果蝇TCTP基因的原核表达与纯化

翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)即在翻译水平受到抑制的肿瘤相关蛋白,是一个高度保守且和细胞生长、死亡等功能有关的蛋白。采用PCR技术从果蝇基因组DNA中扩增果蝇dTCTP基因,经酶切后插入到表达质粒pGEX-4T-2上构建原核表达载体,转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒酶切鉴定确认;表达载体经过IPTG诱导后、经超声破碎和亲和层析分离纯化出目的蛋白并通过SDS-PAGE进行鉴定。结果:成功构建果蝇dTCTP基因表达载体,并表达可溶的、有活性的dTCTP融合蛋白。