| SARS-CoV刺突蛋白受体结合区的表达及高潜在中和性人源抗体的制备 |
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| 引用本文： | 李郁,姚西英,杨勇,陈江浩,张思河,宋斐,包国强,杨向民,陈志南.SARS-CoV刺突蛋白受体结合区的表达及高潜在中和性人源抗体的制备[J].科学技术与工程,2005,5(14):939-943. |
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| 作者姓名： | 李郁 姚西英 杨勇 陈江浩 张思河 宋斐 包国强 杨向民 陈志南 |
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| 作者单位： | 第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学西京医院,西安,710032;第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学唐都医院,西安,710032 |
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| 基金项目： | 此课题受"973"项目资助(项目号2003CB514127) |
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| 摘 要： | 为表达SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)受体结合区(RBD)并从中筛选高潜在中和性人源抗体,我们用原核表达并纯化的SARS-CoVSRBD进行抗体库的筛选。从多个曾患SARS的健康人血中获得淋巴细胞,PCR扩增全部抗体基因,插入Pcomb3x载体中,构建抗SARS病毒人源噬菌体抗体库。利用噬菌体表面呈现技术,从中筛选结合SARS-CoVSRBD的人源抗体并用ELISA及Westernblot鉴定阳性克隆,竞争ELISA检测人源抗体阻断SARS-CoVSRBD与其受体ACE2的结合情况。结果为构建了库容量6.2×107的免疫Fab噬菌体抗体库,重组率为75%,从中筛选获得9株特异抗SARS-CoVSRBD的人源Fab抗体,ELISA及Westernblot检测均为阳性。其中有一株能阻断SARS-CoVSRBD与其受体ACE2的结合。本实验结果表明:人源抗SARS-CoVSRBD基因工程抗体的获得,一方面将对SARS疾病的特异性预防,治疗和诊断提供新的途径,同时也提示SARS-CoV亚单位疫苗可以用于SARS疾病的预防。
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| 关 键 词： | 严重急性呼吸综合征(SARS) 刺突蛋白 RBD 噬菌体抗体 Fab |
| 修稿时间： | 2005年5月13日 |
Expression of Receptor-binding Domain of SARS-CoV Spike Protein and Isolation of Highly Potent Neutralizing Antibody |
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| LI Yu,YAO Xiying,YANG Yong,CHEN Jianghao,ZHANG Sihe,SONG Fei,BAO Guoqiang,Yang Xiangmin,Chen Zhinan.Expression of Receptor-binding Domain of SARS-CoV Spike Protein and Isolation of Highly Potent Neutralizing Antibody[J].Science Technology and Engineering,2005,5(14):939-943. |
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| Authors: | LI Yu YAO Xiying YANG Yong CHEN Jianghao ZHANG Sihe SONG Fei BAO Guoqiang Yang Xiangmin Chen Zhinan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SARS spike RBD phage antibody Fab |
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