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卵形鲳鲹TNFSF6的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备
引用本文:王鹭,李海平,周永灿,孙云,曹贞洁.卵形鲳鲹TNFSF6的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备[J].海南大学学报(自然科学版),2020,38(2):153-158.
作者姓名:王鹭  李海平  周永灿  孙云  曹贞洁
作者单位:海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海南省热带水生生物技术重点实验室,海南海口570228,海南大学海洋学院,海南海口570228,海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海南省热带水生生物技术重点实验室,海南海口570228;海南大学海洋学院,海南海口570228,海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海南省热带水生生物技术重点实验室,海南海口570228,海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室,海南海口570228;海南大学海南省热带水生生物技术重点实验室,海南海口570228
基金项目:海南省自然科学基金;海南大学科研平台建设项目;国家海洋局海洋经济创新示范城市项目;海南省南海名家青年项目
摘    要:为了研究卵形鲳鲹肿瘤坏死因子配体6(TNFSF6)的功能,本研究构建了TNFSF6的原核表达载体并制备了其多克隆抗体,首先通过PCR扩增技术扩增获得了TroTNFSF6的开放阅读框序列,并构建了原核表达重组质粒pET-TroTNFSF6,随后将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21中,进行原核表达并获得重组蛋白rTroTNFSF6.结果显示,重组蛋白rTroTNFSF6大小约46.5 kDa,其最适诱导温度为20℃,诱导时间为8 h,IPTG的最佳浓度为0.6 mmol/L.可溶性分析表明,重组蛋白rTroTNFSF6主要在沉淀中,以包涵体的形式存在.将纯化后的重组蛋白rTroTNFSF6免疫小鼠以制备多克隆抗体,ELISA检测结果表明其效价高达1∶32 000.本研究为进一步探究卵形鲳鲹TNFSF6的功能奠定了基础.

关 键 词:卵形鲳鲹  肿瘤坏死因子配体  原核表达  多克隆抗体

Prokaryotic Expression,Purification and Polyclonal Antibody Preparation of TNFSF6 from Golden Pompano (Trachinotus ovatus)
Wang Lu,Li Haiping,Zhou Yongcan,Sun Yun,Cao Zhenjie.Prokaryotic Expression,Purification and Polyclonal Antibody Preparation of TNFSF6 from Golden Pompano (Trachinotus ovatus)[J].Natural Science Journal of Hainan University,2020,38(2):153-158.
Authors:Wang Lu  Li Haiping  Zhou Yongcan  Sun Yun  Cao Zhenjie
Abstract:
Keywords:
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