海水养殖真鲷肝CYP1A基因的克隆与表达 |
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作者姓名: | 魏艳 王克坚 杨明 王春光 任洪林 |
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作者单位: | 近海海洋环境科学国家重点实验室(厦门大学),厦门大学环境科学研究中心,福建厦门361005 |
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摘 要: | 根据国外已发表野生真鲷(Pagrus major)肝CYP1A cDNA同源序列,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从我国海水养殖真鲷(Pagrus major)的肝脏中扩增出P4501A基因全长cDNA序列(1548bp).用基因重组技术将P4501A cDNA克隆于pTrc-CKS载体,在大肠杆菌TOP10F'诱导表达,将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;其表达产物为89ku,获得了表达融合蛋白CKS-CYP1A.该项研究将为利用免疫学技术研究有机污染物的毒性效应机制以及探讨P450酶作为毒性效应的生物标志物奠定基础.
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关 键 词: | 真鲷 CYP450 CYP1A RT-PCR 原核表达 |
收稿时间: | 2006-01-30 |
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