利用CRISPR/Cas9系统构建LMNA基因突变 AC16人心肌细胞系 |
| |
引用本文: | 邹镭,邢兵,杨柳.利用CRISPR/Cas9系统构建LMNA基因突变 AC16人心肌细胞系[J].广西师范大学学报(自然科学版),2023(3):163-170. |
| |
作者姓名: | 邹镭 邢兵 杨柳 |
| |
作者单位: | 1. 广西师范大学生命科学学院;2. 珍稀濒危动植物生态与环境保护教育部重点实验室(广西师范大学) |
| |
基金项目: | 国家自然科学基金(31560319); |
| |
摘 要: | LMNA基因突变引发核纤层蛋白(LaminA/C)及其互作蛋白表达异常,引起机体一系列生理学反应,导致核纤层蛋白病发生,目前其具体致病机制尚不清楚。本文利用CRISPR/Cas9技术,选取符合sgRNA筛选原则的致病突变位点,成功构建了携带LMNA突变Q517X的细胞系,并对突变细胞系与LaminA/C相连或互作的LaminB1、PCNA、P53、PKCα等基因的RNA表达水平与蛋白表达水平及突变细胞核膜骨架形态进行检测,发现:Q517X突变细胞的LaminB1、P53、PCNA基因mRNA表达量显著降低约70%;LaminA/C蛋白几乎不表达,PKCα、LaminB1、P53等蛋白的表达量分别降低75%、60%、80%。结果表明,Q517X突变通过改变AC16人心肌细胞LMNA相关基因的表达进而影响细胞核正常骨架结构与功能。
|
关 键 词: | LMNA 核纤层蛋白 核纤层蛋白病 CRISPR/Cas9 基因编辑 |
|