| 缺铁玉米根cDNA文库的构建及蛋白和cDNA差异比较 |
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| 引用本文： | 印莉萍 祁晓廷. 缺铁玉米根cDNA文库的构建及蛋白和cDNA差异比较[J]. 首都师范大学学报(自然科学版), 1999, 20(4): 54-60 |
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| 作者姓名： | 印莉萍 祁晓廷 |
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| 作者单位： | 首都师范大学生物系 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用异硫氰酸胍酚氯仿法分离铁胁迫玉米根总ＲＮＡ，然后采用寡聚ｄＴ 纤维素层析柱法纯化Ｐｏｌｙ（Ａ） ＋ ＲＮＡ．用含有ＸｈｏＩ位点的ｌｉｎｋｅｒｐｒｉｍｅｒ 锚定合成ｃＤＮＡ 第一条链后，采用替代法合成第二条链，接着连接上ＥｃｏＲＩＡｄａｐｔｅｒ 以便定向重组到载体上．ｃＤＮＡ 经过ＸｈｏＩ消化和分级分离后，带有ＸｈｏＩ和ＥｃｏＲＩ粘性末端的ｃＤＮＡ 定向重组到λＺＡＰ表达载体的ＸｈｏＩ和ＥｃｏＲＩ位点上．经体外包装，重组的噬菌体转导宿主菌ＸＬ１Ｂｌｕｅ ＭＲＦ，最终获得滴度为４－５ ×１０５ ｐｆｕ／ｕｇ 的λＺＡＰ 表达ｃＤＮＡ 文库．通过差异筛选法和质膜双向电泳验证了缺铁和加铁条件下ｃＤＮＡ 和质膜蛋白的差异
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| 关 键 词： | 铁胁迫cDNA文库 差异筛选 质膜蛋白 双向电泳 |
Construction of cDNA Library from Iron |deficiency Induced Maize Roots and Comparing the Difference of Protein and cDNA between Iron |deficient and Iron |sufficient Condition |
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| Yin Liping Qi Xiaoting Liu Xianglin Sun Jin Wu Juan Qiu Zesheng. Construction of cDNA Library from Iron |deficiency Induced Maize Roots and Comparing the Difference of Protein and cDNA between Iron |deficient and Iron |sufficient Condition[J]. Journal of Capital Normal University(Natural Science Edition), 1999, 20(4): 54-60 |
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| Authors: | Yin Liping Qi Xiaoting Liu Xianglin Sun Jin Wu Juan Qiu Zesheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | iron |deficient cDNA library differential hybridization screening PM proteins two |dimensional electrophoresis. |
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