肺炎克雷伯氏菌漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达 |
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引用本文: | 王建玲,桂爽,付禹,张妤彤,郑东,路福平,刘逸寒.肺炎克雷伯氏菌漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达[J].天津科技大学学报,2019(1). |
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作者姓名: | 王建玲 桂爽 付禹 张妤彤 郑东 路福平 刘逸寒 |
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作者单位: | 工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室工业酶国家工程实验室天津科技大学生物工程学院 |
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摘 要: | 以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)基因组为模板,通过PCR扩增得到其漆酶基因lac;基于毕赤酵母密码子偏爱性优化后,得到新型漆酶基因lacm;将其与大肠杆菌–毕赤酵母(E. coli-P. pastoris)穿梭表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K-lacm;将该质粒转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中,实现该漆酶的胞外分泌表达,发酵液中重组漆酶(rLACM)活力达0.37 U/m L.经对rLACM酶学性质分析表明:rLACM的最适温度为70℃,最适pH为8.0,在30~70℃、pH 5.0~9.0活力稳定.
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