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通过卡那霉素选择体系再生可育小麦转基因植株
引用本文:徐子勤.通过卡那霉素选择体系再生可育小麦转基因植株[J].自然科学进展,2001,11(5):486-491.
作者姓名:徐子勤
作者单位:西北大学生物技术省重点实验室,西安 710069,Institut für Allgemeine Botanik, Universita Hamburg, Hamburg D-22609, Germany,Institut für Allgemeine Botanik, Universita Hamburg, Hamburg D-22609, Germany
基金项目:教育部高等学校骨干教师专项计划和陕西省教委重点科研计划项目资助
摘    要:使用卡那霉素作为选择剂建立起一套有效的小麦转化体系.预培养3d的未成熟胚在基因枪轰击前后进行高渗处理,轰击后于26℃、黑暗条件培养2周,然后用150mg/L硫酸卡那霉素选择培养2周,再转至含150mg/L硫酸卡那霉素的再生培养基进行光照培养.再生植株在温室中长出2~3片新叶后用2.5%硫酸卡那霉素水溶液喷洒;4周内,非转化体完全白化并枯萎,而转基因植株生长正常.用水稻Actinl启动子控制nptⅡ基因,卡那霉素选择体系的平均转化频率达到2.6%.高渗处理明显促进瞬间表达效果和稳定转化频率.目前已得到23个转基因小麦株系,大多数已经产生种子.Southem分析表明这些转基因株系均整合有不同拷贝的nptⅡ基因.

关 键 词:卡那霉素选择  预培养  高渗处理  可育转基因小麦
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