科技大学同济医学院基础医学院,武汉,430030 4. 延边大学医学院附属医院检验科,延吉,133000 5. 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉,430030 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，北京市科技攻关项目 |
| 摘 要： | 为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性, 并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质, 对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验, 并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验. 结果发现, 在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力. 进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选, 得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和α胰蛋白酶抑制物重链前体 (ITIH). 通过免疫共沉淀实验, 验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用. 通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白, 并且能够同Filamin相结合. 由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白, 起到了参与细胞黏着斑形成的过程. |
| 关 键 词： | Nelin 肌动蛋白 酵母双杂交 免疫共沉淀 细胞骨架蛋白 |
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