| 大鼠骨髓间充质干细胞视网膜下移植观察 |
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| 作者姓名： | 张杰 单清 马萍 姜严明 陈鹏 温静霞 周游 钱焕文 裴雪涛 |
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| 作者单位： | 1. 军事医学科学院输血医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
3. 军事医学科学院输血医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(批准号:2001CB509906,G1999053903),国家"八六三"计划(批准号:2001AA216151,2002AA205051),北京市科委(批准号:H020220010190)和全军"十五"指令性课题(批准号:01L020)资助项目 |
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| 摘 要： | 观察了骨髓间充质干细胞(MSC)在视网膜下移植后的定位以及分化后的蛋白表达情况.将体外培养的雄性大鼠MSC移植于成年大鼠视网膜下,4周后取眼球做石蜡切片并用Y染色体鉴定;将MSC用重组腺相关病毒AAV-gfp感染后移植,4周后在荧光显微镜下观察眼球冰冻切片中绿色荧光蛋白(GFP)的表达;并用4',6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记的MSC进行视网膜下移植,分别于10,20,35和50 d后观察DAPI荧光分布,并在阳性的连续切片上做神经元核(Ne-uN),神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和角蛋白(CK)免疫组化染色.结果显示,光学显微镜下Y染色体原位杂交观察,荧光显微镜下GFP观察及DAPI观察均发现来源于MSC的阳性细胞融入了原来的视网膜结构,这些细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层,细胞形态结构与周围视网膜相似;DAPI标记观察表明,移植后至50 d无细胞增生,50 d后阳性细胞数量和分布范围缩小.免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞NeuN,NSE,GFAP和CK的表达与周围组织相同.3种标记方法检测到的视网膜结构完整,但某些区域的细胞排列不整齐.上述结果表明,MSC在视网膜下移植后可与原视网膜结构相融合,MSC具有分化为类视网膜结构的能力.
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| 关 键 词： | 骨髓间充质干细胞 视网膜 Y染色体 绿色荧光蛋白 细胞移植 |
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