| 新型Argonaute蛋白的挖掘及体外活性表征 |
| |
| 引用本文： | 方蒙君,司振军,沈培杰,黄 迪,徐志南.新型Argonaute蛋白的挖掘及体外活性表征[J].海南师范大学学报(自然科学版),2023,36(4):440-446. |
| |
| 作者姓名： | 方蒙君 司振军 沈培杰 黄 迪 徐志南 |
| |
| 作者单位： | 浙江大学 化学工程与生物工程学院，浙江 杭州 310000 |
| |
| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2023YFC3040400） |
| |
| 摘 要： | 本研究旨在挖掘新的具有可编码核酸切割活性的Argonaute（Ago）核酸酶。利用已报
道的Ago核酸酶的氨基酸序列在NCBI中进行序列比对获得同源性较高的新型Ago蛋白作为候选
蛋白；以大肠杆菌为异源表达系统，对候选蛋白的基因进行密码子优化；表达后的目的蛋白利用亲
和层析进行分离和纯化；设计核酸定向切割体系以测试纯化蛋白的可编码核酸酶活性。结果显
示，序列比对共获得4个候选Ago蛋白，均可在大肠杆菌中可溶表达，再通过亲和层析得到了高纯
度的目的蛋白；纯化后的4个候选Ago蛋白经测试均具有可编码核酸内切酶活性。本研究建立的
Ago核酸酶的挖掘和体外活性表征的方法，可高效获取新型Ago，对于后继Ago核酸酶的研究工作
具有借鉴和参考价值。
|
| 关 键 词： | Argonaute蛋白 可编码核酸内切酶 核酸酶活性表征 |
The Mining and in Vitro Characterization of Novel Argonaute |
| |
| FANG Mengjun,SI Zhenjun,SHEN Peijie,HUANG Di,XU Zhinan.The Mining and in Vitro Characterization of Novel Argonaute[J].Journal of Hainan Normal University:Natural Science,2023,36(4):440-446. |
| |
| Authors: | FANG Mengjun SI Zhenjun SHEN Peijie HUANG Di XU Zhinan |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Argonaute protein programmable endonuclease nuclease activity characterization |
|
| 点击此处可从《海南师范大学学报(自然科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《海南师范大学学报(自然科学版)》下载免费的PDF全文 |
