肉葡萄球菌电转化条件的优化 |
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引用本文: | 张变强,唐巧巧,柯灵超,张健,王德培,朱燕,高强.肉葡萄球菌电转化条件的优化[J].天津科技大学学报,2019(3). |
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作者姓名: | 张变强 唐巧巧 柯灵超 张健 王德培 朱燕 高强 |
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作者单位: | 工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院;天津科技大学后勤管理处 |
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摘 要: | 肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S.carnosus TM300电转化效率的影响.研究表明:S.carnosus TM300在B2生长培养基中生长到A_(578)=0.6时收集菌体,使用GS电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2 450 V、间距2 mm电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM复苏培养基,37℃、180 r/min摇床复苏培养4 h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×10~3μg~(-1).
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