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Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域介导盐抗性和pH感应
引用本文:杨礼富①②,张博①,王磊①,杨苏声①.Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域介导盐抗性和pH感应[J].科学通报,2008,53(19):2313-2317.
作者姓名:杨礼富①②  张博①  王磊①  杨苏声①
作者单位:① 中国农业大学生物学院微生物与免疫学系, 农业微生物资源与应用农业部重点实验室, 北京 100193; 
② 中国热带农业科学院橡胶研究所, 热带作物栽培生理学农业部重点开放实验室, 儋州 571737
基金项目:国家高技术研究发展计划(批准号: 2003AA241150)和国际科技合作项目(批准号: 2006DFA31060)资助
摘    要:Na+/H+逆向转运蛋白在维持细胞质低的Na+浓度和pH稳态等生命活动过程中扮演重要角色, 然而, 到目前为止, 对原核微生物Na+/H+逆向转运蛋白的C末端亲水域的结构和功能还知之甚少. 我们曾从达坂喜盐芽孢杆菌(Halobacillus dabanensis) D-8菌株中克隆得到第一个中度嗜盐菌来源的Na+/H+逆向转运蛋白基因nhaH. 疏水性分析表明, NhaH的C末端亲水域只包含9个氨基酸残基(395PLIKKLGMI403), 大大短于与之高度同源的SynNhaP1和ApNhaP的C末端亲水域. 本研究采用PCR方法, 构建NhaH蛋白的C末端亲水域缺失突变体nhaHΔC. 耐盐性实验表明, C末端亲水域的缺失显著地抑制大肠杆菌缺陷株KNabc的互补能力. 基于荧光强度的翻转膜活性测定结果显示, NhaHΔC的Na+/H+和Li+/H+逆向转运蛋白活性显著低于NhaH, 而且前者的Na+/H+逆向转运蛋白活性向酸端偏移, 表明Na+/H+逆向转运蛋白NhaH短的C末端亲水域在阳离子结合、转运和pH感应上起重要作用.

关 键 词:达坂喜盐芽孢杆菌  Na+/H+逆向转运蛋白  C末端亲水域  盐抗性  pH感应
收稿时间:2008-01-14
修稿时间:2008-06-13
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