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MiTERF3基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建
引用本文:张晓娟,孙美涛,梅雯,自加吉,杨勇琴,熊伟. 人MiTERF3基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建[J]. 井冈山大学学报(自然科学版), 2017, 0(1): 40-44
作者姓名:张晓娟  孙美涛  梅雯  自加吉  杨勇琴  熊伟
作者单位:大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000;大理市第一人民医院呼吸内科, 云南, 大理 671000,大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000,大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000,大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000,大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000,大理大学基础医学院, 云南, 大理 671000;云南省昆虫生物医药研发重点实验室, 云南, 大理 671000
基金项目:国家自然科学基金项目(81560458,31601155);云南省教育厅科学研究基金重点项目(2014Z126);大理大学博士科研启动基金项目(BSKY2012018);大理大学大学生创新创业训练计划项目(201628)
摘    要:MiTERF3基因编码线粒体基因转录和能量代谢的负调控因子。采用PCR技术对人MiTERF3基因5''侧翼上游1251 bp启动子序列进行扩增,并将其克隆至荧光素酶表达载体pGL6-TA,构建人MiTERF3基因启动子荧光素酶报告基因质粒。经酶切、测序鉴定后,将其用脂质体转染体外培养的HEK293细胞株,利用双荧光素酶测定系统检测其表达活性。研究结果表明,克隆获得的1251 bp DNA序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确。含人MiTERF3基因启动子的报告基因荧光素酶的表达活性显著提高(P<0.05),约为对照组(空载体pGL6-TA)的9.8倍。本研究通过对人MiTERF3基因启动子的克隆及其荧光素酶表达载体构建与表达活性的测定,为进一步阐明人MiTERF3基因表达的调控机制奠定实验基础。

关 键 词:MiTERF3  启动子  报告基因  荧光素酶  载体
收稿时间:2016-07-20
修稿时间:2016-09-19

CLONING OF HUMAN MiTERF3 PROMOTER REGION AND CONSTRUCTION OF THE LUCIFERASE REPORTER GENE VECTORS CONTAINING HUMAN MiTERF3 PROMOTER
ZHANG Xiao-juan,SUN Mei-tao,MEI Wen,ZI Jia-ji,YANG Yong-qin and XIONG Wei. CLONING OF HUMAN MiTERF3 PROMOTER REGION AND CONSTRUCTION OF THE LUCIFERASE REPORTER GENE VECTORS CONTAINING HUMAN MiTERF3 PROMOTER[J]. Journal of Jinggangshan University(Natural Sciences Edition), 2017, 0(1): 40-44
Authors:ZHANG Xiao-juan  SUN Mei-tao  MEI Wen  ZI Jia-ji  YANG Yong-qin  XIONG Wei
Affiliation:College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China;Dali First People''s Hospital, Dali, Yunnan 671000, China,College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China,College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China,College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China,College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China and College of Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China;Yunnan Provincial Key Laboratory of Entomological Biopharmaceutical R & D, Dali, Yunnan 671000, China
Abstract:
Keywords:human MiTERF3 gene  promoter  reporter gene  luciferase  vector
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