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反义VEGF165基因对肝癌细胞生长的抑制作用
引用本文:顾松,刘长建,乔彤,孙雪梅.反义VEGF165基因对肝癌细胞生长的抑制作用[J].南京大学学报(自然科学版),2004,40(5):613-622.
作者姓名:顾松  刘长建  乔彤  孙雪梅
作者单位:南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科,南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科,南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科,南京大学医学院附属鼓楼医院细胞及分子生物学实验室 南京,210008,南京,210008,南京,210008,南京,210008
基金项目:江苏省自然科学基金(BK2003010)
摘    要:人肝癌细胞株SMMC-7721体外转染反义VEGR_(165)基因,观察反义VEGF_(165)基因对肝癌细胞生长的作用。用分子克隆的方法构建反义VEGF_(165)基因其核表达载体 pcDNA_3-as-VEGF_(165),用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将反义基因转入SMMG-7721肝癌细胞株,观察反义VEGF_(165)基因抑制肝癌细胞 VEGF蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡的作用。RT-PCR结果显示转染反义VEGF_(165)基因后肝癌细胞内 VEG mRNA水平显著下降;ELISA方法显示转染反义基因 2 d后培养液上清 VEGF蛋白分泌显著下降((142.01±7.95)vs(1 625.52±64.46)pg/mL,n=4,P<0.01);免疫组织化学染色显示在培养板中转染及义VEGF_(165)基因的肝癌细胞细胞数显著减少,仅有少数细胞表达VEGF蛋白。流式细胞仪结果显示转染反义VEGF_(165)基因2 d后肝癌细胞的存活率下降了 12.53%(n=4,P<0.05),而凋亡率则上升了 13.12%(n=4,P<0.01)。MTT法显示反义VEGF_(165)基因能显著抑制肝癌细胞的增殖。反义VEGF_(165)基因能显著的抑制肝癌细胞VEGF蛋白的表达,抑制细胞的增殖,促进肝癌细胞凋亡。因此反义VEGF_(165)基因治疗有望成为一种新的治疗肝癌的方法。

关 键 词:血管内皮细胞生长因子  VEGF  肝癌  反义  基因治疗  细胞凋亡

Inhibition of Proliferation on Hepatocarcinoma Cells by Antisense VEGF165 Gene
Gu Song,Liu Chang-Jian,Qiao Tong,Sun Xue-Mei.Inhibition of Proliferation on Hepatocarcinoma Cells by Antisense VEGF165 Gene[J].Journal of Nanjing University: Nat Sci Ed,2004,40(5):613-622.
Authors:Gu Song  Liu Chang-Jian  Qiao Tong  Sun Xue-Mei
Institution:Gu Song,Liu Chang-Jian,Qiao Tong,Sun Xue-Mei Department of Vascular Surgery,Drum Tower Hospital,Affiliated Hospital of Medical College,Nanjing University,Nanjing,210008,China, Translational Science Laboratory,Drum Tower Hospital,Affiliated Hospital of Medical College,Nanjing University,Nanjing,210008,China
Abstract:
Keywords:vascular endothelial growth factor (VEGF)  hepatocarcinoma  gene therapy  apoptosis
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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