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杂志ISSN号
小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR 方法的建立
作者姓名:
冯育芳
邢进
岳秉飞
贺争鸣
基金项目:
基金项目: 国家科技支撑计划( No. 2015BAI07B02)
摘 要:
摘要: 目的为实验动物微生物检测提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌和空肠弯曲菌多重PCR 检测方法。方法根据小肠结肠炎耶尔森氏菌fox 基因、假结核耶尔森氏菌inv 基因、志贺氏菌ipaH 基因及空肠弯曲菌gyrA 基因设计并筛选出特异性引物; 优化退火温度等条件,分析多重PCR 的特异性、敏感性,使用该多重PCR 方法检测小鼠和豚鼠样品。结果多重PCR 扩增出了预计的PCR产物,即小肠结肠炎耶尔森氏菌( 511 bp) 、假结核耶尔森氏菌( 779 bp) 、志贺氏菌( 290 bp) 和空肠弯曲菌( 156 bp) 。该方法的灵敏度为1 × 10 - 3 ng /μL( 小肠结肠炎耶尔森氏菌、假结核耶尔森氏菌、志贺氏菌) 和1 × 10 - 2 ng /μL( 空肠弯曲菌) 。特异性检测未从其他菌中检测出阳性条带。使用该方法从样品中检测出不等的阳性样品数。结论该多重PCR 方法对实验动物微生物检测具有很好的应用和开发前景。
关 键 词:
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小肠结肠炎耶尔森氏菌
假结核耶尔森氏菌
志贺菌
空肠弯曲菌
多重PCR<
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