| 人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选 |
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| 引用本文： | 王静,钟华,吴玲玲,赵慧,王腊梅,孙志萍,庞丽娟,何芳.人脐静脉内皮细胞中C-型瞬时型感受器电位通道3RNA干扰质粒构建及筛选[J].石河子大学学报,2013(4):463-467. |
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| 作者姓名： | 王静 钟华 吴玲玲 赵慧 王腊梅 孙志萍 庞丽娟 何芳 |
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| 作者单位： | 石河子大学医学院病理生理教研室/新疆地方病与民族高发病教育部重点实验室;石河子大学医学院医学机能实验中心;石河子大学医学院病理系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31160239、81160018) |
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| 摘 要： | 为了探讨C-型瞬时型感受器电位通道3(TRPC3)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的作用,本实验针对GenBank中人TRPC3的cDNA序列设计合成短发卡RNA(shRNA),将其转染到HUVEC中,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的转染效率,实时定量PCR和免疫印记检测TRPC3mRNA和蛋白表达及转染后的干扰效率。结果显示:(1)激光共聚焦显微镜下观察到绿色荧光,说明已成功将shTRPC3转入到HUVEC中;(2)转染48h后用G418进行稳定筛选后,TRPC3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),干扰效率分别为71%和74%。由此可知,在HUVEC中成功构建了TRPC3干扰质粒。
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| 关 键 词： | 内皮细胞 瞬时型感受器电位通道 shRNA |
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