人新型肿瘤坏死因子在E.coli中的高效表达、纯化及诱导凋亡活性 |
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作者姓名: | 王晓玲 叶林柏 等 |
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作者单位: | 武汉大学病毒研究所,湖北武汉430072 |
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摘 要: | 采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因,在153位氨基酸处引入突变,使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中,SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后,hTNF基因获得大量表达,通过Ni金属螯合层析柱亲和层析获得到纯化的hTNF融合蛋白,Western blot结果表明hTNF蛋白可与抗TNF的抗血清知识性发生特异性反应,荧光染色实验检测了hTNF蛋白诱导细胞发生凋亡的活性。
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关 键 词: | 肿瘤坏死因子-α 表达 基因突变 凋亡活性 纯化 抗肿瘤作用 大肠杆菌 |
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