| 转杂色鲍抗冻肽-Ⅲ基因表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP的构建 |
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| 引用本文： | 李卫东,陈维宇,柯才焕.转杂色鲍抗冻肽-Ⅲ基因表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP的构建[J].厦门大学学报(自然科学版),2009,48(5). |
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| 作者姓名： | 李卫东 陈维宇 柯才焕 |
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| 作者单位： | 厦门大学海洋与环境学院,福建,厦门,361005 |
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| 基金项目： | 国家863计划课题，农业科研专项，现代农业产业技术体系建设专项 |
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| 摘 要： | 现代转基因技术是一种快速改良品种特性的有效方法.采用转基因技术提高我国南方重要贝类经济养殖品种--杂色鲍的耐低温特性是扩大其养殖范围的重要手段.以pIRES2-EGFP为基本载体,以合成并经过功能鉴定的抗冻肽(AFP)和杂色鲍肌动蛋白启动子(HdiActinP)为插入元件,首先用限制性内切酶BamHⅠ和 EcoRⅠ对基本载体pIRES2-EGFP和AFP-Ⅲ进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接得到载体pIRES2-EGFP-AFP.随后利用限制性内切酶SacⅠ和 EcoRⅠ对载体pIRES2-EGFP-AFP和HdiActinP进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接最终得到杂色鲍转AFP-Ⅲ的表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP,经过聚合酶链式反应和测序验证证明载体构建成功.
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| 关 键 词： | 杂色鲍 抗冻肽 启动子 载体构建 |
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