重组质粒pPIC9K-pZP3α-hCGβ CTP109~145的构建 |
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作者姓名: | 李伟涛 潘善培 谢琪旋 肖銮娟 芦春斌 |
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作者单位: | 暨南大学生殖免疫研究中心,广东,广州 510632 |
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基金项目: | 国家"九·五"计划生育科技攻关项目(96-904-01-01) |
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摘 要: | 目的:为发展多特异性避孕疫苗,制备重组抗原pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145,用基因工程技术构建重组质粒pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145,方法:根据pZP3α全长和hCG 0633CTP109-145编码的DNA序列设计两对引物,通过部分重聚合酶链式反应(overlaping PCR),扩增出pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145片断,克隆到载体质粒pPIC9K中,然后导入大肠杆菌DH5α,用PCR和双酶切反应鉴定重组质粒,并用DNA测序仪对重组质粒测序,结果:3步PCR扩增出pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145DNA片段,插入到载体质粒pPIC9K的克隆位点,获得重组pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145表达质粒,测序结果显示插入序列与设计预期完全一致。结论:重组质粒pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145构建成功,为表达重组抗原pPIC9K-pZP3α-hCGβCTP^109-145,探讨重组多特异性避孕疫苗抗生育效能的研究建立基础。
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关 键 词: | 重组质粒 pPIC9K pZP3α hCGβ CTP^109-145 猪卵透明带 人绒毛膜促性腺激素 部分重叠聚合酶链式反应 避孕疫苗 重组抗原 |
文章编号: | 1000-9965(2002)03-0100-07 |
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