| 摘 要： | a-N-乙酰半乳糖胺酶(α-N-acetylgalactosaminidase, αNAGA)是进行人红细胞(red blood cell, RBC) A→O血型改造的工具酶. 采用PCR法从国内临床标本的脑膜脓毒性金黄杆菌中克隆出新型aNAGA基因, 应用基因工程和蛋白质纯化技术获得足量高纯度的重组酶. 重组酶分子量为49.6 kD, 专一性强, 比活力高, 在25℃及pH 6.8条件下, 1 h内完全酶解1 U A1型浓缩RBC (约100 mL/U)需1.5 mg酶, 而1 h内完全酶解1 U A2型浓缩RBC仅需0.4 mg酶. 酶解后的A型RBC与抗A单克隆抗体、人源O型血清反应均不凝集, 与A, B, O, AB等各型血清的主侧配血实验成功, 主要稀有血型不变. 流式细胞仪检测结果表明, 酶解后A抗原和A1抗原消失, H抗原增加, 证明A→O血型改造成功. 获得的酶解通用型RBC可以安全输给A, B, O, AB等各型受血者, 不会因ABO血型不合发生输血反应. 脑膜脓毒性金黄杆菌来源的?NAGA是十分理想的A→O血型改造的工具酶, 具有良好的应用前景, 对于提高输血安全性、消除血液偏型、节约输血成本、增强应急输血保障能力具有重要意义.
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