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中药材龟甲基因组DNA提取及PCR鉴定特征
引用本文:王淼,李萧晗,周雨晴,李明,李梓僮,李明成. 中药材龟甲基因组DNA提取及PCR鉴定特征[J]. 北华大学学报(自然科学版), 2016, 17(6): 777-780. DOI: 10.11713/j.issn.1009-4822.2016.06.016
作者姓名:王淼  李萧晗  周雨晴  李明  李梓僮  李明成
作者单位:北华大学医学检验学院,吉林吉林,132013;北华大学药学院,吉林吉林,132013
基金项目:吉林省战略性新兴产业和高新技术产业发展项目(2013G030),吉林省科技发展计划项目(20140307008YY),吉林市科技支撑计划项目(2013523010)
摘    要:目的探讨中药材龟甲基因组DNA提取方法,建立聚合酶链式反应(PCR)技术鉴别龟甲真伪的分子指纹特征.方法采用改良盐析法提取新鲜龟甲、龟甲易混品种及市售龟甲样品的基因组DNA.从Gen Bank数据库中下载中华金龟、中华草龟及5种常见伪品龟甲细胞色素b的基因序列,应用Premier 5.0引物设计软件设计特异性引物,对龟甲样品进行PCR扩增.结果改良盐析法提取新鲜龟甲样品DNA纯度均在(1.80±0.12)之间,基因组DNA大小为16.6×103bp.所设计的特异性引物只能扩增正品龟甲,扩增片段为78 bp,而伪品龟甲不能扩增出相应片段.结论改良盐析法可以从龟甲样品中提取到较高质量的基因组DNA.PCR技术鉴别中药材龟甲真伪具有特异性高、方法简便快捷、实用性较强的特点,在中药材龟甲真伪鉴别方面具有较高的应用价值.

关 键 词:龟甲  线粒体DNA  PCR  细胞色素b

Identification and Characteristics of Carapax et Plustrum Testudinis Based on PCR Technology and Modified Extraction of Genomic DNA
Wang Miao,Li Xiaohan,Zhou Yuqing,Li Ming,Li Zitong,Li Mingcheng. Identification and Characteristics of Carapax et Plustrum Testudinis Based on PCR Technology and Modified Extraction of Genomic DNA[J]. Journal of Beihua University(Natural Science), 2016, 17(6): 777-780. DOI: 10.11713/j.issn.1009-4822.2016.06.016
Authors:Wang Miao  Li Xiaohan  Zhou Yuqing  Li Ming  Li Zitong  Li Mingcheng
Abstract:
Keywords:Carapax et Plustrum Testudinis  mtDNA  PCR  cytochrome b
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