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草鱼前体脂肪细胞原代、传代培养及鉴定
引用本文:曹锴,李影,蔡志华. 草鱼前体脂肪细胞原代、传代培养及鉴定[J]. 重庆师范大学学报(自然科学版), 2010, 27(6). DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-6693.2010.06.004
作者姓名:曹锴  李影  蔡志华
作者单位:重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室,重庆,400047;重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室,重庆,400047;重庆师范大学生命科学学院重庆市动物生物学重点实验室,重庆,400047
基金项目:国家自然科学基金,重庆师范大学重庆市动物学重点学科拓展研究项目(2009)
摘    要:建立草鱼(Ctenopharyngodon idellus)前体脂肪细胞的培养体系,体外重现草鱼脂肪细胞的增殖分化过程.实验采用油红0染色法对脂肪细胞进行鉴定;采用倒置显微镜(NIKON)和CCD对细胞进行观察摄像;选用的健康草鱼体重为800~900 g;利用体外组织培养技术在温度为28℃,CO2浓度为5%,血清浓度为20%,pH值为7.0~7.2的条件下,以DMEM/F12培养基对来源于草鱼腹腔的脂肪组织进行原代培养;单层的原代培养细胞达到瓶底面积的70%~80%且汇合时.对细胞进行传代培养.研究发现在本实验条件下,培养48 h后组织块周围有梭形细胞迁出;3 d后细胞数量增多,多为梭形和多边形;培养8 d后大部分细胞融合;细胞内脂滴可被亲脂的油红0着色,证明为脂肪细胞.对融合后的细胞进行传代培养,可传至第4代;传代第3 d可形成致密单层;第8 d胞质内含有大量脂滴.研究初步确立了较为适宜的草鱼前体脂肪细胞离体培养体系.

关 键 词:草鱼  脂肪细胞  原代培养  传代培养

The Primary and Subculture and Identification of Grass Carp Preadipocyte from Adipose Tissue
CAO Kai,LI Ying,CAI Zhi-hua. The Primary and Subculture and Identification of Grass Carp Preadipocyte from Adipose Tissue[J]. Journal of Chongqing Normal University:Natural Science Edition, 2010, 27(6). DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-6693.2010.06.004
Authors:CAO Kai  LI Ying  CAI Zhi-hua
Abstract:
Keywords:
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