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一种适用于批量筛选和鉴定拟南芥突变体的快速DNA提取方法
作者姓名:张小明  勾雪娇  梁鹏  林华明  赵晋洁  胡向阳
作者单位:1.中国科学院 昆明植物研究所 西南野生生物种质资源库, 云南 昆明 650201;
摘    要:DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立.

关 键 词:拟南芥   DNA提取   SDS抽提法   聚合酶链式反应   突变体鉴定   三引物法
收稿时间:2015-08-19
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