| 重组果蝇Merlin 蛋白的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 张发友,周浩.重组果蝇Merlin 蛋白的表达与纯化[J].南开大学学报,2021,54(1):35. |
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| 作者姓名： | 张发友 周浩 |
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| 摘 要： | NF2 基因的的缺失会导致Ⅱ型多发性神经纤维瘤的发生.NF2 又称Merlin,和ERM 蛋白家族成员类似,Merlin 蛋白N 端的FERM 结构域与C 端的CTD 结构域存在分子内的相互作用,从而形成一种自抑制的闭合构象;当Merlin 蛋白N、C 端分子内的相互作用被破坏时,能释放出N 端的FERM 结构域,从而能与许多效应因子相互作用,形成一种伸展的打开的构象. 果蝇Merlin 蛋白的N、C 端分子内的相互作用比人源Merlin 更强,其构象的调节机制还不是很清楚. 构建了原核表达质粒pET-28a-His6-sumo-Merlin,通过大肠杆菌表达系统表达出了可溶性的重组果蝇Merlin 蛋白,通过镍柱亲和层析,凝胶过滤层析获得了纯度较高、构象均一的重组蛋白Merlin.而且,还利用分析型超速离心分析了重组蛋白Merlin 的构象,为进一步研究Merlin 蛋白的三维结构及其构象的调节机制提供了一定的基础.
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| 关 键 词： | Merlin 原核表达 层析 蛋白纯化 |
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