| E-cadherin 启动子的荧光示踪体系的建立及验证 |
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| 引用本文： | 谭拥军?覮,吴东丽,余雳,陈燕.E-cadherin 启动子的荧光示踪体系的建立及验证[J].湖南大学学报(自然科学版),2020,47(12):131-136. |
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| 作者姓名： | 谭拥军?覮 吴东丽 余雳 陈燕 |
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| 作者单位： | 湖南大学生物学院,湖南长沙 410082,湖南大学生物学院,湖南长沙 410082,湖南大学生物学院,湖南长沙 410082,湖南大学生物学院,湖南长沙 410082 |
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| 摘 要： | 为实现对肺癌 A549 细胞的EMT 示踪，构建了 E-cadherin 基因启动子的慢病毒质粒，并与包装质粒pVSVG、Δ8.91 共转染 HEK293T 细胞，包装成有活性的慢病毒，收取病毒感染 A549 细胞，利用流式细胞仪和 Western blot 检测感染成功. 进一步用 TGF-β 诱导感染成功的 A549 细胞，通过在荧光显微镜下观察荧光变化、荧光定量 PCR 和 Western blot 检测GFP 和E-cadherin 的变化，发现在 TGF-β 诱导 48 h 后，A549 细胞形态由鹅卵石样变成长梭形. 并且荧光显微镜观察到相比较于未诱导的细胞，诱导后的A549 细胞绿色荧光明显变暗，同时 GFP 和 E-cadherin 的 RNA 水平和蛋白质表达水平均降低. 以 E-cadherin 基因启动子为基础建立了A549 细胞的EMT 荧光示踪体系，为进一步研究肺癌的 EMT 过程提供了材料.
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| 关 键 词： | 启动子 E-cadherin 示踪 肺癌 细胞 |
Establishment and Validation of a Fluorescent Tracer System
Based on E-cadherin Promoter |
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| TAN Yongjun,WU Dongli,YU Li,CHEN Yan.Establishment and Validation of a Fluorescent Tracer System
Based on E-cadherin Promoter[J].Journal of Hunan University(Naturnal Science),2020,47(12):131-136. |
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| Authors: | TAN Yongjun WU Dongli YU Li CHEN Yan |
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